Citlivost a specificita testu QuantiFeron -TB Gold (QFT-G) u pacientů s psoriázou

Pacienti s psoriázou a psoriatickou artritidou jsou kandidáty na anti-TNF alfa terapie, které vyžadují předchozí screening na latentní tuberkulózu (LTB). V současné době je screening na LTB založen na tuberkulinovém kožním testu (TST), rentgenovém snímku hrudníku a dotazníku o predisponujících faktorech pro TBC. Hlavními nevýhodami TST jsou nedostatečná specifita v důsledku zkřížené reaktivity s Bacille Calmette-Guerin (BCG) a dalšími netuberkulózními mykobakteriemi a riziko anergie u imunosuprimovaných pacientů. Dále bylo navrženo, že kůže psoriatických pacientů může být citlivější, což má za následek zvýšení TST, což nemusí nutně odrážet stav LTB.

Nedávno byl vyvinut nový test pro LTBI, který hodnotí uvolňování interferonu (IFN) -γ paměťovými efektorovými T-buňkami stimulovanými in vitro specifickými mykobakteriálními antigeny, ESAT-6 (early secretory antigen target-6) a CFP-10 ( kultivační filtrát protein-10) [9-10]. Test QuantiFeron -TB Gold (QFT-G) používá ELISA k měření koncentrací IFN-γ v supernatantech ve formátu destiček a ve formátu „ve zkumavce“ (QFT-GIT), zatímco enzymový imunospot (ELISPOT) detekuje individuální produkci IFN-γ T-buňky (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, UK).

Testy IFN-γ v plné krvi byly schváleny The Centers for Disease Control jako alternativní screeningová strategie k TST u imunokompetentních jedinců [11], ale jeho klinická užitečnost jako jediného testu pro detekci LTBI u imunokompromitovaných pacientů je kontroverzní. u pacientů s psoriázou a psoriatickou artritidou nebylo dosud stanoveno Této studie se zúčastní sto pacientů s psoriázou a psoriatickou artritidou a 50 zdravých kontrol.

Zapsané subjekty budou požádány o vyplnění podrobného sociodemografického a screeningového dotazníku TBC včetně pohlaví, věku, místa narození a zaměstnání, předchozí vakcinace BCG, úzkého kontaktu s pacienty s TBC nebo profylaxe TBC v minulosti. Screeningové zpracování bude zahrnovat hodnocení klinické aktivity onemocnění pomocí skóre aktivity onemocnění 28 (DAS-28) a indexu závažnosti oblasti psoriázy (PASI), dokumentaci minulé nebo současné léčby systémovými kortikosteroidy a imunosupresivy a zobrazování (rentgen hrudníku) .

Všechny subjekty podstoupí test TST a QFT-G. Dávka 2-TU PPD bude aplikována certifikovaným technikem metodou Mantoux a indurace měřená po 72 hodinách. TST bude považován za pozitivní, pokud je větší nebo rovný 5 mm u pacientů s RA a 10 mm u kontrol. Nepřítomnost indurace o průměru < 2 mm bude zaznamenána jako anergická a negativní výsledky TST byly definovány jako s více než 2, ale méně než 5 mm reakce u pacientů s RA.

Test QFT-G Test druhé generace QuantiFeron® (QIFN) IFN z plné krve (Cellestis) bude proveden a interpretován podle pokynů výrobce.

Stručně řečeno, test sestával z negativní kontroly (nulová jamka, tj. plná krev bez antigenů nebo mitogenu), pozitivní kontroly (mitogenní jamka, tj. plná krev stimulovaná mitogenem fytohemaglutininem [PHA]) a dvou jamek se vzorky, tj. plná krev stimulovaná některým ze specifických antigenů M. tuberculosis, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) nebo Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Před testováním PPD bude odebráno 5 ml heparinizované plné krve pro QFT-G. Vzorky krve budou inkubovány po dobu 16-20 hodin (přes noc) při 37°C ve vlhké atmosféře. Hladiny IFN-y v nulové jamce budou považovány za pozadí a budou odečteny od výsledků mitogenní jamky a jamek stimulovaných antigenem. Výsledky budou považovány za pozitivní, pokud koncentrace IFN-γ ve vzorkové jamce po stimulaci ESAT-6 a/nebo CFP-10 bude větší nebo rovna 0,35 IU/ml (po odečtení hodnoty nulové jamky ), bez ohledu na výsledky pozitivní kontroly (mitogenní jamka). Výsledky budou považovány za negativní, pokud je odpověď na specifické antigeny (po odečtení hodnoty nulové jamky) nižší než 0,35 IU/ml a pokud hladiny IFN-γ pozitivní kontroly (po odečtení hodnoty nulové jamky ) je větší nebo roven 0,5 IU/ml. Výsledky budou považovány za neurčité, pokud jsou obě jamky se vzorkem stimulovaným antigenem negativní (tj. < 0,35 IU/ml po odečtení hodnoty nulové hodnoty) a pokud je hodnota pozitivní kontrolní jamky po odečtení nižší než 0,5 IU/ml. hodnotu nulové studny

nulová studna.

QFT-G test Byl proveden test druhé generace QuantiFeron® (QIFN) IFN z plné krve (Cellestis) a interpretován podle pokynů výrobce.

Stručně řečeno, test sestával z negativní kontroly (nulová jamka, tj. plná krev bez antigenů nebo mitogenu), pozitivní kontroly (mitogenní jamka, tj. plná krev stimulovaná mitogenem fytohemaglutininem [PHA]) a dvou jamek se vzorky, tj. plná krev stimulovaná některým ze specifických antigenů M. tuberculosis, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) nebo Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Před testováním PPD bylo odebráno 5 ml heparinizované plné krve pro QFT-G. Vzorky krve byly inkubovány po dobu 16-20 hodin (přes noc) při 37 °C ve zvlhčené atmosféře. Hladiny IFN-y v nulové jamce byly považovány za pozadí a byly odečteny od výsledků mitogenní jamky a jamek stimulovaných antigenem. Výsledky byly považovány za pozitivní, pokud koncentrace. IFN-γ ve vzorkové jamce po stimulaci ESAT-6 a/nebo CFP-10 byl větší nebo roven 0,35 IU/ml (po odečtení hodnoty nulové jamky), bez ohledu na výsledky pozitivní kontroly (mitogen studna). Výsledky byly považovány za negativní, pokud byla odpověď na specifické antigeny (po odečtení hodnoty nulové jamky) nižší než 0,35 IU/ml a pokud hladiny IFN-γ pozitivní kontroly (po odečtení hodnoty nulové jamky) byly vyšší nebo rovné 0,5 IU/ml. Výsledky byly považovány za neurčité, pokud byly obě jamky se vzorkem stimulovaným antigenem negativní (tj. <0,35 IU/ml po odečtení hodnoty nulové hodnoty) a pokud hodnota pozitivní kontrolní jamky byla po odečtení hodnoty nižší než 0,5 IU/ml. hodnota

nulová studna.