Verikoe rintasyöpään liittyvien autovasta-aineiden varalta

Yleistä tietoa:

Koska normaalin solun mutaatiot, jotka johtavat pahanlaatuisuuteen, sisältävät muutoksia solujen rakenteessa ja toiminnassa, voidaan olettaa, että immuunijärjestelmä on tunnistanut osan näistä muutoksista antigeenisiksi määritteiksi, joita vastaan ​​tulisi reagoida. Monien vuosien ajan tutkijat yrittivät erottaa syöpäpotilaat terveestä väestöstä spesifisten autovasta-aineiden tason eron perusteella. Terveellä populaatiolla määritettiin autovasta-aineiden määrän perustaso, ja potilaspopulaatiolla piti olla tilastollisesti merkitsevästi korkeampi autovasta-ainetaso. Monia esimerkkejä tästä menetelmästä löytyy tieteellisestä kirjallisuudesta [esimerkkiviitteet - Naora et.al. (2001); mintz et. Al. (2003); Korneeva et. Al (2000)]. Autovasta-aineiden läsnäolo kaikissa populaatioissa eri tasoilla teki näiden spesifisesti erottelevien vasta-aineiden löytämisen erittäin vaikeaksi. Tähän mennessä mikään spesifinen autovasta-aine ei tee eroa pelkästään terveiden ja syöpäpotilaiden välillä (toisin kuin autoimmuunisairauksissa, joissa spesifisiä autovasta-aineita löytyy vain potilaista erittäin korkeina pitoisuuksina).

Työmme olettaa, että spesifisten autovasta-aineiden ilmentymistasoa tulisi muuttaa syövässä, ja näin ollen nämä erot voivat viitata syövän olemassaoloon / puuttumiseen.

Tässä koeprotokollassa tarkastamme eroja epäiltyjen rintojen patologian spesifisten autovasta-aineiden ilmentymistasoissa.

Tuleva CAAA-testi Käyttötarkoitus – Tiettyjen rintojen CAAA:iden tunnistaminen voisi tarjota kliinikolle lisää immunologisia ja antigeenisiä tietoja potilaan tilasta tai lääketieteellisestä tilasta.

Testin tärkeimmät vaiheet ja komponentit - CAAA-testi koostuu verenkeräys- ja käsittelyvaiheesta, jota seuraa spesifisten autovasta-aineiden havaitseminen ELISA-pohjaisella määrityksellä ja matemaattisella käsittelyllä, minkä jälkeen tulokset luokitellaan "positiivisiksi" tai "negatiivisiksi". rintasyöpään.

Tutkimusväestö:

Tutkimuspopulaatio sisältää kaikki naiset, joille on suunniteltu patologinen tai sytologinen vahvistus joko biopsialla tai sytologialla ennen syöpähoitoa. Kliininen epäily sisältää yhden seuraavista: positiivinen mammografia/US/MRI ja epäilty fyysinen tarkastus. Lopullinen varmistus ("tosi positiivinen" tai "todellinen negatiivinen") tehdään vain patologian/sytologian osalta.

Aiheen valinta:

"Todella positiivinen" ryhmä koostuu kaikista peräkkäisistä potilaista, jotka täyttävät sisällyttämiskriteerit ja joilla on positiiviset biopsiatulokset. "Tosi negatiivinen" ryhmä koostuu peräkkäisistä potilaista, jotka täyttävät sisällyttämiskriteerit ja joilla on negatiiviset biopsiatulokset.

Ennen kuin potilaalta otetaan verinäyte, on hankittava kirjallinen tietoinen suostumus.

Tämä tutkimus perustuu useiden keskusten osallistumiseen. Tutkimuskohteiden vähimmäismäärä on 2.

Kaikki toimipaikat sijaitsevat sairaaloissa joko leikkausosastolla tai asianmukaisessa yksikössä, joka vastaa BC-potilaiden hoidosta.

Sama protokolla ja samoja valvontarutiineja sovelletaan kaikkiin sivustoihin. Kaikki CRF-tiedot toimitetaan sähköisesti erillisen ja suojatun Internet-sivuston kautta, ja kaikkia muutoksia seurataan. CAAA-testejä suorittaessaan laboratorio-/sponsoritiimillä ei ole tietoa näytteen luonteesta. Nämä patologiset tiedot toimitetaan tilastollista arviointia varten CAAA-testin rinnalla.

SUUNNITTELU:

Yleiskuvaus - Tämä tutkimus on yksi sokea tapauskontrollivalidaatiotutkimus, johon osallistuu kaikki peräkkäiset rintasyöpäpotilaat, joilla on positiiviset biopsiatulokset (tosi positiiviset) ja yhtä monta potilaita, joilla on negatiiviset biopsiatulokset (tosi negatiiviset). Tutkimuksen tarkoituksena on arvioida CAAA-testin tehokkuutta.

Tutkimuksen tehokkuus määritellään CAAA-testin spesifisyydeksi ennalta määritellylle 95 %:n herkkyydelle.

Tutkimuksessa arvioidaan CAAA-testin herkkyys osoittaakseen, että se ei ole alle ilmoitetun 95 prosentin tason.

Tutkimuksessa arvioidaan CAAA-testin spesifisyyttä uudessa tutkimuspopulaatiossa.

Tunnettujen mammografian PPV-tulosten mukaan eri populaatioissa oletamme, että tutkimuspopulaatio sisältää noin 30 % todellisista positiivisista syöpätapauksista.

Tähän mennessä suuri osa epäillyistä koehenkilöistä oli diagnosoitu vasta biopsian lopullisen patologian perusteella. Tässä tutkimuksessa todellisia positiivisia ja todellisia negatiivisia tapauksia (joka on vahvistettu biopsialla) verrataan CAAA-testin tuloksiin.

Tutkimusmenettelyt

Sairaalassa:

Ensin tunnistetun tutkimushenkilön on allekirjoitettava tietoinen suostumuslomake, ja hänen kelpoisuuslomakkeensa on täytettävä, ja molemmat tulee olla viivakoodattuja.

Potilaan lääketieteellisistä tiedostoista saadut koehenkilöiden kliiniset tiedot, mukaan lukien ikä, sairaushistoria ja rintasyövän diagnostiseen arviointiin johtaneiden testien tulokset, tallennetaan asianmukaisille, viivakoodatuille, tutkimusta edeltäville tapauslomakkeille. Raportit ovat sähköisiä erillisen ja suojatun Internet-sivuston kautta, kaikki tietokannan muutokset tallennetaan ja ne ovat jäljitettävissä. Paperikopiot asiakirjoista säilytetään osastolla. Tutkimus on anonyymi ja osasto säilyttää potilaan nimen paljastamatta sitä tutkijoille ja tutkimuksen rahoittajalle.

Lääkäri/hoitaja/flebotomi kerää hepariinityhjiöputken (noin 8 ml) ja merkitsee ne (viivakoodilla). Putki, jossa on verta, pakataan kaksoissuljettuun astiaan.

Veri kuljetetaan huoneenlämmössä (18-25°C) asiaankuuluvien määräysten mukaisesti laboratorioon. Kuljetusaika on enintään 6 tuntia.

Verenkäsittelylaboratorio kerää seerumin protokollan mukaisesti ja seerumi säilytetään pakastettuna -80 °C:ssa asianmukaisesti merkittyinä erinä. Pakastetut näytteet lähetetään diagnostiseen laboratorioon vasta-ainetutkimuksia varten.

Diagnostisessa laboratoriossa ELISA-pohjaiset testit automaattisten vasta-aineiden suhteellisten ilmentymissuhteiden havaitsemiseksi suoritetaan jokaiselle näytteelle laboratorioprotokollan mukaisesti. Näytteistä testataan aiemmassa harjoitussarjassa tunnistettujen antigeenien vasta-ainetasot. Kaikki tiedot tallennetaan pysyvästi suoraan erilliselle tietokoneelle. Jokaisen näytteen kaikki vasta-ainetulokset tallennetaan koodattuun potilastiedostoon. Matemaattinen algoritmi määrittää, onko näyte positiivinen vai negatiivinen.

Sairaalassa biopsian jälkeinen:

2-3 viikkoa biopsian jälkeen CRO kerää potilaan tiedostoista patologian laboratorion tulokset ja kaikki muut asiaankuuluvat tiedot epäillyn massan luonteesta. Nämä tulokset tallennetaan omistetulle ja suojatulle Internet-sivustolle, ja painettu viivakoodattu CRF säilytetään osastolla.

Sairaala säilyttää viipaleita epäillyistä massoista (joko biopsiasta tai leikkauksesta) tulevia immunohistokemiallisia tai muita tutkimuksia varten, jotka sponsori suorittaa.

Lopullista patologiaa verrataan CAAA-testin tuloksiin. Tuloksia analysoi syöpäpopulaatiotutkimuksiin perehtynyt tilastotieteilijä.

Tässä tutkimuksessa mukana oleville potilaille tehdään verikoe, ja riskit ovat vain veren keräämiseen liittyvät riskit. Koska tulokset eivät vaikuta hoitoon, tutkimukseen osallistuville potilaille ei aiheudu riskejä.

Koska tutkimuksessa ei ole yhteyttä yksittäiseen potilaaseen, verinäytteen lisätesteistä ei ole välitöntä hyötyä. Tulevaisuuden hyöty voi olla peräisin määrityksen kehittämisestä.

Tämä tutkimus on sokea prospektiivinen validointitutkimus, jossa on mukana kaikki peräkkäiset rintapatologiaepäillyt koehenkilöt, joille on määrätty biopsia tutkimuksen keston aikana. Tutkimuksen tarkoituksena on arvioida CAAA-testin herkkyyttä ja spesifisyyttä rintasyövän toteamiseksi koepalalle määrätyillä naisilla.

Koehenkilöt seulotaan mahdollisen osallistumisen suhteen tutkimukseen mukaanotto- ja poissulkemiskriteerien mukaisesti.

Tiedot sisältävät koehenkilöiden kliinisen ja patologisen tilan parametrit ja CAAA ELISA -tulokset.

Tutkimuksella on kaksi tavoitetta.

1. Testaa, ettei CAAA:n herkkyys ole ennalta määritellyn tason alapuolella.
2. CAAA-testin spesifisyyden arvioiminen. Tilastollinen hypoteesi Pääehto otoskoon määrittämisessä on varmistaa, että testin herkkyys ei ole pienempi kuin ennalta määrätty taso. Luokittelusääntö laadittiin siten, että harjoitussarjan herkkyys oli 100 %. Oletamme, että todellinen herkkyys ei ole pienempi kuin 99 %.

Nollahypoteesi: Testin herkkyys ei ole korkeampi kuin 95 %. Vaihtoehtoinen hypoteesi: Testin herkkyys on vähintään 99 %. Tiedonhallinta Tietokannan hallintajärjestelmä on suunniteltava ja sitä on ylläpidettävä, mukaan lukien näytön valmistelu ja muokkaustarkistusohjelmointi. Jokaisessa tiedonsyöttökeskuksessa on suoritettava kliinisten tietojen syöttöä edeltävä ja sen jälkeinen laadunvalvonta. Kaikki ELISA-testien tulokset ladataan tietokantaan Internet-pohjaisen käyttöliittymän kautta, ja ne lukitaan tulevilta muutoksilta. ELISA-testin tulosten muuttaminen edellyttää, että tietokannan lukituksen avaaminen edellyttää paikallisen CRO:n, sponsorin ja työpaikan lääkärin suostumusta. Lukituksen avaaminen tapahtuu vain verkkovastaavan toimesta, ja se tallennetaan jäljitysjärjestelmän komponenttiin ja sekä sponsorin että CRO:n pitämässä paperiversiossa.