Känslighet och specificitet för QuantiFeron -TB Gold Test (QFT-G) hos patienter med psoriasis

Patienter med psoriasis och psoriasisartrit är kandidater för att få anti-TNF alfa-terapier som kräver föregående screening för latent tuberkulos (LTB). För närvarande är screening för LTB baserad på tuberkulin hudtest (TST), lungröntgenstrålar och ett frågeformulär om predisponerande faktorer för TB. De främsta nackdelarna med TST är bristen på specificitet på grund av korsreaktivitet med Bacille Calmette-Guerin (BCG) och andra icke-tuberkulosmykobakterier och risken för anergi hos immunsupprimerade patienter. Vidare har det föreslagits att huden hos psoriasispatienter kan vara känsligare, vilket resulterar i ökad TST som inte är obligatoriskt återspeglar statusen för LTB.

Nyligen har en ny analys för LTBI utvecklats, som utvärderar frisättning av interferon (IFN) -y av minneseffektor-T-celler stimulerade in vitro med specifika mykobakteriella antigener, ESAT-6 (tidigt sekretoriskt antigen mål-6) och CFP-10 ( kulturfiltratprotein-10) [9-10]. QuantiFeron -TB Gold-testet (QFT-G) använder ELISA för att mäta IFN-γ-koncentrationer i supernatanter i plattformat och "I tube"-format (QFT-GIT) medan den enzymkopplade immunfläcken (ELISPOT) detekterar individuella IFN-γ-producerande T-celler (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, Storbritannien).

IFN-γ-analyserna i helblod godkändes av The Centers for Disease Control som en alternativ screeningstrategi till TST hos immunkompetenta individer [11], men dess kliniska användbarhet som ett enda test för att detektera LTBI hos patienter med nedsatt immunförsvar är kontroversiell. hos patienter med psoriasis och psoriasisartrit har ännu inte fastställts. Hundra patienter med psoriasis och psoriasisartrit och 50 friska kontrollpersoner kommer att delta i denna studie.

Inskrivna försökspersoner kommer att uppmanas att fylla i ett detaljerat frågeformulär för sociodemografiskt och TB-screening inklusive kön, ålder, födelseort och arbetsplats, tidigare BCG-vaccination, nära kontakt med TB-patienter eller TB-profylax tidigare. Screeningsarbete kommer att inkludera bedömning av klinisk sjukdomsaktivitet med hjälp av Disease Activity Score 28 (DAS-28) och Psoriasis Area Severity Index (PASI), dokumentation av tidigare eller pågående behandling med systemiska kortikosteroider och immunsuppressiva läkemedel, och avbildning (röntgen av bröstet) .

Alla försökspersoner kommer att genomgå ett TST- och QFT-G-test. En 2-TU-dos av PPD kommer att administreras av en certifierad tekniker som använder Mantoux-metoden och indurationen mäts efter 72 timmar. TST kommer att bedömas som positivt om över eller lika med 5 mm för RA-patienter och 10 mm för kontroller. Frånvaron av induration på <2 mm i diameter kommer att registreras som anergiska och negativa TST-resultat definierades som mer än 2 men mindre än 5 mm reaktioner för RA-patienter.

QFT-G-test Den andra generationens QuantiFeron® (QIFN) helblods IFN-analys (Cellestis) kommer att utföras och tolkas enligt tillverkarens instruktioner.

Kortfattat bestod testet av en negativ kontroll (noll brunn, d.v.s. helblod utan antigener eller mitogen), en positiv kontroll (mitogen brunn, dvs. helblod stimulerat med mitogenet fytohemagglutinin [PHA]) och två provbrunnar, dvs. helblod stimulerat med någon av de M. tuberculosis-specifika antigenerna, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) eller Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Fem ml hepariniserat helblod kommer att tas för QFT-G före PPD-testning. Blodproverna kommer att inkuberas i 16-20 timmar (över natten) vid 37°C i en fuktad atmosfär. IFN-y-nivåer i nollbrunnen kommer att betraktas som bakgrund och kommer att subtraheras från resultaten av mitogenbrunnen och de antigenstimulerade brunnarna. Resultaten kommer att betraktas som positiva om koncentrationen av.IFN-γ i provbrunnen efter stimulering med ESAT-6 och/eller CFP-10 kommer att vara större än eller lika med 0,35 IE/ml (efter att ha subtraherat värdet på nollbrunnen ), oavsett resultaten av den positiva kontrollen (mitogen brunn). Resultaten kommer att betraktas som negativa om svaret på de specifika antigenerna (efter att ha subtraherat värdet på nollbrunnen) är mindre än 0,35 IE/ml och om IFN-y-nivåerna för den positiva kontrollen (efter att ha subtraherat värdet på nollbrunnen) ) är större än eller lika med 0,5 IE/ml. Resultaten kommer att betraktas som obestämda om båda antigenstimulerade provbrunnarna är negativa (dvs <0,35 IE/ml efter att ha subtraherat värdet på Noll-brunnen) och om värdet av den positiva kontrollbrunnen är mindre än 0,5 IE/ml efter subtrahering värdet av nollbrunnen

den nolla brunnen.

QFT-G-test Den andra generationens QuantiFeron® (QIFN) helblods IFN-analys (Cellestis) utfördes och tolkades enligt tillverkarens instruktioner.

Kortfattat bestod testet av en negativ kontroll (noll brunn, d.v.s. helblod utan antigener eller mitogen), en positiv kontroll (mitogenbrunn, dvs. helblod stimulerat med mitogenet fytohemagglutinin [PHA]) och två provbrunnar, dvs. helblod stimulerat med någon av de M. tuberculosis-specifika antigenerna, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) eller Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Fem ml hepariniserat helblod togs för QFT-G innan för PPD-testning. Blodproverna inkuberades i 16-20 timmar (över natten) vid 37°C i en fuktad atmosfär. IFN-y-nivåer i nollbrunnen ansågs som bakgrund och subtraherades från resultaten av mitogenbrunnen och de antigenstimulerade brunnarna. Resultaten ansågs positiva om koncentrationen av. IFN-γ i provbrunnen efter stimulering med ESAT-6 och/eller CFP-10 var större än eller lika med 0,35 IE/ml (efter att ha subtraherat värdet på nollbrunnen), oavsett resultaten av den positiva kontrollen (mitogen) väl). Resultaten ansågs negativa om svaret på de specifika antigenerna (efter att ha subtraherat värdet på nollbrunnen) var mindre än 0,35 IU/ml och om IFN-y-nivåerna för den positiva kontrollen (efter att ha subtraherat värdet på nollbrunnen) var större än eller lika med 0,5 IE/ml. Resultaten ansågs vara obestämda om båda antigenstimulerade provbrunnarna var negativa (dvs <0,35 IE/ml efter att ha subtraherat värdet på Noll-brunnen) och om värdet av den positiva kontrollbrunnen var mindre än 0,5 IE/ml efter subtrahering av värdet av

den nolla brunnen.