In vivo vurdering av histaminfarmakodynamikk

Det overordnede målet med denne forskningen er å utvikle og validere ikke-invasive tilnærminger egnet for bruk i pediatri som er tilstrekkelige til å direkte evaluere genotype-fenotype-assosiasjoner som determinanter for konsentrasjon-effektprofilen til legemidler som er i stand til å endre mikrovaskulær funksjon. Det spesifikke målet for dette prosjektet vil være å vurdere om mikrovaskulær blodstrøm bestemt av en tidligere validert laser-doppler-teknikk kan brukes som et pålitelig surrogatendepunkt som er i stand til funksjonelt å diskriminere effekten av polymorfismer i genene som er kvantitativt viktige for histaminbiotransformasjon. Etterforskerne antar at mikrovaskulær blodstrømningshastighet kan brukes som en gyldig surrogatmarkør for å diskriminere de funksjonelle konsekvensene av allelvarianter i enzymene som primært er ansvarlige for biotransformasjonen av histamin.

Prosjektet omfatter to deler:

1. Validering av histaminiontoforese (med måling av mikrovaskulær blodstrøm ved hjelp av laser-doppler-flowimetri) i en pediatrisk kohort som en farmakologisk provokasjonstest som er i stand til pålitelig å karakterisere den normale fysiologiske responsen til den kutane mikrovaskulaturen på dette fremmedfrekvente stoffet adressert av en studie på 50 barn med en diagnose av allergisk sykdom eller andre "allergiske" tilstander der behandling med antihistaminer representerer den medisinske "behandlingsstandarden". Forsøkspersonene vil samtidig (på kontralaterale ekstremiteter) få histaminutfordringer ved "gullstandard" kutan prikktest (tidsavhengig respons vurdert ved seriell vurdering av wheal- og fakkelreaksjoner) og ved en tidligere beskrevet iontoforeseteknikk (tidsavhengig respons ved seriell vurdering av mikrovaskulær blodstrøm ved bruk av en validert laser-doppler-teknikk). I tillegg vil DNA bli isolert fra disse forsøkspersonene for genotyping som beskrevet i del 2).
2. Vurdering av mikrovaskulær respons på histamin-utfordring som en surrogatmarkør som er i stand til funksjonelt å diskriminere genotype-fenotype-assosiasjoner for polymorfisk uttrykte gener som er kvantitativt viktige for å regulere biotransformasjonen og farmakologisk inaktivering av histamin, adressert først ved å genotype 150 tilleggspersoner som har en etablert diagnose av allergisk. sykdom der behandling med antihistaminer representerer den medisinske "standarden for omsorg". Genotypedata for kandidatgener av primær interesse, histamin-N-metyltransferase (HNMT) og diaminoksidase (DAO), vil dermed være tilgjengelig fra totalt 200 forsøkspersoner. Basert på kjente genotype-fenotype-assosiasjoner for HNMT (enzymet som er primært ansvarlig for histamin-biotransformasjon), vil to kohorter av forsøkspersoner bli valgt fra de som er studert ved bruk av en ekstrem disharmonisk fenotypetilnærming: emner som, basert på genotype, er spådd å ha redusert HMNT-aktivitet (dvs. , de med 1 eller 0 funksjonelle alleler) og individer som er spådd å ha normal enzymaktivitet (dvs. de med to funksjonelle alleler). Disse studiedeltakerne vil deretter motta en transkutan histaminutfordring levert ved iontoforese, etterfulgt av gjentatt vurdering av mikrovaskulær reaktivitet reflektert av tidsgjennomsnittlig måling av blodstrømhastighet ved bruk av en etablert laser-doppler-teknikk. Statistisk analyse av blodstrømhastighet og andre parametere fra laser-dopplervurderingen vil bli brukt som den primære utfallsmålingen for sammenligning av de to studiekohortene med hensyn til uttrykk for HNMT og DAO og de funksjonelle konsekvensene av disse, ved bruk av histaminrespons som surrogatvurdering av fenotype.