Sensitivitet og specificitet af QuantiFeron -TB Gold Test (QFT-G) hos patienter med psoriasis

Patienter med psoriasis og psoriasisgigt er kandidater til at modtage anti-TNF alfa-terapier, som kræver forudgående screening for latent tuberkulose (LTB). I øjeblikket er screening for LTB baseret på tuberkulin hudtest (TST), røntgen af ​​thorax og et spørgeskema om disponerende faktorer for TB. De vigtigste ulemper ved TST er manglen på specificitet på grund af krydsreaktivitet med Bacille Calmette-Guerin (BCG) og andre ikke-tuberkulose mykobakterier og risikoen for anergi hos immunsupprimerede patienter. Ydermere er det blevet foreslået, at huden på psoriasispatienter kan være mere følsom, hvilket resulterer i øget TST, som ikke er obligatorisk afspejler status for LTB.

For nylig er der udviklet et nyt assay for LTBI, som evaluerer frigivelse af interferon (IFN) -γ af hukommelseseffektor T-celler stimuleret in vitro med specifikke mykobakterielle antigener, ESAT-6 (tidlig sekretorisk antigen target-6) og CFP-10 ( kulturfiltrat protein-10) [9-10]. QuantiFeron -TB Gold-testen (QFT-G) bruger ELISA til at måle IFN-γ-koncentrationer i supernatanter i pladeformat og "In tube"-format (QFT-GIT), mens det enzymforbundne immunospot (ELISPOT) detekterer individuelle IFN-γ-producerende T-celler (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, UK).

Fuldblods IFN-γ assays blev godkendt af The Centers for Disease Control som en alternativ screeningsstrategi til TST i immunkompetente individer [11], men dens kliniske anvendelighed som en enkelt test til påvisning af LTBI hos immunkompromitterede patienter er kontroversiel. hos patienter med psoriasis og psoriasisgigt er endnu ikke etableret. Hundrede patienter med psoriasis og psoriasisgigt og 50 raske kontrolpersoner vil deltage i denne undersøgelse.

Tilmeldte forsøgspersoner vil blive bedt om at udfylde et detaljeret sociodemografisk og TB-screeningsspørgeskema, herunder køn, alder, fødested og arbejdssted, forudgående BCG-vaccination, tæt kontakt med TB-patienter eller TB-profylakse i fortiden. Screeningsarbejde vil omfatte vurdering af klinisk sygdomsaktivitet ved hjælp af Disease Activity Score 28 (DAS-28) og Psoriasis Area Severity Index (PASI), dokumentation af tidligere eller nuværende behandling med systemiske kortikosteroider og immunsuppressive lægemidler og billeddannelse (røntgenbillede af thorax) .

Alle forsøgspersonerne vil gennemgå en TST- og QFT-G-test. En 2-TU dosis af PPD vil blive administreret af en certificeret tekniker ved hjælp af Mantoux-metoden og induration målt efter 72 timer. TST vil blive anset for positivt, hvis det er højere eller lige så højt som 5 mm for RA-patienter og 10 mm for kontroller. Fraværet af induration på <2 mm i diameter vil blive registreret som anergiske og negative TST-resultater blev defineret som havende mere end 2, men mindre end 5 mm reaktioner for RA-patienter.

QFT-G-test Andengenerations QuantiFeron® (QIFN) fuldblods IFN-assay (Cellestis) vil blive udført og fortolket i henhold til producentens instruktioner.

Kort fortalt bestod testen af ​​en negativ kontrol (ingen brønd, dvs. fuldblod uden antigener eller mitogen), en positiv kontrol (mitogenbrønd, dvs. fuldblod stimuleret med mitogenet phytohæmagglutinin [PHA]) og to prøvebrønde, dvs. fuldblod stimuleret med et af de M. tuberculosis-specifikke antigener, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) eller Culture Filtrat Protein 10 (CFP-10).

Fem ml hepariniseret fuldblod vil blive udtaget til QFT-G før PPD-testning. Blodprøverne inkuberes i 16-20 timer (over natten) ved 37°C i en fugtig atmosfære. IFN-y-niveauer i nul-brønden vil blive betragtet som baggrund og vil blive trukket fra resultaterne af mitogen-brønden og de antigen-stimulerede brønde. Resultaterne vil blive betragtet som positive, hvis koncentrationen af.IFN-γ i prøvebrønden efter stimulering med ESAT-6 og/eller CFP-10 vil være større end eller lig med 0,35 IE/ml (efter at have trukket værdien af ​​nulbrønden fra ), uanset resultaterne af den positive kontrol (mitogenbrønd). Resultaterne vil blive betragtet som negative, hvis responsen på de specifikke antigener (efter at have trukket værdien af ​​nul-brønden) er mindre end 0,35 IE/ml, og hvis IFN-y-niveauerne for den positive kontrol (efter at have trukket værdien af ​​nul-brønden fra) ) er større end eller lig med 0,5 IE/ml. Resultaterne vil blive betragtet som ubestemmelige, hvis begge antigen-stimulerede prøvebrønde er negative (dvs. <0,35 IE/ml efter fratrækning af værdien af ​​nul-brønden), og hvis værdien af ​​den positive kontrolbrønd er mindre end 0,5 IE/ml efter subtraktion værdien af ​​nulbrønden

den nul brønd.

QFT-G-test Andengenerations QuantiFeron® (QIFN) fuldblods-IFN-assay (Cellestis) blev udført og fortolket i henhold til producentens instruktioner.

Kort fortalt bestod testen af ​​en negativ kontrol (ingen brønd, dvs. fuldblod uden antigener eller mitogen), en positiv kontrol (mitogenbrønd, dvs. fuldblod stimuleret med mitogenet phytohæmagglutinin [PHA]) og to prøvebrønde, dvs. fuldblod stimuleret med et af de M. tuberculosis-specifikke antigener, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) eller Culture Filtrat Protein 10 (CFP-10).

Fem ml hepariniseret fuldblod blev udtaget til QFT-G før til PPD-testning. Blodprøverne blev inkuberet i 16-20 timer (over natten) ved 37°C i en fugtig atmosfære. IFN-y-niveauer i nul-brønden blev betragtet som baggrund og blev trukket fra resultaterne af mitogen-brønden og de antigen-stimulerede brønde. Resultaterne blev betragtet som positive, hvis koncentrationen af. IFN-γ i prøvebrønden efter stimulering med ESAT-6 og/eller CFP-10 var større end eller lig med 0,35 IE/ml (efter at have trukket værdien af ​​nulbrønden), uanset resultaterne af den positive kontrol (mitogen) godt). Resultaterne blev betragtet som negative, hvis responsen på de specifikke antigener (efter at have trukket værdien af ​​nul-brønden) var mindre end 0,35 IE/ml, og hvis IFN-y-niveauerne for den positive kontrol (efter at have fratrukket værdien af ​​nul-brønden) var større end eller lig med 0,5 IE/ml. Resultaterne blev betragtet som ubestemmelige, hvis begge antigen-stimulerede prøvebrønde var negative (dvs. <0,35 IE/ml efter subtraktion af værdien af ​​nul-brønden), og hvis værdien af ​​den positive kontrolbrønd var mindre end 0,5 IE/ml efter subtraktion af Værdi af

den nul brønd.