A hisztamin farmakodinámiájának in vivo értékelése

A kutatás átfogó célja olyan, gyermekgyógyászati ​​használatra alkalmas non-invazív megközelítések kifejlesztése és validálása, amelyek elegendőek a genotípus-fenotípus asszociációk közvetlen értékelésére, mint a mikrovaszkuláris funkció megváltoztatására képes gyógyszerek koncentráció-hatás profiljának meghatározó tényezőire. A projekt konkrét célja annak felmérése, hogy a korábban validált lézeres Doppler technikával meghatározott mikrovaszkuláris véráramlás használható-e megbízható helyettesítő végpontként, amely képes funkcionálisan megkülönböztetni a hisztamin biotranszformációjához kvantitatívan fontos gének polimorfizmusainak hatásait. A kutatók azt feltételezik, hogy a mikrovaszkuláris véráramlás sebessége érvényes helyettesítő markerként használható az allél variánsok funkcionális következményeinek megkülönböztetésére azokban az enzimekben, amelyek elsősorban a hisztamin biotranszformációjáért felelősek.

A projekt két részből áll:

1. A hisztamin iontoforézis validálása (a mikrovaszkuláris véráramlás lézer Doppler áramlásméréssel történő mérésével) gyermekkorú kohorszban farmakológiai provokációs tesztként, amely képes megbízhatóan jellemezni a bőr mikrovaszkulációjának normális fiziológiai válaszát erre a xenobiotikumra, amelyet 50 diagnosztizált gyermek bevonásával végeztek. allergiás betegségek vagy más "allergiás" állapotok, ahol az antihisztaminokkal végzett kezelés jelenti az orvosi "ellátás standardját". Az alanyok ezzel egyidejűleg (ellenoldali végtagokon) hisztamin-próbát kapnak az "arany standard" bőrszúrási teszttel (időfüggő válaszreakció, amelyet a wheal- és flare-reakciók sorozatos értékelésével értékelnek) és egy korábban leírt iontoforézis technikával (időfüggő válasz a mikrovaszkuláris sorozatos vizsgálattal) véráramlás validált lézer Doppler technikával). Ezenkívül ezekből az alanyokból DNS-t izolálnak genotipizálás céljából a 2. részben leírtak szerint).
2. A hisztamin kihívásra adott mikrovaszkuláris válasz értékelése, mint helyettesítő marker, amely képes funkcionálisan megkülönböztetni a genotípus-fenotípus asszociációkat a polimorf módon expresszált gének esetében, amelyek mennyiségileg fontosak a hisztamin biotranszformációjának és farmakológiai inaktivációjának szabályozásában, először 150 további alany genotipizálásával, akiknél megállapították az allergiás diagnózist. olyan betegség, amelyben az antihisztaminokkal végzett kezelés jelenti az orvosi „ellátás standardját”. Az elsődlegesen fontos jelölt gének, a hisztamin-N-metiltranszferáz (HNMT) és a diamin-oxidáz (DAO) genotípus-adatai így összesen 200 alanytól lesznek elérhetők. A HNMT (elsősorban a hisztamin biotranszformációjáért felelős enzim) ismert genotípus-fenotípus asszociációi alapján két alanycsoportot választanak ki azok közül, akiket szélsőségesen diszkordáns fenotípus-megközelítéssel vizsgáltak: azokat az alanyokat, akikről a genotípus alapján azt jósolják, hogy csökkent HMNT-aktivitást (pl. 1 vagy 0 funkcionális alléllal rendelkezők) és az előrejelzések szerint normális enzimaktivitású alanyok (vagyis azok, akiknek két funkcionális allélje van). Ezek a vizsgálati résztvevők ezután iontoforézissel transzkután hisztamin-próbát kapnak, majd ismételten értékelik a mikrovaszkuláris reaktivitást, amelyet a véráramlás sebességének időátlagos mérése tükröz, egy bevált lézer Doppler technikával. A véráramlás sebességének és a lézeres Doppler-vizsgálat egyéb paramétereinek statisztikai analízise a két vizsgálati kohorsz HNMT és DAO expressziójának és funkcionális következményeinek összehasonlítására szolgál elsődleges eredménymérésként, helyettesítő értékelésként a hisztamin választ használva. a fenotípus.