Sensibilité et spécificité du test QuantiFeron -TB Gold (QFT-G) chez les patients atteints de psoriasis

Les patients atteints de psoriasis et de rhumatisme psoriasique sont candidats pour recevoir des thérapies anti-TNF alpha qui nécessitent un dépistage préalable de la tuberculose latente (LTB). Actuellement, le dépistage de la LTB est basé sur un test cutané à la tuberculine (TST), des radiographies pulmonaires et un questionnaire sur les facteurs prédisposant à la TB. Les principaux inconvénients du TCT sont le manque de spécificité dû à la réactivité croisée avec le Bacille de Calmette-Guérin (BCG) et d'autres mycobactéries non tuberculeuses et le risque d'anergie chez les patients immunodéprimés. En outre, il a été suggéré que la peau des patients psoriasiques pourrait être plus sensible, entraînant une augmentation du TST qui ne reflète pas obligatoirement le statut de LTB.

Récemment, un nouveau test pour la LTBI a été développé, qui évalue la libération d'interféron (IFN) -γ par les lymphocytes T effecteurs mémoire stimulés in vitro avec des antigènes mycobactériens spécifiques, ESAT-6 (early secretory antigen target-6) et CFP-10 ( protéine de filtrat de culture-10) [9-10]. Le test QuantiFeron -TB Gold (QFT-G) utilise ELISA pour mesurer les concentrations d'IFN-γ dans les surnageants en format plaque et en format "In tube" (QFT-GIT) tandis que l'immunospot lié à une enzyme (ELISPOT) détecte les individus producteurs d'IFN-γ Cellules T (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, Royaume-Uni).

Les tests d'IFN-γ sur sang total ont été approuvés par les Centers for Disease Control comme stratégie de dépistage alternative au TST chez les individus immunocompétents [11], mais son utilité clinique en tant que test unique pour la détection de l'ITL chez les patients immunodéprimés est controversée. De plus, son utilité chez les patients atteints de psoriasis et de rhumatisme psoriasique n'a pas encore été établie Cent patients atteints de psoriasis et de rhumatisme psoriasique et 50 témoins sains participeront à cette étude.

Les sujets inscrits seront invités à remplir un questionnaire sociodémographique détaillé et de dépistage de la tuberculose comprenant le sexe, l'âge, le lieu de naissance et le travail, la vaccination antérieure par le BCG, les contacts étroits avec des patients tuberculeux ou la prophylaxie antituberculeuse dans le passé. Le bilan de dépistage comprendra l'évaluation de l'activité clinique de la maladie à l'aide du score d'activité de la maladie 28 (DAS-28) et de l'indice de gravité de la région du psoriasis (PASI), la documentation du traitement passé ou actuel avec des corticostéroïdes systémiques et des médicaments immunosuppresseurs, et l'imagerie (radiographie pulmonaire) .

Tous les sujets subiront un test TST et QFT-G. Une dose de 2 TU de PPD sera administrée par un technicien certifié selon la méthode de Mantoux et l'induration mesurée après 72 h. Le TST sera considéré comme positif s'il est supérieur ou égal à 5 mm pour les patients atteints de PR et à 10 mm pour les témoins L'absence d'induration de <2 mm de diamètre sera enregistrée comme anergique et les résultats négatifs du TST ont été définis comme ayant plus de 2 mais moins de 5 réactions mm chez les patients atteints de PR.

Test QFT-G Le test IFN de sang total QuantiFeron® (QIFN) de deuxième génération (Cellestis) sera effectué et interprété conformément aux instructions du fabricant.

Brièvement, le test consistait en un contrôle négatif (puits nul, c'est-à-dire sang total sans antigènes ni mitogènes), un contrôle positif (puits mitogène, c'est-à-dire sang total stimulé avec le mitogène phytohémagglutinine [PHA]) et deux puits d'échantillons, c'est-à-dire sang total stimulé avec l'un des antigènes spécifiques de M. tuberculosis, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) ou Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Cinq ml de sang total hépariné seront prélevés pour QFT-G avant le test PPD. Les échantillons de sang seront incubés pendant 16 à 20 h (une nuit) à 37°C dans une atmosphère humidifiée. Les niveaux d'IFN-γ dans le puits nul seront considérés comme de fond et seront soustraits des résultats du puits mitogène et des puits stimulés par l'antigène. Les résultats seront considérés comme positifs si la concentration d'.IFN-γ dans le puits échantillon après stimulation avec ESAT-6 et/ou CFP-10 sera supérieure ou égale à 0,35 UI/ml (après soustraction de la valeur du puits nul ), quels que soient les résultats du contrôle positif (puits mitogène). Les résultats seront considérés comme négatifs si la réponse aux antigènes spécifiques (après soustraction de la valeur du puits nul) est inférieure à 0,35 UI/ml et si les taux d'IFN-γ du contrôle positif (après soustraction de la valeur du puits nul ) est supérieur ou égal à 0,5 UI/ml. Les résultats seront considérés comme indéterminés si les deux puits d'échantillon stimulés par l'antigène sont négatifs (c'est-à-dire <0,35 UI/ml après soustraction de la valeur du puits Nil) et si la valeur du puits de contrôle positif est inférieure à 0,5 UI/ml après soustraction la valeur du puits nul

bien le nul.

Test QFT-G Le test IFN sur sang total QuantiFeron® (QIFN) de deuxième génération (Cellestis) a été réalisé et interprété conformément aux instructions du fabricant.

En bref, le test consistait en un contrôle négatif (puits nul, c'est-à-dire du sang total sans antigènes ni mitogènes), un contrôle positif (puits mitogène, c'est-à-dire du sang total stimulé avec le mitogène phytohémagglutinine [PHA]) et deux puits d'échantillons, c'est-à-dire sang total stimulé avec l'un des antigènes spécifiques de M. tuberculosis, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) ou Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Cinq ml de sang total hépariné ont été prélevés pour QFT-G avant le test PPD. Les échantillons de sang ont été incubés pendant 16 à 20 h (une nuit) à 37°C dans une atmosphère humidifiée. Les niveaux d'IFN-γ dans le puits nul ont été considérés comme de fond et ont été soustraits des résultats du puits mitogène et des puits stimulés par l'antigène. Les résultats ont été considérés comme positifs si la concentration de. L'IFN-γ dans le puits de l'échantillon après stimulation avec ESAT-6 et/ou CFP-10 était supérieur ou égal à 0,35 UI/ml (après soustraction de la valeur du puits nul), quels que soient les résultats du contrôle positif (mitogène Bien). Les résultats étaient considérés comme négatifs si la réponse aux antigènes spécifiques (après soustraction de la valeur du puits nul) était inférieure à 0,35 UI/ml et si les taux d'IFN-γ du contrôle positif (après soustraction de la valeur du puits nul) étaient supérieures ou égales à 0,5 UI/ml. Les résultats étaient considérés comme indéterminés si les deux puits d'échantillon stimulés par l'antigène étaient négatifs (c'est-à-dire <0,35 UI/ml après soustraction de la valeur du puits Nil) et si la valeur du puits de contrôle positif était inférieure à 0,5 UI/ml après soustraction de la valeur de

bien le nul.