In vivo beoordeling van histamine-farmacodynamiek

Het algemene doel van dit onderzoek is het ontwikkelen en valideren van niet-invasieve benaderingen die geschikt zijn voor gebruik in de kindergeneeskunde en die voldoende zijn om genotype-fenotype-associaties direct te evalueren als bepalende factoren voor het concentratie-effectprofiel van geneesmiddelen die de microvasculaire functie kunnen veranderen. Het specifieke doel van dit project zal zijn om te beoordelen of de microvasculaire bloedstroom bepaald door een eerder gevalideerde laser-Doppler-techniek kan worden gebruikt als een betrouwbaar surrogaateindpunt dat in staat is om de effecten van polymorfismen in de genen die kwantitatief belangrijk zijn voor de biotransformatie van histamine functioneel te onderscheiden. De onderzoekers veronderstellen dat microvasculaire bloedstroomsnelheid kan worden gebruikt als een geldige surrogaatmarker om de functionele gevolgen van allelische varianten in de enzymen die primair verantwoordelijk zijn voor de biotransformatie van histamine te onderscheiden.

Het project bestaat uit twee delen:

1. Validatie van histamine-iontoforese (met meting van de microvasculaire bloedstroom door laser Doppler-flowimetrie) in een pediatrisch cohort als een farmacologische provocatietest die in staat is om op betrouwbare wijze de normale fysiologische respons van de cutane microvasculatuur op dit xenobioticum te karakteriseren, aangepakt door een studie bij 50 kinderen met een diagnose van allergische aandoeningen of andere "allergische" aandoeningen waarbij behandeling met antihistaminica de medische "standaardzorg" vertegenwoordigt. Proefpersonen zullen gelijktijdig (op contralaterale extremiteiten) histamine-uitdagingen ondergaan door middel van de "gouden standaard" huidpriktest (tijdsafhankelijke respons beoordeeld door seriële beoordeling van wheal en flare-reacties) en door een eerder beschreven iontoforesetechniek (tijdsafhankelijke respons door seriële beoordeling van microvasculaire bloedstroom met behulp van een gevalideerde laser Doppler-techniek). Bovendien zal van deze proefpersonen DNA worden geïsoleerd voor genotypering zoals beschreven in deel 2).
2. Beoordeling van de microvasculaire respons op histamine-uitdaging als een surrogaatmarker die in staat is functioneel onderscheid te maken tussen genotype-fenotype-associaties voor polymorf tot expressie gebrachte genen die kwantitatief belangrijk zijn bij het reguleren van de biotransformatie en farmacologische inactivatie van histamine, eerst aangepakt door genotypering van 150 extra proefpersonen met een vastgestelde diagnose van allergie ziekte waarbij behandeling met antihistaminica de medische "standaardzorg" vertegenwoordigt. Genotypegegevens voor kandidaatgenen van primair belang, histamine-N-methyltransferase (HNMT) en diamineoxidase (DAO), zullen dus beschikbaar zijn van in totaal 200 proefpersonen. Gebaseerd op bekende genotype-fenotype-associaties voor HNMT (het enzym dat primair verantwoordelijk is voor de biotransformatie van histamine), zullen twee cohorten van proefpersonen worden geselecteerd uit degenen die zijn bestudeerd met behulp van een extreem tegenstrijdige fenotypebenadering: proefpersonen waarvan wordt voorspeld, op basis van genotype, dat ze verminderde HMNT-activiteit hebben (d.w.z. , die met 1 of 0 functionele allelen) en proefpersonen waarvan wordt voorspeld dat ze normale enzymactiviteit hebben (d.w.z. die met twee functionele allelen). Deze studiedeelnemers zullen dan een transcutane histamine-uitdaging krijgen die wordt toegediend door iontoforese, gevolgd door herhaalde beoordeling van microvasculaire reactiviteit weerspiegeld door tijdgemiddelde meting van de bloedstroomsnelheid met behulp van een gevestigde laser-Doppler-techniek. Statistische analyse van de bloedstroomsnelheid en andere parameters van de laser Doppler-beoordeling zullen worden gebruikt als de primaire uitkomstmaat voor vergelijking van de twee studiecohorten met betrekking tot de expressie van HNMT en DAO en de functionele gevolgen daarvan, met behulp van histamine-respons als surrogaatbeoordeling van fenotype.