In-vivo-Bewertung der Histamin-Pharmakodynamik

Das übergeordnete Ziel dieser Forschung ist die Entwicklung und Validierung nicht-invasiver Ansätze, die für den Einsatz in der Pädiatrie geeignet sind und ausreichen, um Genotyp-Phänotyp-Assoziationen als Determinanten des Konzentrations-Wirkungs-Profils von Arzneimitteln, die die mikrovaskuläre Funktion verändern können, direkt zu bewerten. Das spezifische Ziel dieses Projekts wird es sein zu beurteilen, ob der durch eine zuvor validierte Laser-Doppler-Technik bestimmte mikrovaskuläre Blutfluss als zuverlässiger Ersatzendpunkt verwendet werden kann, der in der Lage ist, die Auswirkungen von Polymorphismen in den Genen, die für die Histamin-Biotransformation quantitativ wichtig sind, funktionell zu unterscheiden. Die Forscher stellen die Hypothese auf, dass die mikrovaskuläre Blutflussgeschwindigkeit als gültiger Surrogatmarker verwendet werden kann, um die funktionellen Folgen allelischer Varianten in den Enzymen zu unterscheiden, die hauptsächlich für die Biotransformation von Histamin verantwortlich sind.

Das Projekt umfasst zwei Teile:

1. Validierung der Histamin-Iontophorese (mit Messung des mikrovaskulären Blutflusses durch Laser-Doppler-Flowimetrie) in einer pädiatrischen Kohorte als pharmakologischer Provokationstest, der in der Lage ist, die normale physiologische Reaktion der kutanen Mikrovaskulatur auf dieses Xenobiotikum zuverlässig zu charakterisieren, adressiert durch eine Studie an 50 Kindern mit einer Diagnose bei allergischen Erkrankungen oder anderen "allergischen" Zuständen, bei denen die Behandlung mit Antihistaminika den medizinischen "Standard der Behandlung" darstellt. Die Probanden erhalten gleichzeitig (an den kontralateralen Extremitäten) Histamin-Provokationen durch den „Goldstandard“-Haut-Prick-Test (zeitabhängige Reaktion, bewertet durch serielle Bewertung von Quaddel- und Flare-Reaktionen) und durch eine zuvor beschriebene Iontophorese-Technik (zeitabhängige Reaktion durch serielle Bewertung von mikrovaskulären Blutfluss unter Verwendung einer validierten Laser-Doppler-Technik). Zusätzlich wird DNA von diesen Probanden für die Genotypisierung isoliert, wie in Teil 2 beschrieben).
2. Die Bewertung der mikrovaskulären Reaktion auf eine Histamin-Provokation als Ersatzmarker, der in der Lage ist, Genotyp-Phänotyp-Assoziationen für polymorph exprimierte Gene, die bei der Regulierung der Biotransformation und pharmakologischen Inaktivierung von Histamin quantitativ wichtig sind, funktionell zu unterscheiden, wurde zuerst durch Genotypisierung von 150 weiteren Probanden mit einer etablierten Allergiediagnose behandelt Krankheit, bei der die Behandlung mit Antihistaminika den medizinischen "Standard der Behandlung" darstellt. Genotypdaten für Kandidatengene von primärem Interesse, Histamin-N-Methyltransferase (HNMT) und Diaminoxidase (DAO), werden somit von insgesamt 200 Probanden verfügbar sein. Basierend auf bekannten Genotyp-Phänotyp-Assoziationen für HNMT (das Enzym, das hauptsächlich für die Histamin-Biotransformation verantwortlich ist), werden zwei Kohorten von Probanden aus denjenigen ausgewählt, die mit einem extrem diskordanten Phänotyp-Ansatz untersucht wurden: Probanden, bei denen basierend auf dem Genotyp eine reduzierte HMNT-Aktivität vorhergesagt wurde (d. h. , diejenigen mit 1 oder 0 funktionellen Allelen) und Probanden, bei denen vorhergesagt wurde, dass sie eine normale Enzymaktivität haben (d. h. diejenigen mit zwei funktionellen Allelen). Diese Studienteilnehmer erhalten dann eine transkutane Histamin-Provokation durch Iontophorese, gefolgt von einer wiederholten Bewertung der mikrovaskulären Reaktivität, die durch eine zeitlich gemittelte Messung der Blutflussgeschwindigkeit unter Verwendung einer etablierten Laser-Doppler-Technik widergespiegelt wird. Die statistische Analyse der Blutflussgeschwindigkeit und anderer Parameter aus der Laser-Doppler-Bewertung wird als primäre Ergebnismessung für den Vergleich der beiden Studienkohorten in Bezug auf die Expression von HNMT und DAO und deren funktionellen Konsequenzen verwendet, wobei die Histamin-Reaktion als Surrogat-Bewertung verwendet wird des Phänotyps.