Studium patofyziologických mechanismů zapojených do krvácení (LOWE)

Úvod: Loweův syndrom (LS), také známý jako okulocerebrorenální syndrom Lowe (OCRL), je vzácný X-vázaný stav charakterizovaný vrozenou kataraktou, defektní funkcí ledvinných tubulů, svalovou hypotonií a různým stupněm mentální retardace. Pacienti s LS vyžadují časté operace, z nichž některé jsou spojeny se závažným hemoragickým rizikem, jako je redukce skoliózy, operace kyčle nebo operace oka. V nedávném retrospektivním klinickém průzkumu francouzských pacientů s LS jsme pozorovali abnormální četnost hemoragických příhod, z nichž některé měly dramatické výsledky. LS je způsobena MUtacemi v genu OCRL, který kóduje OCRL, inositolpolyfosfát-5-fosfatázu. Výhodným OCRL substrátem je membránový fosfolipid fosfatidylinositol-4,5-bisfosfát (Ptdlns(4,5)P2). OCRL také obsahuje Rho GTPázu aktivující protein (GAP)-like doménu, která se účastní regulace Rho proteinů (Rho, Rac, Cdc42), jako proteinů aktivujících GTPázu nebo zprostředkováním interakcí protein-protein. PtdIns(4,5)P2 a Rho-dependentní signalizace hrají ústřední roli v mnoha důležitých buněčných procesech, včetně vezikulárního transportu a organizace cytoskeletu, které jsou oba velmi důležité pro funkci krevních destiček. Lze tedy očekávat, že modulace hladin PtdIns(4,5)P2 a/nebo Rho-dependentní signalizace ovlivní funkci krevních destiček.

Na základě klinického pozorování jsme testovali, zda by hemoragický symptom u 6 pacientů s Lowe mohl souviset s abnormalitami homeostázy a zjistili jsme, že všech šest pacientů mělo prodlouženou dobu uzavření testovanou analyzátorem PFA100 (Platelet Function Analyzer). Tyto výsledky byly měřeny v nepřítomnosti interferujícího faktoru, jako je anémie, trombopenie nebo nedostatek von Willebrandova faktoru, což naznačuje dysfunkci krevních destiček.

Zdůvodnění studie:

Pochopení fyziopatologie spojené s abnormálním hemoragickým rizikem je hlavním zájmem z hlediska prevence a klinické léčby u pacientů s Lowe, kteří vyžadují častou chirurgickou péči.

Cíle:

Hlavním cílem studie je potvrdit přítomnost dysfunkce destiček u Loweova syndromu a charakterizovat tuto abnormalitu. Sekundárním cílem je stanovení funkčního testu umožňujícího detekci pacientů se zvyšujícím se rizikem hemoragie. Kromě toho bychom mohli určit, zda je krevní destička zajímavým buněčným modelem, snadno dostupným pro další studie OCRL1 u pacientů s Lowe.

Metody:

Budeme vyšetřovat odpověď na aktivaci krevních destiček v 15 případech Lowe a 15 normálních případech. Hodnotící kritéria budou zahrnovat PFA100, THROMBOELASTOMETRII (ROTEM), agregaci, sekreci, adhezi v systému toku a stažení sraženiny. Porovnáme také molekulární (fosfoproteiny, fosfolipid...) a strukturální modifikace neaktivované a aktivující destičky.

Závěr:

Charakterizace abnormality aktivace krevních destiček u pacientů s Lowe by mohla vést k velkému přínosu pro pacienty se systematickým screeningem homeostázy a zvláštními bezpečnostními pravidly před operací, často požadovanými u tohoto multisystémového stavu. Kromě toho by tato studie mohla přispět k tomu, aby se pokročilo v signálních drahách PI(4,5)P2 a mohlo by poskytnout vodítko k vzájemnému vztahu mezi těmito procesy v normálním metabolismu a chorobných stavech.