Чувствительность и специфичность теста QuantiFeron-TB Gold (QFT-G) у пациентов с псориазом

Пациенты с псориазом и псориатическим артритом являются кандидатами на получение терапии анти-ФНО-альфа, которая требует предварительного скрининга на латентный туберкулез (ЛТБ). В настоящее время скрининг на ЛТБ основан на туберкулиновой кожной пробе (ТКП), рентгенографии органов грудной клетки и вопроснике о факторах, предрасполагающих к ТБ. Основными недостатками ТКП являются отсутствие специфичности из-за перекрестной реактивности с бациллой Кальметта-Герена (БЦЖ) и другими нетуберкулезными микобактериями, а также риск развития анергии у пациентов с иммуносупрессией. Кроме того, было высказано предположение, что кожа пациентов с псориазом может быть более чувствительной, что приводит к увеличению TST, что не обязательно отражает статус LTB.

Недавно был разработан новый анализ на ЛТБИ, который оценивает высвобождение интерферона (ИФН)-γ эффекторными Т-клетками памяти, стимулированными in vitro специфическими микобактериальными антигенами, ESAT-6 (ранний секреторный антиген-мишень-6) и CFP-10. культуральный фильтрат белок-10) [9-10]. В тесте QuantiFeron-TB Gold (QFT-G) используется ИФА для измерения концентрации IFN-γ в супернатантах в формате планшета и в формате «в пробирке» (QFT-GIT), в то время как метод иммуноферментного пятна (ELISPOT) выявляет отдельные продукты, продуцирующие IFN-γ. Т-клетки (TS-TB, Oxford Immunotech, Абингдон, Великобритания).

Анализы IFN-γ в цельной крови были одобрены Центрами по контролю за заболеваниями в качестве альтернативной стратегии скрининга ТКП у иммунокомпетентных лиц [11], но его клиническая полезность в качестве единственного теста для выявления ЛТБИ у пациентов с ослабленным иммунитетом является спорной. Кроме того, его полезность у пациентов с псориазом и псориатическим артритом еще не установлено. В этом исследовании примут участие сто пациентов с псориазом и псориатическим артритом и 50 здоровых людей.

Зарегистрированным субъектам будет предложено заполнить подробную социально-демографическую анкету и анкету для скрининга на туберкулез, включая пол, возраст, место рождения и работу, предыдущую вакцинацию БЦЖ, тесный контакт с больными туберкулезом или профилактику туберкулеза в прошлом. Скрининг будет включать оценку клинической активности заболевания с использованием шкалы активности заболевания 28 (DAS-28) и индекса тяжести псориаза (PASI), документирование прошлого или текущего лечения системными кортикостероидами и иммунодепрессантами, а также визуализацию (рентген грудной клетки). .

Все субъекты пройдут тест TST и QFT-G. Сертифицированный технический специалист введет дозу 2-TU PPD с использованием метода Манту, а уплотнение будет измерено через 72 часа. ТКП будет считаться положительной, если она больше или равна 5 мм для пациентов с РА и 10 мм для контрольной группы. Отсутствие уплотнения диаметром <2 мм будет регистрироваться как анергия, а отрицательные результаты ТКП будут определяться как имеющие более 2, но менее 5 мм реакции у больных РА.

Тест QFT-G Анализ QuantiFeron® (QIFN) второго поколения на содержание IFN в цельной крови (Cellestis) будет проводиться и интерпретироваться в соответствии с инструкциями производителя.

Вкратце, тест состоял из отрицательного контроля (нулевая лунка, т.е. цельная кровь без антигенов или митогена), положительного контроля (митогенная лунка, т.е. цельная кровь, стимулированная митогенным фитогемагглютинином [ФГА]) и двух лунок для образцов, т.е. цельная кровь, стимулированная любым из специфических антигенов M. tuberculosis, ранним секреторным антигеном-мишенью 6 (ESAT-6) или белком культурального фильтрата 10 (CFP-10).

Пять мл гепаринизированной цельной крови будут взяты для QFT-G перед тестированием PPD. Образцы крови инкубируют в течение 16-20 часов (ночь) при 37°C во влажной атмосфере. Уровни IFN-γ в нулевой лунке будут считаться фоновыми и будут вычтены из результатов лунок с митогеном и антиген-стимулированных лунок. Результаты будут считаться положительными, если концентрация IFN-γ в лунке образца после стимуляции ESAT-6 и/или CFP-10 будет больше или равна 0,35 МЕ/мл (после вычитания значения нулевой лунки). ), независимо от результатов положительного контроля (митогенная лунка). Результаты будут считаться отрицательными, если ответ на специфические антигены (после вычитания значения нулевой лунки) составляет менее 0,35 МЕ/мл и если уровни IFN-γ в положительном контроле (после вычитания значения нулевой лунки ) больше или равно 0,5 МЕ/мл. Результаты будут считаться неопределенными, если обе лунки со стимулированным антигеном образцом отрицательны (т. е. <0,35 МЕ/мл после вычитания значения нулевой лунки) и если значение лунки с положительным контролем меньше 0,5 МЕ/мл после вычитания стоимость нулевой скважины

нулевая скважина.

Тест QFT-G Анализ QuantiFeron® (QIFN) второго поколения на содержание IFN в цельной крови (Cellestis) выполняли и интерпретировали в соответствии с инструкциями производителя.

Вкратце, тест состоял из отрицательного контроля (нулевая лунка, т.е. цельная кровь без антигенов или митогена), положительного контроля (митогенная лунка, т.е. цельная кровь, стимулированная митогенным фитогемагглютинином [ФГА]) и двух лунок для образцов, т.е. цельная кровь, стимулированная любым из специфических антигенов M. tuberculosis, ранним секреторным антигеном-мишенью 6 (ESAT-6) или белком культурального фильтрата 10 (CFP-10).

Пять мл гепаринизированной цельной крови было взято для QFT-G перед тестированием PPD. Образцы крови инкубировали в течение 16-20 ч (ночь) при 37°С во влажной атмосфере. Уровни IFN-γ в нулевой лунке считали фоном и вычитали из результатов лунок с митогеном и антиген-стимулированных лунок. Результаты считали положительными, если концентрация. IFN-γ в лунке образца после стимуляции ESAT-6 и/или CFP-10 был больше или равен 0,35 МЕ/мл (после вычитания значения нулевой лунки), независимо от результатов положительного контроля (митоген хорошо). Результаты считались отрицательными, если ответ на специфические антигены (после вычитания значения нулевой лунки) был менее 0,35 МЕ/мл и если уровни IFN-γ в положительном контроле (после вычитания значения нулевой лунки) были больше или равны 0,5 МЕ/мл. Результаты считались неопределенными, если обе лунки со стимулированным антигеном образцом были отрицательными (т. е. <0,35 МЕ/мл после вычитания значения лунки с нулевым значением) и если значение лунки с положительным контролем было менее 0,5 МЕ/мл после вычитания значение

нулевая скважина.