Blodprov för bröstcancerassocierade autoantikroppar

Allmän information:

Eftersom mutationerna i en normal cell som leder till en malignitet innebär förändringar i cellernas struktur och funktion, kan man anta att immunsystemet har känt igen några av dessa förändringar som antigena bestämningsfaktorer som man bör svara mot. Under många år har forskare försökt skilja mellan cancerpatienter och frisk befolkning genom skillnaden i specifika autoantikroppsnivåer. I den friska populationen bestämdes en baslinje för mängden autoantikroppar, och patientpopulationen måste ha en statistiskt signifikant högre nivå av autoantikroppar. Många exempel på denna metod finns i den vetenskapliga litteraturen [exempelreferenser - Naora et.al. (2001); mintz et. Al. (2003); Korneeva et. Al (2000)]. Närvaron av autoantikroppar i hela populationen i olika nivåer gjorde det mycket svårt att hitta dessa specifikt diskriminerande antikroppar. Hittills skiljer ingen specifik autoantikropp enbart mellan friska patienter och cancerpatienter (till skillnad från autoimmuna sjukdomar, där specifika autoantikroppar kan hittas i mycket höga nivåer endast hos patienter).

Vårt arbete förutsätter att specifika autoantikroppsuttrycksnivåer bör ändras i cancer, och därför kan dessa skillnader indikera närvaron/frånvaron av cancer.

I detta experimentprotokoll kontrollerar vi skillnader i uttrycksnivåer för specifika autoantikroppar av misstänkt bröstpatologi.

Framtida CAAA-test Användningsavsikt - Identifiering av specifika bröst-CAAA kan ge läkaren ytterligare immunologisk och antigen information om patientens tillstånd eller medicinska status.

Testa huvudsteg och komponenter - CAAA-testet består av ett blodinsamlings- och bearbetningssteg följt av detektion av specifika autoantikroppar med en ELISA-baserad analys och en matematisk bearbetning, med en efterföljande klassificering av resultaten som "positiva" eller "negativa" för bröstcancer.

Studera befolkning:

Studiepopulationen inkluderar alla kvinnor som är schemalagda för en patologisk eller cytologisk bekräftelse antingen genom någon form av biopsi eller cytologi, innan någon anti-cancerbehandling. Den kliniska misstanken inkluderar en av följande: positiv mammografi/US/MRT och misstänkt fysisk kontroll. Slutlig verifiering ("true positive" eller "true negative") kommer endast att göras i relation till patologi/cytologi.

Ämnesval:

Den "sant positiva" gruppen består av alla sekventiella patienter som uppfyller inklusionskriterier och har positiva biopsiresultat. Den "sant negativa" gruppen består av sekventiella patienter som uppfyller inklusionskriterier och har negativa biopsiresultat.

Skriftligt informerat samtycke måste erhållas innan ett blodprov tas från patienten.

Denna studie kommer att baseras på deltagande från flera centra. Minsta antal platser för studien är 2.

Alla platser kommer att finnas inom sjukhusen, antingen på operationsavdelningen eller den relevanta specifika enheten som ansvarar för att tillhandahålla vård för BC-patienter.

Samma protokoll och samma övervakningsrutiner kommer att tillämpas på alla platser. All CRF-data kommer att skickas elektroniskt via en dedikerad och säker internetsida, alla ändringar kommer att spåras. När CAAA-testerna utförs har laboratorie-/sponsorteamet ingen information om provets karaktär. Denna patologiska information kommer att tillhandahållas för statistisk utvärdering parallellt med CAAA-testet.

STUDERA DESIGN:

Övergripande beskrivning - Den aktuella studien är en enda blind fall-kontrollvalideringsstudie, som involverar alla på varandra följande bröstcancerpatienter som har positiva biopsiresultat (verkligt positiva) och lika många patienter med negativa biopsiresultat (verkligt negativa). Syftet med studien är att utvärdera effektiviteten av CAAA-testet.

Studiens effektivitet definieras som specificiteten för CAAA-testet för en fördefinierad sensitivitet på 95 %.

Studien kommer att utvärdera CAAA-testets känslighet för att visa att det inte är under den deklarerade nivån på 95 %.

Studien kommer att utvärdera specificiteten hos CAAA-testet i den nya studiepopulationen.

Enligt kända resultat av PPV av mammografi i olika populationer antar vi att studiepopulationen kommer att inkludera cirka 30 % av sanna positiva cancerfall.

Från och med idag diagnostiserades en stor del av de misstänkta försökspersonerna endast genom slutlig patologi av biopsi. I denna studie kommer de sanna positiva och sanna negativa fallen (som verifierats med biopsi) att jämföras med CAAA-testresultaten.

Studieprocedurer

På sjukhuset:

Först måste en identifierad studiesubjekt underteckna ett informerat samtycke, och hennes behörighetsformulär ska fyllas i, båda ska vara streckkodade.

Försökspersoners kliniska information som erhållits från patientens medicinska journal, inklusive ålder, sjukdomshistoria och resultat av tester gjorda som ledde till diagnostisk utvärdering av bröstcancer kommer att registreras på lämpliga, streckkodade fallrapportformulär före studien. Rapporterna kommer att vara elektroniska via en dedikerad och säker internetsida, alla ändringar i databasen kommer att registreras och kommer att kunna spåras. En papperskopia av journalerna kommer att förvaras på avdelningen. Studien är anonym och avdelningen kommer att behålla patientens namn utan att avslöja det för utredarna och studiens sponsor.

Läkaren/sköterskan/flebotomisten samlar in ett heparinvakuumrör (cirka 8 ml), etiketterar dem (streckkod). Röret med blodet kommer att förpackas i en dubbel förseglad behållare.

Blodet kommer att transporteras i rumstemperatur (18-25°C), enligt gällande föreskrifter, till laboratoriet. Transporttiden kommer inte att vara mer än 6 timmar.

Blodhanteringslaboratoriet kommer att samla in serum enligt protokollet, och serumet kommer att förvaras fryst vid -80, i korrekt märkta alikvoter. De frysta proverna kommer att skickas till diagnoslaboratoriet för antikroppstester.

I det diagnostiska laboratoriet kommer ELISA-baserade tester för detektion av Autoantikroppars relativa uttrycksförhållanden att utföras på varje prov enligt laboratorieprotokollet. Proverna kommer att testas för antikroppsnivåer för de antigener som har identifierats på ett tidigare träningsset. All data kommer att registreras permanent direkt i en dedikerad dator. För varje prov kommer alla antikroppsresultat att läggas in i den kodade patientfilen. En matematisk algoritm avgör om provet är positivt eller negativt.

På sjukhuset, efter biopsi:

2-3 veckor efter biopsi kommer CRO att samla in resultaten från patologilabbet och all annan relevant information om den misstänkta massans karaktär från patientens fil. Dessa resultat kommer att registreras på den dedikerade och säkrade webbplatsen och en tryckt streckkodad CRF kommer att förvaras på avdelningen.

Sjukhuset kommer att bevara skivor från de misstänkta massorna (antingen från biopsi eller kirurgi) för framtida immunhistokemiska eller andra studier som ska utföras av sponsorn.

Den slutliga patologin kommer att jämföras med CAAA-testresultaten. Resultaten kommer att analyseras av en statistiker med expertis inom cancerpopulationsstudier.

Patienterna som ingår i denna studie genomgår blodprov, och endast risker är de som involverar blodinsamling. Eftersom behandlingen inte påverkas av resultaten utsätts inga risker för de patienter som deltar i studien.

Eftersom studien genomförs utan koppling till den enskilda patienten, finns det ingen omedelbar nytta av de ytterligare testerna som körs på blodprovet. Framtida fördelar kan härledas från utvecklingen av analysen.

Den aktuella studien är en blind prospektiv valideringsstudie, som involverar alla på varandra följande misstänkta bröstpatologiämnen som schemaläggs för biopsi under studiens varaktighet. Syftet med studien är att bedöma känsligheten och specificiteten hos CAAA-testet för att upptäcka bröstcancer hos kvinnor som ska biopsi.

Försökspersoner kommer att screenas för potentiellt deltagande i studien, enligt inklusions- och exkluderingskriterierna.

Data kommer att inkludera parametrar för det kliniska och patologiska tillståndet hos försökspersonerna och resultaten av CAAA ELISA.

Det finns två mål med studien.

1. För att testa att känsligheten för CAAA inte är under den fördefinierade nivån.
2. För att utvärdera specificiteten hos CAAA-testet. Statistisk hypotes Huvudvillkoret för att fastställa provstorleken är att validera att testets känslighet inte är lägre än den fördefinierade nivån. Klassificeringsregeln var upprättad på så sätt att känsligheten i träningsuppsättningen var 100 %. Vi antar att den verkliga känsligheten inte är lägre än 99%.

Nollhypotes: Testets känslighet är inte högre än 95 %. Alternativ hypotes: Testets känslighet är inte mindre än 99%. Datahantering Ett databashanteringssystem ska utformas och underhållas, inklusive skärmförberedelse och programmering av redigeringskontroller. Kvalitetskontroll av kliniska data före och efter inträdet ska utföras vid varje datainmatningscenter. Alla ELISA-testresultat kommer att laddas upp till databasen via ett internetbaserat gränssnitt och kommer att låsas mot ytterligare ändringar. För att ändra ELISA-testresultaten kräver upplåsning av databasen samtycke från den lokala CRO, sponsorn och platsens läkare. Upplåsning kommer endast att göras av webbmastern och kommer att registreras i spårningssystemets komponent och i en papperskopia som innehas av både sponsorn och CRO:n på webbplatsen.