QuantiFeron -TB Gold Testin (QFT-G) herkkyys ja spesifisyys psoriaasipotilailla

Psoriaasista ja nivelpsoriaasista kärsivät potilaat voivat saada anti-TNF-alfa-hoitoa, joka vaatii ennakkoseulonnan piilevän tuberkuloosin (LTB) varalta. Tällä hetkellä LTB:n seulonta perustuu tuberkuliiniihotestiin (TST), rintakehän röntgensäteisiin ja kyselyyn tuberkuloosille altistavista tekijöistä. TST:n tärkeimmät haitat ovat spesifisyyden puute, joka johtuu ristireaktiivisuudesta Bacille Calmette-Guerinin (BCG) ja muiden ei-tuberkuloosi-mykobakteerien kanssa sekä anergian riski immunosuppressoituneilla potilailla. Lisäksi on ehdotettu, että psoriaasipotilaiden iho voi olla herkempi, mikä johtaa lisääntyneeseen TST:hen, mikä ei välttämättä heijasta LTB:n tilaa.

Äskettäin on kehitetty uusi LTBI-määritys, joka arvioi interferonin (IFN) -y:n vapautumista muistiefektori-T-soluista, joita on stimuloitu in vitro spesifisillä mykobakteeriantigeeneillä, ESAT-6 (varhainen eritysantigeenikohde-6) ja CFP-10 ( viljelysuodosproteiini-10) [9-10]. QuantiFeron -TB Gold -testissä (QFT-G) mitataan ELISA:n avulla IFN-y:n pitoisuudet supernatanteissa levymuodossa ja "putkissa" (QFT-GIT) -muodossa, kun taas entsyymikytkentäinen immunospot (ELISPOT) havaitsee yksittäisen IFN-y:n tuottamisen. T-solut (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, UK).

The Centers for Disease Control hyväksyi kokoveren IFN-y-määritykset vaihtoehtoiseksi seulontastrategiaksi TST:lle immunokompetenteilla henkilöillä [11], mutta sen kliininen käyttökelpoisuus yhtenä testinä LTBI:n havaitsemiseksi immuunipuutteisilla potilailla on kiistanalainen. Lisäksi sen käyttökelpoisuus on kiistanalainen. psoriaasista ja nivelpsoriaasista kärsivillä potilailla ei ole vielä varmistettu. Tähän tutkimukseen osallistuu sata psoriaasista ja nivelpsoriaasipotilasta sekä 50 tervettä kontrollia.

Ilmoittautuneita koehenkilöitä pyydetään täyttämään yksityiskohtainen sosiodemografinen ja tuberkuloosiseulontakysely, joka sisältää sukupuolen, iän, syntymäpaikan ja työpaikan, aiemman BCG-rokotteen, läheisen kontaktin tuberkuloosipotilaiden kanssa tai tuberkuloosin ennaltaehkäisyn. Seulontatyö sisältää kliinisen sairauden aktiivisuuden arvioinnin Disease Activity Score 28:n (DAS-28) ja Psoriasis Area Severity Indexin (PASI) avulla, aiemman tai nykyisen systeemisillä kortikosteroideilla ja immunosuppressiivisilla lääkkeillä tehdyn hoidon dokumentoinnin sekä kuvantamisen (rintakehän röntgenkuva) .

Kaikille koehenkilöille tehdään TST- ja QFT-G-testi. Sertifioitu teknikko antaa 2 TU:n PPD-annoksen Mantoux-menetelmää käyttäen ja kovettuma mitataan 72 tunnin kuluttua. TST katsotaan positiiviseksi, jos se on vähintään 5 mm nivelreumapotilailla ja 10 mm kontrolleilla. Halkaisijaltaan < 2 mm:n kovettuman puuttuminen kirjataan anergiseksi ja negatiivisten TST-tulosten määriteltiin olevan enemmän kuin 2 mutta vähemmän kuin 5 mm reaktiot nivelreumapotilaille.

QFT-G-testi Toisen sukupolven QuantiFeron® (QIFN) kokoveren IFN-määritys (Cellestis) suoritetaan ja tulkitaan valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Lyhyesti sanottuna testi koostui negatiivisesta kontrollista (nollakuoppa, ts. kokoveri ilman antigeenejä tai mitogeeniä), positiivisesta kontrollista (mitogeenikuoppa, eli kokoveri, joka oli stimuloitu mitogeenin fytohemagglutiniinilla [PHA]) ja kahdesta näytekaivosta, ts. kokoveri, joka on stimuloitu jommallakummalla M. tuberculosis -spesifisistä antigeeneistä, Early Secretory Antigen Target 6:lla (ESAT-6) tai Culture Filtrate Protein 10:llä (CFP-10).

Viisi ml heparinisoitua kokoverta otetaan QFT-G:tä varten ennen PPD-testiä. Verinäytteitä inkuboidaan 16-20 tuntia (yön yli) 37 °C:ssa kosteassa ilmakehässä. IFN-y-tasoja nollakuopissa pidetään taustalla ja ne vähennetään mitogeenikuopan ja antigeenistimuloitujen kuoppien tuloksista. Tuloksia pidetään positiivisina, jos.IFN-y:n pitoisuus näytekaivossa ESAT-6:lla ja/tai CFP-10:llä stimulaation jälkeen on suurempi tai yhtä suuri kuin 0,35 IU/ml (kun on vähennetty nollakuopan arvo ), riippumatta positiivisen kontrollin tuloksista (mitogeenikuoppa). Tuloksia pidetään negatiivisina, jos vaste spesifisille antigeeneille (nollakuopan arvon vähentämisen jälkeen) on alle 0,35 IU/ml ja jos positiivisen kontrollin IFN-y-tasot (kun nollakuopan arvo on vähennetty) ) on suurempi tai yhtä suuri kuin 0,5 IU/ml. Tuloksia pidetään määrittämättöminä, jos molemmat antigeenistimuloidut näytekaivot ovat negatiivisia (eli <0,35 IU/ml nolla-kuopan arvon vähentämisen jälkeen) ja jos positiivisen kontrollikuopan arvo on alle 0,5 IU/ml vähentämisen jälkeen. nolla-arvo

nolla hyvin.

QFT-G-testi Toisen sukupolven QuantiFeron® (QIFN) kokoveren IFN-määritys (Cellestis) suoritettiin ja tulkittiin valmistajan ohjeiden mukaisesti.

Lyhyesti sanottuna testi koostui negatiivisesta kontrollista (nollakuoppa, eli kokoveri ilman antigeenejä tai mitogeeniä), positiivisesta kontrollista (mitogeenikuoppa eli kokoveri, joka oli stimuloitu mitogeenin fytohemagglutiniinilla [PHA]) ja kahdesta näytekaivosta, ts. kokoveri, joka on stimuloitu jommallakummalla M. tuberculosis -spesifisistä antigeeneistä, Early Secretory Antigen Target 6:lla (ESAT-6) tai Culture Filtrate Protein 10:llä (CFP-10).

Viisi ml heparinisoitua kokoverta otettiin QFT-G:tä varten ennen PPD-testiä. Verinäytteitä inkuboitiin 16-20 tuntia (yön yli) 37 °C:ssa kosteassa ilmakehässä. IFN-y-tasoja nollakuopissa pidettiin taustana ja ne vähennettiin mitogeenikuopan ja antigeenistimuloitujen kuoppien tuloksista. Tuloksia pidettiin positiivisina, jos pitoisuus. IFN-y näytekaivossa ESAT-6:lla ja/tai CFP-10:llä stimuloinnin jälkeen oli suurempi tai yhtä suuri kuin 0,35 IU/ml (kun nollakuopan arvo on vähennetty), riippumatta positiivisen kontrollin (mitogeeni) tuloksista. hyvin). Tuloksia pidettiin negatiivisina, jos vaste spesifisille antigeeneille (nollakuopan arvon vähentämisen jälkeen) oli alle 0,35 IU/ml ja jos positiivisen kontrollin IFN-y-tasot (nollakuopan arvon vähentämisen jälkeen) olivat suurempia tai yhtä suuria kuin 0,5 IU/ml. Tuloksia pidettiin epämääräisinä, jos molemmat antigeenistimuloidut näytekaivot olivat negatiivisia (eli <0,35 IU/ml nolla-kuopan arvon vähentämisen jälkeen) ja jos positiivisen kontrollikuopan arvo oli alle 0,5 IU/ml jonkin arvo

nolla hyvin.