In vivo vurdering af histaminfarmakodynamik

Det overordnede mål med denne forskning er at udvikle og validere ikke-invasive tilgange, der er egnede til brug i pædiatri, som er tilstrækkelige til direkte at evaluere genotype-fænotype-associationer som determinanter for koncentration-effekt-profilen af ​​lægemidler, der er i stand til at ændre mikrovaskulær funktion. Det specifikke mål med dette projekt vil være at vurdere, om mikrovaskulær blodgennemstrømning bestemt af en tidligere valideret laser Doppler-teknik kan bruges som et pålideligt surrogat-endepunkt, der er i stand til funktionelt at skelne virkningerne af polymorfismer i generne, som er kvantitativt vigtige for histaminbiotransformation. Forskerne antager, at mikrovaskulær blodgennemstrømningshastighed kan bruges som en gyldig surrogatmarkør til at skelne de funktionelle konsekvenser af allelvarianter i de enzymer, der primært er ansvarlige for biotransformationen af ​​histamin.

Projektet omfatter to dele:

1. Validering af histaminiontoforese (med måling af mikrovaskulær blodgennemstrømning ved laser-doppler flowimetri) i en pædiatrisk kohorte som en farmakologisk provokationstest, der pålideligt kan karakterisere den normale fysiologiske reaktion af den kutane mikrovaskulatur på dette xenobiotikum behandlet af en undersøgelse hos 50 børn med en diagnose af allergisk sygdom eller andre "allergiske" tilstande, hvor behandling med antihistaminer repræsenterer den medicinske "plejestandard". Forsøgspersoner vil samtidig (på kontralaterale ekstremiteter) modtage histamin-udfordringer ved "guldstandard" kutan priktest (tidsafhængig respons vurderet ved seriel vurdering af wheal- og flare-reaktioner) og ved en tidligere beskrevet iontoforeseteknik (tidsafhængig respons ved seriel vurdering af mikrovaskulært blodgennemstrømning ved hjælp af en valideret laser Doppler-teknik). Derudover vil DNA blive isoleret fra disse emner til genotypebestemmelse som beskrevet i del 2).
2. Vurdering af mikrovaskulær respons på histamin-udfordring som en surrogatmarkør, der er i stand til funktionelt at skelne genotype-fænotype-associationer for polymorfisk udtrykte gener, der er kvantitativt vigtige ved regulering af biotransformationen og farmakologisk inaktivering af histamin, som først behandles ved at genotypebestemme 150 yderligere forsøgspersoner, som har en etableret diagnose af allergisk. sygdom, hvor behandling med antihistaminer repræsenterer den medicinske "plejestandard". Genotypedata for kandidatgener af primær interesse, histamin-N-methyltransferase (HNMT) og diaminoxidase (DAO), vil således være tilgængelige fra i alt 200 forsøgspersoner. Baseret på kendte genotype-fænotype-associationer for HNMT (enzymet, der primært er ansvarligt for histamin-biotransformation), vil to kohorter af forsøgspersoner blive udvalgt fra dem, der er undersøgt ved hjælp af en ekstrem uoverensstemmende fænotype-tilgang: emner, der, baseret på genotype, forudsiges at have reduceret HMNT-aktivitet (dvs. dem med 1 eller 0 funktionelle alleler) og forsøgspersoner, der er forudsagt at have normal enzymaktivitet (dvs. dem med to funktionelle alleler). Disse undersøgelsesdeltagere vil derefter modtage en transkutan histamin-udfordring leveret ved iontoforese, efterfulgt af gentagen vurdering af mikrovaskulær reaktivitet afspejlet af tidsgennemsnitlig måling af blodgennemstrømningshastighed ved hjælp af en etableret laser-doppler-teknik. Statistisk analyse af blodgennemstrømningshastighed og andre parametre fra laser-doppler-vurderingen vil blive brugt som den primære udfaldsmåling til sammenligning af de to studiekohorter med hensyn til ekspression af HNMT og DAO og de funktionelle konsekvenser heraf, ved brug af histaminrespons som surrogatvurdering af fænotype.