Sensibilidad y especificidad de QuantiFeron -TB Gold Test (QFT-G) en pacientes con psoriasis

Los pacientes con psoriasis y artritis psoriásica son candidatos a recibir terapias anti-TNF alfa que requieren un cribado previo de tuberculosis latente (LTB). Actualmente, la detección de LTB se basa en la prueba cutánea de la tuberculina (TST), radiografías de tórax y un cuestionario sobre factores predisponentes para la TB. Los principales inconvenientes de la TST son la falta de especificidad debido a la reactividad cruzada con el bacilo Calmette-Guerin (BCG) y otras micobacterias no tuberculosas y el riesgo de anergia en pacientes inmunodeprimidos. Además, se ha sugerido que la piel de los pacientes psoriásicos puede ser más sensible, lo que da como resultado un aumento de la TST que no refleja necesariamente el estado de LTB.

Recientemente, se ha desarrollado un nuevo ensayo para LTBI, que evalúa la liberación de interferón (IFN)-γ por células T efectoras de memoria estimuladas in vitro con antígenos micobacterianos específicos, ESAT-6 (antígeno secretor temprano-6) y CFP-10 ( cultivo filtrado proteína-10) [9-10]. La prueba QuantiFeron -TB Gold (QFT-G) utiliza ELISA para medir las concentraciones de IFN-γ en sobrenadantes en formato de placa y en formato "en tubo" (QFT-GIT), mientras que el inmunospot ligado a enzimas (ELISPOT) detecta individuos productores de IFN-γ. Células T (TS-TB, Oxford Immunotech, Abingdon, Reino Unido).

Los ensayos de IFN-γ en sangre completa fueron aprobados por los Centros para el Control de Enfermedades como una estrategia de detección alternativa a la TST en individuos inmunocompetentes [11], pero su utilidad clínica como prueba única para la detección de LTBI en pacientes inmunocomprometidos es controvertida. Además, su utilidad en pacientes con psoriasis y artritis psoriásica aún no se ha establecido Cien pacientes con psoriasis y artritis psoriásica y 50 controles sanos participarán en este estudio.

Se solicitará a los sujetos inscritos que completen un cuestionario sociodemográfico y de detección de TB detallado que incluya sexo, edad, lugar de nacimiento y trabajo, vacunación previa con BCG, contacto cercano con pacientes con TB o profilaxis de TB en el pasado. El estudio de detección incluirá la evaluación de la actividad clínica de la enfermedad utilizando la Puntuación de actividad de la enfermedad 28 (DAS-28) y el Índice de gravedad del área de la psoriasis (PASI), la documentación del tratamiento anterior o actual con corticosteroides sistémicos y medicamentos inmunosupresores, y la obtención de imágenes (radiografía de tórax) .

A todos los sujetos se les realizará una prueba de TST y QFT-G. Se administrará una dosis de 2 TU de PPD por un técnico certificado mediante el método de Mantoux y se medirá la induración a las 72 h. La TST se considerará positiva si es superior o igual a 5 mm para pacientes con AR y 10 mm para los controles La ausencia de induración de <2 mm de diámetro se registrará como anérgica y los resultados negativos de la TST se definieron como tener más de 2 pero menos de 5 mm reacciones para pacientes con AR.

Prueba QFT-G El ensayo de IFN de sangre total QuantiFeron® (QIFN) de segunda generación (Cellestis) se realizará e interpretará de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Brevemente, la prueba consistió en un control negativo (pocillo nulo, es decir, sangre entera sin antígenos ni mitógeno), un control positivo (pocillo de mitógeno, es decir, sangre entera estimulada con el mitógeno fitohemaglutinina [PHA]) y dos pocillos de muestra, es decir, sangre entera estimulada con cualquiera de los antígenos específicos de M. tuberculosis, el antígeno secretor temprano 6 (ESAT-6) o la proteína filtrada de cultivo 10 (CFP-10).

Se extraerán cinco ml de sangre total heparinizada para QFT-G antes de la prueba de PPD. Las muestras de sangre se incubarán durante 16-20 h (durante la noche) a 37 °C en una atmósfera humidificada. Los niveles de IFN-γ en el pocillo nulo se considerarán de fondo y se restarán de los resultados del pocillo de mitógeno y de los pocillos estimulados con antígeno. Los resultados se considerarán positivos si la concentración de IFN-γ en el pocillo de la muestra tras la estimulación con ESAT-6 y/o CFP-10 será superior o igual a 0,35 UI/ml (después de restar el valor del pocillo nulo). ), independientemente de los resultados del control positivo (mitogen well). Los resultados se considerarán negativos si la respuesta a los antígenos específicos (tras restar el valor del pocillo nulo) es inferior a 0,35 UI/ml y si los niveles de IFN-γ del control positivo (tras restar el valor del pocillo nulo) ) es mayor o igual a 0,5 UI/ml. Los resultados se considerarán indeterminados si ambos pocillos de muestra estimulados con antígeno son negativos (es decir, <0,35 UI/ml después de restar el valor del pocillo Nil) y si el valor del pocillo de control positivo es inferior a 0,5 UI/ml después de restar el valor del pozo cero

el cero bien.

Prueba QFT-G El ensayo de IFN de sangre total QuantiFeron® (QIFN) de segunda generación (Cellestis) se realizó e interpretó de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Brevemente, la prueba consistió en un control negativo (pocillo nulo, es decir, sangre completa sin antígenos ni mitógeno), un control positivo (pocillo de mitógeno, es decir, sangre completa estimulada con el mitógeno fitohemaglutinina [PHA]) y dos pocillos de muestra, es decir, sangre entera estimulada con cualquiera de los antígenos específicos de M. tuberculosis, el antígeno secretor temprano 6 (ESAT-6) o la proteína filtrada de cultivo 10 (CFP-10).

Se extrajeron cinco ml de sangre entera heparinizada para QFT-G antes de la prueba de PPD. Las muestras de sangre se incubaron durante 16-20 h (durante la noche) a 37 °C en una atmósfera humidificada. Los niveles de IFN-γ en el pocillo nulo se consideraron de fondo y se restaron de los resultados del pocillo de mitógeno y de los pocillos estimulados con antígeno. Los resultados se consideraron positivos si la concentración de. El IFN-γ en el pocillo de muestra tras estimulación con ESAT-6 y/o CFP-10 fue mayor o igual a 0,35 UI/ml (después de restar el valor del pocillo nulo), independientemente de los resultados del control positivo (mitógeno Bueno). Los resultados se consideraron negativos si la respuesta a los antígenos específicos (después de restar el valor del pocillo nulo) era inferior a 0,35 UI/ml y si los niveles de IFN-γ del control positivo (después de restar el valor del pocillo nulo) fueron mayores o iguales a 0,5 UI/ml. Los resultados se consideraron indeterminados si ambos pocillos de muestra estimulados con antígeno eran negativos (es decir, <0,35 UI/ml después de restar el valor del pocillo Nil) y si el valor del pocillo de control positivo era inferior a 0,5 UI/ml después de restar el valor del pocillo. valor de

el cero bien.