Sensitivität und Spezifität des QuantiFeron-TB-Gold-Tests (QFT-G) bei Patienten mit Psoriasis

Patienten mit Psoriasis und Psoriasis-Arthritis sind Kandidaten für eine Anti-TNF-alpha-Therapie, die ein vorheriges Screening auf latente Tuberkulose (LTB) erfordert. Derzeit basiert das Screening auf LTB auf einem Tuberkulin-Hauttest (TST), Röntgenaufnahmen des Brustkorbs und einem Fragebogen zu prädisponierenden Faktoren für TB. Die Hauptnachteile des TST sind die fehlende Spezifität aufgrund der Kreuzreaktivität mit Bacille Calmette-Guerin (BCG) und anderen Mykobakterien, die keine Tuberkulose sind, und das Risiko einer Anergie bei immunsupprimierten Patienten. Darüber hinaus wurde vermutet, dass die Haut von Psoriasis-Patienten möglicherweise empfindlicher ist, was zu einem erhöhten TST führt, was nicht unbedingt den Status von LTB widerspiegelt.

Kürzlich wurde ein neuer Assay für LTBI entwickelt, der die Freisetzung von Interferon (IFN) -γ durch Gedächtniseffektor-T-Zellen bewertet, die in vitro mit spezifischen mykobakteriellen Antigenen, ESAT-6 (frühes sekretorisches Antigen Target-6) und CFP-10 ( Kulturfiltrat Protein-10) [9-10]. Der QuantiFeron -TB Gold-Test (QFT-G) verwendet ELISA zur Messung der IFN-γ-Konzentrationen in Überständen im Plattenformat und im "In tube"-Format (QFT-GIT), während der enzymgebundene Immunspot (ELISPOT) einzelne IFN-γ-Produzenten nachweist T-Zellen (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, UK).

Der Vollblut-IFN-γ-Assay wurde von den Centers for Disease Control als alternative Screening-Strategie zum TST bei immunkompetenten Personen zugelassen [11], aber sein klinischer Nutzen als Einzeltest zum Nachweis von LTBI bei immungeschwächten Patienten ist umstritten. Darüber hinaus ist sein Nutzen umstritten bei Patienten mit Psoriasis und Psoriasis-Arthritis wurde noch nicht ermittelt. Einhundert Patienten mit Psoriasis und Psoriasis-Arthritis und 50 gesunde Kontrollpersonen werden an dieser Studie teilnehmen.

Eingeschriebene Probanden werden gebeten, einen detaillierten soziodemografischen und TB-Screening-Fragebogen auszufüllen, der Geschlecht, Alter, Geburtsort und Arbeitsplatz, frühere BCG-Impfung, engen Kontakt mit TB-Patienten oder TB-Prophylaxe in der Vergangenheit enthält. Das Screening umfasst die Beurteilung der klinischen Krankheitsaktivität anhand des Disease Activity Score 28 (DAS-28) und des Psoriasis Area Severity Index (PASI), die Dokumentation der vergangenen oder aktuellen Behandlung mit systemischen Kortikosteroiden und immunsuppressiven Medikamenten sowie die Bildgebung (Röntgenaufnahme des Brustkorbs). .

Alle Probanden werden einem TST- und QFT-G-Test unterzogen. Eine 2-TU-Dosis PPD wird von einem zertifizierten Techniker nach der Mantoux-Methode verabreicht und die Verhärtung nach 72 Stunden gemessen. TST gilt als positiv, wenn es bei RA-Patienten größer oder gleich 5 mm und bei Kontrollen 10 mm beträgt. Das Fehlen einer Verhärtung von < 2 mm im Durchmesser wird als anergisch aufgezeichnet, und negative TST-Ergebnisse wurden als mehr als 2, aber weniger als 5 definiert mm-Reaktionen für RA-Patienten.

QFT-G-Test Der QuantiFeron® (QIFN)-Vollblut-IFN-Assay der zweiten Generation (Cellestis) wird gemäß den Anweisungen des Herstellers durchgeführt und ausgewertet.

Kurz gesagt, der Test bestand aus einer Negativkontrolle (Null-Well, d. h. Vollblut ohne Antigene oder Mitogen), einer Positivkontrolle (Mitogen-Well, d. h. Vollblut, stimuliert mit dem Mitogen Phytohämagglutinin [PHA]) und zwei Proben-Wells, d. h. Vollblut, stimuliert mit einem der M. tuberculosis-spezifischen Antigene, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) oder Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Vor dem PPD-Test werden für QFT-G 5 ml heparinisiertes Vollblut entnommen. Die Blutproben werden für 16-20 h (über Nacht) bei 37°C in befeuchteter Atmosphäre inkubiert. IFN-γ-Spiegel in der Null-Vertiefung werden als Hintergrund betrachtet und von den Ergebnissen der Mitogen-Vertiefung und der Antigen-stimulierten Vertiefungen abgezogen. Die Ergebnisse gelten als positiv, wenn die Konzentration von IFN-γ in der Probenvertiefung nach Stimulation mit ESAT-6 und/oder CFP-10 größer oder gleich 0,35 IE/ml ist (nach Abzug des Werts der Nullvertiefung). ), unabhängig von den Ergebnissen der Positivkontrolle (Mitogen-Well). Die Ergebnisse werden als negativ gewertet, wenn die Reaktion auf die spezifischen Antigene (nach Abzug des Wertes der Null-Vertiefung) weniger als 0,35 IE/ml beträgt und wenn die IFN-γ-Spiegel der Positivkontrolle (nach Abzug des Wertes der Null-Vertiefung ) größer oder gleich 0,5 IE/ml ist. Die Ergebnisse gelten als unbestimmt, wenn beide Antigen-stimulierten Probenvertiefungen negativ sind (d. h. <0,35 IE/ml nach Abzug des Wertes der Null-Vertiefung) und wenn der Wert der positiven Kontrollvertiefung nach Abzug weniger als 0,5 IE/ml beträgt der Wert der Null gut

die null gut.

QFT-G-Test Der QuantiFeron® (QIFN)-Vollblut-IFN-Assay der zweiten Generation (Cellestis) wurde gemäß den Anweisungen des Herstellers durchgeführt und ausgewertet.

Kurz gesagt, der Test bestand aus einer Negativkontrolle (Null-Well, d. h. Vollblut ohne Antigene oder Mitogen), einer Positivkontrolle (Mitogen-Well, d. h. Vollblut, stimuliert mit dem Mitogen Phytohämagglutinin [PHA]) und zwei Proben-Wells, d. h. Vollblut, stimuliert mit einem der M. tuberculosis-spezifischen Antigene, Early Secretory Antigen Target 6 (ESAT-6) oder Culture Filtrate Protein 10 (CFP-10).

Vor dem PPD-Test wurden 5 ml heparinisiertes Vollblut für QFT-G entnommen. Die Blutproben wurden für 16–20 h (über Nacht) bei 37°C in einer befeuchteten Atmosphäre inkubiert. IFN-γ-Spiegel in der Null-Vertiefung wurden als Hintergrund betrachtet und von den Ergebnissen der Mitogen-Vertiefung und der Antigen-stimulierten Vertiefungen abgezogen. Die Ergebnisse wurden als positiv gewertet, wenn die Konzentration von. IFN-γ in der Probenvertiefung nach Stimulation mit ESAT-6 und/oder CFP-10 war größer oder gleich 0,35 IE/ml (nach Abzug des Werts der Nullvertiefung), unabhängig von den Ergebnissen der Positivkontrolle (Mitogen Also). Die Ergebnisse wurden als negativ gewertet, wenn die Reaktion auf die spezifischen Antigene (nach Abzug des Wertes der Null-Vertiefung) weniger als 0,35 IE/ml betrug und wenn die IFN-γ-Spiegel der Positivkontrolle (nach Abzug des Wertes der Null-Vertiefung) größer oder gleich 0,5 IE/ml waren. Die Ergebnisse wurden als unbestimmt angesehen, wenn beide Antigen-stimulierten Probenvertiefungen negativ waren (d. h. <0,35 IE/ml nach Abzug des Wertes der Null-Vertiefung) und wenn der Wert der positiven Kontrollvertiefung weniger als 0,5 IE/ml nach Abzug des Wertes betrug Wert von

die null gut.