Изучение патофизиологических механизмов, участвующих в кровотечениях (LOWE)

Введение. Синдром Лоу (LS), также известный как окулоцереброренальный синдром Лоу (OCRL), представляет собой редкое Х-сцепленное заболевание, характеризующееся врожденной катарактой, нарушением функции клеток почечных канальцев, мышечной гипотонией и различной степенью умственной отсталости. Пациенты с LS нуждаются в частых хирургических вмешательствах, некоторые из которых связаны с тяжелым геморрагическим риском, например, уменьшение сколиоза, операции на бедре или глазах. В недавнем ретроспективном клиническом обследовании французских пациентов с СЛ мы наблюдали аномальную частоту геморрагических явлений, некоторые из которых имели драматические последствия. LS вызывается МУТАЦИЕЙ в гене OCRL, который кодирует OCRL, инозитолполифосфат-5-фосфатазу. Предпочтительным субстратом OCRL является мембранный фосфолипид фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат (PtdIns(4,5)P2). OCRL также содержит домен, подобный активирующему Rho ГТФазу белку (GAP), который участвует в регуляции белков Rho (Rho, Rac, Cdc42) в качестве белков, активирующих ГТФазу, или опосредуя белок-белковые взаимодействия. PtdIns(4,5)P2 и Rho-зависимая передача сигналов играют центральную роль во многих важных клеточных процессах, включая везикулярный перенос и организацию цитоскелета, оба из которых очень важны для функции тромбоцитов. Таким образом, ожидается, что модуляция уровней PtdIns(4,5)P2 и/или Rho-зависимая передача сигналов будут влиять на функцию тромбоцитов.

Основываясь на клиническом наблюдении, мы проверили, может ли симптом геморрагии у 6 пациентов Лоу быть связан с аномалиями гомеостаза, и мы обнаружили, что у всех шести пациентов было увеличенное время закрытия, проверенное анализатором PFA100 (анализатор функции тромбоцитов). Эти результаты были измерены при отсутствии мешающих факторов, таких как анемия, тромбопения или дефицит фактора фон Виллебранда, что предполагает дисфункцию тромбоцитов.

Обоснование исследования:

Понимание физиопатологии, связанной с аномальным геморрагическим риском, представляет большой интерес с точки зрения профилактики и клинического ведения пациентов с Лоу, которым требуется частая хирургическая помощь.

Цели:

Основная цель исследования — подтвердить наличие дисфункции тромбоцитов при синдроме Лоу и охарактеризовать эту аномалию. Вторичные цели заключаются в проведении функционального теста, позволяющего выявить пациентов с повышенным геморрагическим риском. Кроме того, мы могли определить, являются ли тромбоциты интересной клеточной моделью, легко доступной для дальнейших исследований OCRL1 у пациентов с Лоу.

Методы:

Мы исследуем реакцию активации тромбоцитов в 15 случаях болезни Лоу и 15 нормальных случаях. Критерии оценки будут включать PFA100, ТРОМБОЭЛАСТОМЕТРИЯ (ROTEM), агрегацию, секрецию, адгезию в системе потока и ретракцию сгустка. Мы также сравним молекулярные (фосфопротеины, фосфолипиды...) и структурные модификации неактивированных и активированных тромбоцитов.

Заключение:

Характеристика аномалии активации тромбоцитов у пациентов с Лоу может принести большую пользу пациентам с систематическим скринингом гомеостаза и соблюдением специальных правил предосторожности перед операцией, которые часто требуются при этом мультисистемном состоянии. Более того, это исследование может способствовать дальнейшему изучению сигнальных путей PI(4,5)P2 и может дать ключ к пониманию взаимосвязи между этими процессами при нормальном метаболизме и болезненных состояниях.