Sensitivitet og spesifisitet av QuantiFeron -TB Gold Test (QFT-G) hos pasienter med psoriasis

Pasienter med psoriasis og psoriasisartritt er kandidater til å motta anti-TNF alfa-terapier som krever forhåndsscreening for latent tuberkulose (LTB). Foreløpig er screening for LTB basert på tuberkulin hudtest (TST), røntgen av thorax og et spørreskjema om predisponerende faktorer for TB. De viktigste ulempene med TST er mangelen på spesifisitet på grunn av kryssreaktivitet med Bacille Calmette-Guerin (BCG) og andre ikke-tuberkulose mykobakterier og risikoen for anergi hos immunsupprimerte pasienter. Videre har det blitt antydet at huden til psoriasispasienter kan være mer følsom, noe som resulterer i økt TST som ikke er obligatorisk reflekterer statusen til LTB.

Nylig er det utviklet en ny analyse for LTBI, som evaluerer frigjøring av interferon (IFN) -γ av minneeffektor T-celler stimulert in vitro med spesifikke mykobakterielle antigener, ESAT-6 (tidlig sekretorisk antigen target-6) og CFP-10 ( kulturfiltrat protein-10) [9-10]. QuantiFeron -TB Gold-testen (QFT-G) bruker ELISA for å måle IFN-γ-konsentrasjoner i supernatanter i plateformat og "In tube"-format (QFT-GIT) mens den enzymbundne immunospotten (ELISPOT) oppdager individuelle IFN-γ-produserende T-celler (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, Storbritannia).

IFN-γ-analysene i fullblod ble godkjent av The Centers for Disease Control som en alternativ screeningstrategi til TST hos immunkompetente individer [11], men dens kliniske nytte som en enkelt test for påvisning av LTBI hos immunkompromitterte pasienter er kontroversiell. hos pasienter med psoriasis og psoriasisartritt er ennå ikke etablert. Hundre pasienter med psoriasis og psoriasisartritt og 50 friske kontroller vil delta i denne studien.

Påmeldte forsøkspersoner vil bli bedt om å fylle ut et detaljert sosiodemografisk og TB-screeningsspørreskjema, inkludert kjønn, alder, fødested og arbeidssted, tidligere BCG-vaksinasjon, nær kontakt med TB-pasienter eller TB-profylakse i fortiden. Screeningsarbeid vil inkludere vurdering av klinisk sykdomsaktivitet ved bruk av Disease Activity Score 28 (DAS-28) og Psoriasis Area Severity Index (PASI), dokumentasjon av tidligere eller nåværende behandling med systemiske kortikosteroider og immunsuppressive legemidler, og bildediagnostikk (røntgen thorax) .

Alle forsøkspersonene vil gjennomgå en TST- og QFT-G-test. En 2-TU dose PPD vil bli administrert av en sertifisert tekniker ved bruk av Mantoux-metoden og indurasjon målt etter 72 timer. TST vil bli ansett som positivt hvis bo over eller likt til 5 mm for RA-pasienter og 10 mm for kontroller. Fraværet av indurasjon på <2 mm i diameter vil bli registrert som anergiske og negative TST-resultater ble definert som å ha mer enn 2 men mindre enn 5 mm reaksjoner for RA-pasienter.

QFT-G-test Andregenerasjons QuantiFeron® (QIFN) fullblods IFN-analyse (Cellestis) vil bli utført og tolket i henhold til produsentens instruksjoner.

Kort fortalt besto testen av en negativ kontroll (nullbrønn, dvs. fullblod uten antigener eller mitogen), en positiv kontroll (mitogenbrønn, dvs. fullblod stimulert med mitogenet fytohemagglutinin [PHA]) og to prøvebrønner, dvs. fullblod stimulert med et av de M. tuberculosis-spesifikke antigenene, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) eller Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Fem ml heparinisert fullblod vil bli tappet for QFT-G før for PPD-testing. Blodprøvene vil bli inkubert i 16-20 timer (over natten) ved 37 °C i en fuktet atmosfære. IFN-y-nivåer i nullbrønnen vil bli betraktet som bakgrunn og vil bli trukket fra resultatene av mitogenbrønnen og de antigenstimulerte brønnene. Resultatene vil bli vurdert som positive hvis konsentrasjonen av.IFN-γ i prøvebrønnen etter stimulering med ESAT-6 og/eller CFP-10 vil være større enn eller lik 0,35 IE/ml (etter å ha trukket fra verdien av nullbrønnen ), uavhengig av resultatene av den positive kontrollen (mitogenbrønn). Resultatene vil bli ansett som negative hvis responsen på de spesifikke antigenene (etter å ha trukket fra verdien av nullbrønnen) er mindre enn 0,35 IE/ml og hvis IFN-y-nivåene til den positive kontrollen (etter å ha trukket fra verdien av nullbrønnen) ) er større enn eller lik 0,5 IE/ml. Resultatene vil bli betraktet som ubestemte hvis begge antigen-stimulerte prøvebrønnene er negative (dvs. <0,35 IE/ml etter å ha trukket verdien av Nul-brønnen) og hvis verdien av den positive kontrollbrønnen er mindre enn 0,5 IE/ml etter subtrahering verdien av nullbrønnen

nullbrønnen.

QFT-G-test Andregenerasjons QuantiFeron® (QIFN) fullblods IFN-analyse (Cellestis) ble utført og tolket i henhold til produsentens instruksjoner.

Kort fortalt besto testen av en negativ kontroll (nullbrønn, dvs. fullblod uten antigener eller mitogen), en positiv kontroll (mitogenbrønn, dvs. fullblod stimulert med mitogenet fytohemagglutinin [PHA]) og to prøvebrønner, dvs. fullblod stimulert med et av de M. tuberculosis-spesifikke antigenene, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) eller Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Fem ml heparinisert fullblod ble tappet for QFT-G før for PPD-testing. Blodprøvene ble inkubert i 16-20 timer (over natten) ved 37°C i en fuktet atmosfære. IFN-y-nivåer i nullbrønnen ble ansett som bakgrunn og ble trukket fra resultatene av mitogenbrønnen og de antigenstimulerte brønnene. Resultatene ble vurdert som positive dersom konsentrasjonen av. IFN-γ i prøvebrønnen etter stimulering med ESAT-6 og/eller CFP-10 var større enn eller lik 0,35 IE/ml (etter å ha trukket fra verdien av nullbrønnen), uavhengig av resultatene av den positive kontrollen (mitogen). vi vil). Resultatene ble ansett som negative hvis responsen på de spesifikke antigenene (etter å ha trukket fra verdien av nullbrønnen) var mindre enn 0,35 IE/ml og hvis IFN-y-nivåene til den positive kontrollen (etter å ha trukket fra verdien av nullbrønnen) var større enn eller lik 0,5 IE/ml. Resultatene ble ansett som ubestemte hvis begge antigen-stimulerte prøvebrønnene var negative (dvs. <0,35 IE/ml etter å ha trukket fra verdien av null-brønnen) og hvis verdien av den positive kontrollbrønnen var mindre enn 0,5 IE/ml etter å ha trukket fra verdien av

nullbrønnen.