Blodprøve for brystkræftassocierede autoantistoffer

Generelle oplysninger:

Da mutationerne i en normal celle, der fører til en malignitet, involverer ændringer i cellernes struktur og funktion, kunne det antages, at immunsystemet har genkendt nogle af disse ændringer som antigene bestemmer, der bør reageres imod. I mange år har efterforskere forsøgt at skelne mellem kræftpatienter og en rask befolkning ved forskellen i niveauet af specifikke autoantistoffer. I den raske population blev en baseline for mængden af ​​autoantistoffer bestemt, og patientpopulationen skulle have et statistisk signifikant højere niveau af autoantistoffer. Mange eksempler på denne metode kan findes i den videnskabelige litteratur [eksempelreferencer - Naora et.al. (2001); mintz et. Al. (2003); Korneeva et. Al (2000)]. Tilstedeværelsen af ​​autoantistoffer i alle populationer i forskellige niveauer gjorde det meget vanskeligt at finde disse specifikt diskriminerende antistoffer. Til dato skelner intet specifikt autoantistof udelukkende mellem raske og cancerpatienter (i modsætning til autoimmune sygdomme, hvor specifikke autoantistoffer kun kan findes i meget høje niveauer hos patienter).

Vores arbejde antager, at specifikke autoantistoffers ekspressionsniveau bør ændres i cancer, og derfor kan disse forskelle indikere tilstedeværelse/fravær af cancer.

I denne eksperimentprotokol tjekker vi for forskelle i ekspressionsniveauer af specifikke autoantistoffer af formodet brystpatologi.

Fremtidig CAAA-test Hensigt med brug - Identifikation af specifikke bryst-CAAA'er kan give klinikeren yderligere immunologiske og antigene oplysninger om patientens tilstand eller medicinske status.

Test hovedtrin og komponenter - CAAA-testen består af et blodopsamlings- og behandlingstrin efterfulgt af påvisning af specifikke autoantistoffer med et ELISA-baseret assay og en matematisk behandling med en efterfølgende klassificering af resultaterne som "positive" eller "negative" for brystkræft.

Undersøgelsespopulation:

Undersøgelsespopulationen omfatter alle kvinder, der er planlagt til en patologisk eller cytologisk bekræftelse enten ved en hvilken som helst form for biopsi eller cytologi forud for enhver anti-cancerbehandling. Den kliniske mistanke omfatter en af ​​følgende: positiv mammografi/US/MRI og formodet fysisk kontrol. Endelig verifikation ("sandt positivt" eller "sandt negativt") vil kun blive udført i relation til patologi/cytologi.

Emnevalg:

Den "sande positive" gruppe består af alle sekventielle patienter, der opfylder inklusionskriterier og har positive biopsiresultater. Den "sande negative" gruppe består af sekventielle patienter, der opfylder inklusionskriterier og har negative biopsiresultater.

Der skal indhentes skriftligt informeret samtykke, inden der tages en blodprøve fra patienten.

Denne undersøgelse vil være baseret på deltagelse af multicentre. Minimumsantallet af steder for undersøgelsen er 2.

Alle steder vil være inden for Hospitaler enten i kirurgiafdelingen eller den relevante specifikke enhed, som er ansvarlig for at yde pleje til BC-patienterne.

Den samme protokol og de samme overvågningsrutiner vil blive anvendt på alle steder. Alle CRF-data vil blive indsendt elektronisk via en dedikeret og sikret internetside, alle ændringer vil blive sporet. Når CAAA-testene udføres, vil laboratorie-/sponsorteamet ikke have nogen information om prøvens art. Denne patologiske information vil blive leveret til statistisk evaluering parallelt med CAAA-testen.

STUDERE DESIGN:

Overordnet beskrivelse - Det nuværende studie er et enkelt blindt case-kontrol valideringsstudie, der involverer alle på hinanden følgende brystkræftpersoner med positive biopsiresultater (sandt positive) og lige mange patienter med negative biopsiresultater (sandt negative). Formålet med undersøgelsen er at evaluere effektiviteten af ​​CAAA-testen.

Effektiviteten af ​​undersøgelsen er defineret som specificiteten af ​​CAAA-testen for en foruddefineret sensitivitet på 95 %.

Undersøgelsen vil evaluere følsomheden af ​​CAAA-testen for at vise, at den ikke er under det deklarerede niveau på 95 %.

Undersøgelsen vil evaluere specificiteten af ​​CAAA-testen i den nye undersøgelsespopulation.

Ifølge kendte resultater af PPV af mammografi i forskellige populationer antager vi, at undersøgelsespopulationen vil omfatte omkring 30% af sande positive cancertilfælde.

Fra i dag var en stor del af de mistænkte forsøgspersoner kun diagnosticeret ved endelig patologi af biopsien. I denne undersøgelse vil de sande positive og sande negative tilfælde (som verificeret ved biopsi) blive sammenlignet med CAAA-testresultaterne.

Studieprocedurer

På hospitalet:

Først skal en identificeret undersøgelsesperson underskrive en informeret samtykkeformular, og hendes berettigelsesformular udfyldt, begge skal være stregkodede.

Forsøgspersoners kliniske oplysninger, der er indhentet fra patientens medicinske journal, herunder alder, sygehistorie og resultater af tests udført, der fører til den diagnostiske evaluering af brystkræft, vil blive registreret på de passende, stregkodede, præ-studie case-rapportformularer. Rapporterne vil være elektroniske via en dedikeret og sikret internetside, eventuelle ændringer i databasen vil blive registreret og vil kunne spores. En papirkopi af journalerne vil blive opbevaret i afdelingen. Undersøgelsen er anonym, og afdelingen vil beholde navnet på patienten uden at afsløre det over for efterforskerne og undersøgelsens sponsor.

Lægen/sygeplejersken/ phlebotomist vil indsamle et heparin-vakuumrør (ca. 8 ml), mærke dem (stregkode). Røret med blodet vil blive pakket i en dobbelt forseglet beholder.

Blodet vil blive transporteret ved stuetemperatur (18-25°C), i henhold til de relevante regler, til laboratoriet. Transporttiden vil ikke være mere end 6 timer.

Blodhåndteringslaboratoriet vil indsamle serum i henhold til protokollen, og serumet vil blive holdt frosset ved -80 i korrekt mærkede portioner. De frosne prøver vil blive sendt til det diagnostiske laboratorium for antistoftests.

I det diagnostiske laboratorium vil ELISA-baserede tests til påvisning af autoantistoffers relative ekspressionsforhold blive udført på hver prøve i henhold til laboratorieprotokollen. Prøverne vil blive testet for antistofniveauer for de antigener, der er blevet identificeret på et tidligere træningssæt. Alle data vil blive permanent registreret direkte på en dedikeret computer. For hver prøve vil alle antistofresultater blive lagt ind i den kodede patientfil. En matematisk algoritme vil afgøre, om prøven er positiv eller negativ.

På hospitalet, efter biopsi:

2-3 uger efter biopsien vil CRO indsamle resultaterne fra patologilaboratoriet og enhver anden relevant information om arten af ​​den mistænkte masse fra patientens journal. Disse resultater vil blive registreret på den dedikerede og sikrede internetside, og en trykt stregkodet CRF vil blive opbevaret i afdelingen.

Hospitalet vil bevare skiver fra de formodede masser (enten fra biopsi eller kirurgi) til fremtidige immunhistokemiske eller andre undersøgelser, der skal udføres af sponsoren.

Den endelige patologi vil blive sammenlignet med CAAA-testresultaterne. Resultaterne vil blive analyseret af en statistiker med ekspertise i kræftpopulationsstudier.

Patienterne, der er inkluderet i denne undersøgelse, gennemgår blodprøver, og de eneste risici er dem, der involverer blodopsamling. Da behandlingen ikke er påvirket af resultaterne, er der ingen risici for de patienter, der deltager i undersøgelsen.

Da undersøgelsen udføres uden nogen forbindelse til den enkelte patient, er der ingen umiddelbar fordel af de yderligere test, der køres på blodprøven. Fremtidige fordele kan opnås ved udviklingen af ​​analysen.

Det nuværende studie er et blindt prospektivt valideringsstudie, der involverer alle på hinanden følgende mistænkte brystpatologiske forsøgspersoner, der er planlagt til biopsi i løbet af undersøgelsens varighed. Formålet med undersøgelsen er at vurdere sensitiviteten og specificiteten af ​​CAAA-testen til påvisning af brystkræft hos kvinder, der er planlagt til biopsi.

Forsøgspersoner vil blive screenet for potentiel deltagelse i undersøgelsen i henhold til inklusions- og eksklusionskriterierne.

Dataene vil omfatte parametre for forsøgspersonernes kliniske og patologiske tilstand og resultater af CAAA ELISA.

Der er to mål med undersøgelsen.

1. For at teste, at følsomheden af ​​CAAA ikke er under det foruddefinerede niveau.
2. For at evaluere specificiteten af ​​CAAA-testen. Statistisk hypotese Hovedbetingelsen for at bestemme prøvestørrelsen er at validere, at testens følsomhed ikke er lavere end det foruddefinerede niveau. Klassifikationsreglen blev etableret på den måde, at følsomheden i træningssættet var 100 %. Vi antager, at den reelle følsomhed ikke er lavere end 99%.

Nulhypotese: Testens følsomhed er ikke højere end 95 %. Alternativ hypotese: Testens følsomhed er ikke mindre end 99%. Datastyring Et databasestyringssystem skal designes og vedligeholdes, herunder skærmforberedelse og programmering af redigeringstjek. Kvalitetskontrol af de kliniske data før og efter indrejse skal udføres på hvert dataindtastningscenter. Alle ELISA-testresultater vil blive uploadet til databasen via en internetbaseret grænseflade og vil være låst mod yderligere ændringer. For at ændre ELISA-testresultater kræver oplåsning af databasen samtykke fra den lokale CRO, sponsoren og stedets læge. Oplåsning vil kun blive udført af webmasteren og vil blive optaget i sporingssystemkomponenten og i en papirkopi, som både sponsoren og CRO'en har på webstedet.