Badanie mechanizmów patofizjologicznych związanych z krwawieniami (LOWE)

Wprowadzenie: Zespół Lowe'a (LS), znany również jako zespół oczno-mózgowo-nerkowy Lowe'a (OCRL), jest rzadką chorobą sprzężoną z chromosomem X, charakteryzującą się wrodzoną zaćmą, upośledzoną funkcją komórek kanalików nerkowych, hipotonią mięśniową i różnym stopniem upośledzenia umysłowego. Pacjenci z LS wymagają częstych operacji, z których część wiąże się z poważnym ryzykiem krwotoku, takich jak redukcja skoliozy, operacja stawu biodrowego lub operacja oka. W niedawnym retrospektywnym badaniu klinicznym francuskich pacjentów z LS zaobserwowaliśmy nienormalną częstość zdarzeń krwotocznych, z których niektóre miały dramatyczne skutki. LS jest spowodowane przez MUTACJE w genie OCRL, który koduje OCRL, 5-fosfatazę polifosforanu inozytolu. Korzystnym substratem OCRL jest błonowy fosfolipid 4,5-bisfosforanu fosfatydyloinozytolu (PtdIns(4,5)P2). OCRL zawiera również domenę podobną do białka aktywującego GTPazę Rho (GAP), która uczestniczy w regulacji białek Rho (Rho, Rac, Cdc42), jako białka aktywujące GTPazę lub pośrednicząc w interakcjach białko-białko. PtdIns(4,5)P2 i zależna od Rho sygnalizacja odgrywają kluczową rolę w wielu ważnych procesach komórkowych, w tym w ruchu pęcherzykowym i organizacji cytoszkieletu, z których oba są bardzo ważne dla funkcji płytek krwi. Zatem oczekuje się, że modulacja poziomów PtdIns(4,5)P2 i/lub sygnalizacja zależna od Rho wpłynie na funkcję płytek krwi.

Na podstawie obserwacji klinicznej sprawdziliśmy, czy objawy krwotoczne u 6 pacjentów z Lowe mogą być związane z zaburzeniami homeostazy i stwierdziliśmy, że u wszystkich sześciu pacjentów stwierdzono wydłużony czas zamykania, co zbadano analizatorem PFA100 (Platelet Function Analyzer). Wyniki te mierzono przy braku czynnika zakłócającego, takiego jak niedokrwistość, małopłytkowość lub niedobór czynnika von Willebranda, co sugeruje dysfunkcję płytek krwi.

Uzasadnienie badania:

Zrozumienie fizjopatologii związanej z nieprawidłowym ryzykiem krwotoku ma duże znaczenie w zakresie profilaktyki i postępowania klinicznego u pacjentów z zespołem Lowe, którzy wymagają częstej opieki chirurgicznej.

Cele:

Głównym celem pracy jest potwierdzenie obecności dysfunkcji płytek krwi w zespole Lowe'a oraz scharakteryzowanie tej nieprawidłowości. Celem drugorzędnym jest ustalenie testu czynnościowego pozwalającego na wykrycie pacjentów ze zwiększonym ryzykiem krwotoku. Ponadto mogliśmy ustalić, czy płytka krwi jest interesującym modelem komórkowym, łatwo dostępnym do dalszych badań OCRL1 u pacjentów z Lowe.

Metody:

Zbadamy odpowiedź aktywacji płytek krwi w 15 przypadkach Lowe'a i 15 przypadkach normalnych. Kryteria oceny będą obejmować PFA100, TROMBOELASTOMETRIĘ (ROTEM), agregację, sekrecję, adhezję w systemie przepływu i retrakcję skrzepu. Porównamy również molekularne (fosfobiałka, fosfolipidy...) i strukturalne modyfikacje płytki nieaktywowanej i aktywującej.

Wniosek:

Charakterystyka nieprawidłowości aktywacji płytek krwi u pacjentów z Lowe może prowadzić do znacznych korzyści dla pacjentów z systematycznym badaniem przesiewowym homeostazy i specjalnymi zasadami ostrożności przed operacją, często wymaganymi w tym stanie wieloukładowym. Co więcej, badanie to może przyczynić się do dalszego zbadania szlaków sygnałowych PI(4,5)P2 i może dostarczyć wskazówek dotyczących wzajemnych powiązań między tymi procesami w normalnym metabolizmie i stanach chorobowych.