Tutkimus verenvuototapahtumiin liittyvistä patofysiologisista mekanismeista (LOWE)

Johdanto: Lowen oireyhtymä (LS), joka tunnetaan myös nimellä Lowen okulorebrorenaalinen oireyhtymä (OCRL), on harvinainen X-sairaus, jolle on tunnusomaista synnynnäinen kaihi, vajaatoiminta munuaistiehyissä, lihasten hypotonia ja vaihteleva henkinen jälkeenjääneisyys. LS-potilaat tarvitsevat usein leikkausta, joista osaan liittyy vakava verenvuotoriski, kuten skolioosin vähentäminen, lonkkaleikkaus tai silmäleikkaus. Äskettäisessä retrospektiivisessä kliinisessä tutkimuksessa ranskalaisilla LS-potilailla havaitsimme epänormaalin verenvuototapahtumien määrän, joista joillakin oli dramaattisia tuloksia. LS johtuu OCRL-geenin YMUTATIONSISTA, joka koodaa OCRL:ää, inositolipolyfosfaatti-5-fosfataasia. Edullinen OCRL-substraatti on kalvofosfolipidifosfatidyyli-inositoli-4,5-bisfosfaatti (PtdIns(4,5)P2). OCRL sisältää myös Rho GTPaasia aktivoivan proteiinin (GAP) kaltaisen domeenin, joka osallistuu Rho-proteiinien (Rho, Rac, Cdc42) säätelyyn GTPaasia aktivoivina proteiineina tai välittämällä proteiini-proteiini-vuorovaikutuksia. PtdIns(4,5)P2:lla ja Rho-riippuvaisella signaloinnilla on keskeinen rooli monissa tärkeissä soluprosesseissa, mukaan lukien vesikulaarinen liikennöinti ja solun tukiranka, jotka molemmat ovat erittäin tärkeitä verihiutaleiden toiminnalle. Siten PtdIns(4,5)P2-tasojen moduloinnin ja/tai Rho-riippuvaisen signaloinnin odotetaan vaikuttavan verihiutaleiden toimintaan.

Kliinisen havainnon perusteella testasimme, voisiko 6 Lowe-potilaan verenvuoto-oireet liittyä homeostaasin poikkeavuuksiin, ja havaitsimme, että kaikilla kuudella potilaalla oli pitkittynyt sulkeutumisaika, joka testattiin PFA100-analysaattorilla (Platelet Function Analyzer). Nämä tulokset mitattiin häiritsevän tekijän, kuten anemian, trombopenian tai von Willebrandin tekijän puutteen, puuttuessa, mikä viittaa verihiutaleiden toimintahäiriöön.

Tutkimuksen perustelut:

Epänormaaliin verenvuotoriskiin liittyvän fysiopatologian ymmärtäminen on erittäin tärkeää ehkäisyn ja kliinisen hoidon kannalta Lowe-potilailla, jotka tarvitsevat usein kirurgista hoitoa.

Tavoitteet:

Tutkimuksen päätavoitteena on vahvistaa verihiutaleiden toimintahäiriön esiintyminen Lowen oireyhtymässä ja karakterisoida tämä poikkeavuus. Toissijaisena tavoitteena on tehdä toimintatesti, jonka avulla voidaan havaita potilaita, joilla on lisääntynyt verenvuotoriski. Lisäksi voisimme määrittää, onko verihiutale mielenkiintoinen solumalli, joka on helposti saatavilla, Lowe-potilaiden lisätutkimuksia varten.

Menetelmät:

Tutkimme verihiutaleiden aktivaatiovastetta 15 Lowe-tapauksessa ja 15 normaalissa tapauksessa. Arviointikriteereitä ovat PFA100, TROMBELASTOMETRIA (ROTEM), aggregaatio, eritys, adheesio virtausjärjestelmässä ja hyytymän vetäytyminen. Vertailemme myös aktivoimattomien verihiutaleiden ja aktivoivien verihiutaleiden molekyylisiä (fosfoproteiinit, fosfolipidit...) ja rakenteellisia muutoksia.

Johtopäätös:

Verihiutaleiden aktivaation poikkeavuuden karakterisointi Lowe-potilailla voi johtaa suureen hyötyyn potilaille, joilla on systemaattinen homeostaasiseulonta ja erityiset varotoimenpiteet ennen leikkausta, joita usein vaaditaan tässä multisysteemisessä tilassa. Lisäksi tämä tutkimus voisi auttaa menemään pidemmälle PI(4,5)P2-signalointireitteihin ja voi tarjota vihjeitä näiden prosessien keskinäisestä suhteesta normaalissa aineenvaihdunnassa ja sairaustiloissa.