Évaluation in vivo de la pharmacodynamique de l'histamine

L'objectif global de cette recherche est de développer et de valider des approches non invasives adaptées à une utilisation en pédiatrie qui sont suffisantes pour évaluer directement les associations génotype-phénotype comme déterminants du profil concentration-effet des médicaments capables de modifier la fonction microvasculaire. L'objectif spécifique de ce projet sera d'évaluer si le débit sanguin microvasculaire déterminé par une technique laser Doppler précédemment validée peut être utilisé comme critère de substitution fiable capable de discriminer fonctionnellement les effets des polymorphismes dans les gènes qui sont quantitativement importants pour la biotransformation de l'histamine. Les chercheurs émettent l'hypothèse que la vitesse du flux sanguin microvasculaire peut être utilisée comme marqueur de substitution valide pour discriminer les conséquences fonctionnelles des variants alléliques dans les enzymes principalement responsables de la biotransformation de l'histamine.

Le projet comprend deux parties :

1. Validation de l'ionophorèse de l'histamine (avec mesure du débit sanguin microvasculaire par fluximétrie Doppler laser) dans une cohorte pédiatrique comme test de provocation pharmacologique capable de caractériser de manière fiable la réponse physiologique normale de la microvascularisation cutanée à ce xénobiotique abordée par une étude chez 50 enfants ayant un diagnostic d'une maladie allergique ou d'autres conditions "allergiques" où le traitement avec des antihistaminiques représente la "norme de soins" médicale. Les sujets recevront simultanément (sur les extrémités controlatérales) des provocations à l'histamine par le test de piqûre cutanée "gold standard" (réponse dépendante du temps évaluée par une évaluation en série des réactions d'érythème et de poussée) et par une technique d'ionophorèse décrite précédemment (réponse dépendante du temps par une évaluation en série des réactions microvasculaires). flux sanguin à l'aide d'une technique laser Doppler validée). De plus, l'ADN sera isolé de ces sujets pour le génotypage comme décrit dans la partie 2).
2. Évaluation de la réponse microvasculaire à l'histamine en tant que marqueur de substitution capable de discriminer fonctionnellement les associations génotype-phénotype pour les gènes exprimés de manière polymorphe qui sont quantitativement importants dans la régulation de la biotransformation et de l'inactivation pharmacologique de l'histamine abordée d'abord par le génotypage de 150 sujets supplémentaires qui ont un diagnostic établi d'allergie maladie où le traitement avec des antihistaminiques représente la "norme de soins" médicale. Les données génotypiques des gènes candidats d'intérêt principal, l'histamine-N-méthyltransférase (HNMT) et la diamine oxydase (DAO), seront ainsi disponibles sur un total de 200 sujets. Sur la base des associations génotype-phénotype connues pour la HNMT (l'enzyme principalement responsable de la biotransformation de l'histamine), deux cohortes de sujets seront sélectionnées parmi celles étudiées en utilisant une approche de phénotype extrêmement discordant : les sujets prédits, sur la base du génotype, avoir une activité réduite de la HMNT (c'est-à-dire , ceux avec 1 ou 0 allèles fonctionnels) et les sujets censés avoir une activité enzymatique normale (c'est-à-dire ceux avec deux allèles fonctionnels). Ces participants à l'étude recevront ensuite une provocation transcutanée à l'histamine administrée par iontophorèse, suivie d'une évaluation répétée de la réactivité microvasculaire reflétée par une mesure moyenne dans le temps de la vitesse du flux sanguin à l'aide d'une technique laser Doppler établie. L'analyse statistique de la vitesse du flux sanguin et d'autres paramètres de l'évaluation laser Doppler sera utilisée comme principale mesure de résultat pour la comparaison des deux cohortes d'étude en ce qui concerne l'expression de HNMT et de DAO et leurs conséquences fonctionnelles, en utilisant la réponse à l'histamine comme évaluation de substitution. de phénotype.