Оценка фармакодинамики гистамина in vivo

Общая цель этого исследования состоит в том, чтобы разработать и утвердить неинвазивные подходы, подходящие для использования в педиатрии, которые достаточны для прямой оценки ассоциаций генотип-фенотип как детерминант профиля концентрации-эффекта препаратов, способных изменять функцию микроциркуляторного русла. Конкретной целью этого проекта будет оценка того, можно ли использовать микрососудистый кровоток, определенный с помощью ранее утвержденного метода лазерной допплерографии, в качестве надежной суррогатной конечной точки, способной функционально различать эффекты полиморфизмов в генах, которые количественно важны для биотрансформации гистамина. Исследователи предполагают, что скорость кровотока в микрососудах может использоваться в качестве надежного суррогатного маркера для выявления функциональных последствий аллельных вариантов ферментов, в первую очередь ответственных за биотрансформацию гистамина.

Проект включает в себя две части:

1. Валидация ионофореза гистамина (с измерением кровотока в микрососудах методом лазерной допплеровской флоуиметрии) в педиатрической когорте в качестве фармакологического провокационного теста, способного надежно охарактеризовать нормальный физиологический ответ кожного микроциркуляторного русла на этот ксенобиотик, которому посвящено исследование у 50 детей с диагнозом аллергических заболеваний или других «аллергических» состояний, при которых лечение антигистаминными препаратами представляет собой медицинский «стандарт лечения». Субъекты будут одновременно (на противоположных конечностях) получать гистаминовые пробы с помощью «золотого стандарта» кожного прик-теста (зависимый от времени ответ, оцениваемый путем последовательной оценки реакций волдырей и воспалений) и с помощью ранее описанного метода ионофореза (зависимый от времени ответ посредством последовательной оценки микрососудистых кровоток с использованием утвержденного метода лазерной допплерографии). Кроме того, у этих субъектов будет выделена ДНК для генотипирования, как описано в части 2).
2. Оценка микрососудистого ответа на введение гистамина в качестве суррогатного маркера, способного функционально различать ассоциации генотип-фенотип для полиморфно экспрессируемых генов, которые количественно важны для регуляции биотрансформации и фармакологической инактивации гистамина, в первую очередь путем генотипирования 150 дополнительных субъектов с установленным диагнозом аллергии заболевание, при котором лечение антигистаминными препаратами представляет собой медицинский «стандарт лечения». Таким образом, будут доступны данные о генотипах генов-кандидатов, представляющих основной интерес, гистамин-N-метилтрансферазы (HNMT) и диаминоксидазы (DAO) в общей сложности у 200 субъектов. Основываясь на известных ассоциациях генотип-фенотип для HNMT (фермента, в первую очередь ответственного за биотрансформацию гистамина), две когорты субъектов будут выбраны из тех, кого изучали с использованием подхода с крайним дискордантным фенотипом: субъекты, на основании генотипа которых прогнозируется снижение активности HMNT (т. , лица с 1 или 0 функциональными аллелями) и субъекты с прогнозируемой нормальной ферментативной активностью (т. е. лица с двумя функциональными аллелями). Затем этим участникам исследования будет проведено чрескожное введение гистамина с помощью ионофореза, после чего будет проведена повторная оценка реактивности микрососудов, отражаемая усредненным по времени измерением скорости кровотока с использованием известного лазерного допплеровского метода. Статистический анализ скорости кровотока и других параметров лазерной допплеровской оценки будет использоваться в качестве основного измерения результата для сравнения двух групп исследования в отношении экспрессии HNMT и DAO и их функциональных последствий с использованием гистаминового ответа в качестве суррогатной оценки. фенотипа.