Test sanguin pour les anticorps automatiques associés au cancer du sein

Informations générales:

Étant donné que les mutations d'une cellule normale qui conduisent à une malignité impliquent des changements dans la structure et la fonction des cellules, on pourrait supposer que le système immunitaire a reconnu certains de ces changements comme des déterminants antigéniques auxquels il convient de répondre. Pendant de nombreuses années, les chercheurs ont tenté de faire la distinction entre les patients atteints de cancer et la population en bonne santé par la différence de niveau d'auto-anticorps spécifiques. Dans la population en bonne santé, une ligne de base de la quantité d'auto-anticorps a été déterminée, et la population de patients devait avoir un niveau statistiquement plus élevé d'auto-anticorps. De nombreux exemples de cette méthode peuvent être trouvés dans la littérature scientifique [exemples de références - Naora et.al. (2001); Mintz et. Al. (2003); Korneeva et. Al (2000)]. La présence d'auto-anticorps dans toutes les populations à différents niveaux a rendu très difficile la recherche de ces anticorps spécifiquement discriminants. À ce jour, aucun auto-anticorps spécifique ne fait la distinction uniquement entre les patients sains et les patients cancéreux (par opposition aux maladies auto-immunes, où des auto-anticorps spécifiques peuvent être trouvés à des niveaux très élevés chez les patients uniquement).

Notre travail suppose que le niveau d'expression des auto-anticorps spécifiques devrait être altéré dans le cancer, et donc ces différences peuvent indiquer la présence / l'absence de cancer.

Dans ce protocole d'expérience, nous vérifions les différences dans les niveaux d'expression d'auto-anticorps spécifiques d'une pathologie mammaire suspectée.

Futur test CAAA Utilisation prévue - L'identification de CAAA mammaires spécifiques pourrait fournir au clinicien des informations immunologiques et antigéniques supplémentaires concernant l'état ou l'état médical de la patiente.

Principales étapes et composants du test - Le test CAAA comprend une étape de collecte et de traitement du sang suivie d'une détection d'auto-anticorps spécifiques avec un test ELISA et un traitement mathématique, avec une classification ultérieure des résultats comme "positifs" ou "négatifs" pour le cancer du sein.

Population étudiée :

La population étudiée comprend toutes les femmes devant faire l'objet d'une confirmation pathologique ou cytologique soit par tout type de biopsie, soit par cytologie, avant tout traitement anticancéreux. La suspicion clinique comprend l'un des éléments suivants : mammographie/échographie/IRM positive et examen physique suspecté. La vérification finale (« vrai positif » ou « vrai négatif ») sera effectuée en relation avec la pathologie/cytologie uniquement.

Sélection du sujet :

Le groupe "vrais positifs" est composé de tous les patients séquentiels qui satisfont aux critères d'inclusion et ont des résultats de biopsie positifs. Le groupe "vrai négatif" est constitué de patients séquentiels qui satisfont aux critères d'inclusion et dont les résultats de biopsie sont négatifs.

Un consentement éclairé écrit doit être obtenu avant d'obtenir un échantillon de sang du patient.

Cette étude sera basée sur une participation multi-centres. Le nombre minimum de sites pour l'étude est de 2.

Tous les sites seront situés dans les hôpitaux, soit dans le service de chirurgie, soit dans l'unité spécifique concernée chargée de fournir des soins aux patients de la Colombie-Britannique.

Le même protocole et les mêmes routines de surveillance seront appliqués à tous les sites. Toutes les données du CRF seront soumises par voie électronique via un site Internet dédié et sécurisé, toutes les modifications seront suivies. Lors de l'exécution des tests CAAA, l'équipe du laboratoire/commanditaire n'aura aucune information concernant la nature de l'échantillon. Ces informations pathologiques seront fournies pour une évaluation statistique parallèlement au test CAAA.

ÉTUDIER LE DESIGN:

Description globale - L'étude actuelle est une étude de validation cas-témoins en simple aveugle, impliquant tous les sujets consécutifs atteints d'un cancer du sein ayant des résultats de biopsie positifs (vrais positifs) et un nombre égal de patientes avec des résultats de biopsie négatifs (vrais négatifs). Le but de l'étude est d'évaluer l'efficacité du test CAAA.

L'efficacité de l'étude est définie comme la spécificité du test CAAA pour une sensibilité prédéfinie de 95 %.

L'étude évaluera la sensibilité du test CAAA pour montrer qu'il n'est pas inférieur au niveau déclaré de 95%.

L'étude évaluera la spécificité du test CAAA dans la nouvelle population étudiée.

D'après les résultats connus de la VPP de la mammographie dans diverses populations, nous supposons que la population étudiée comprendra environ 30 % de vrais cas de cancer positifs.

À ce jour, une grande partie des sujets suspects n'a été diagnostiquée que par la pathologie finale de la biopsie. Dans cette étude, les cas vrais positifs et vrais négatifs (vérifiés par biopsie) seront comparés aux résultats du test CAAA.

Procédures d'étude

À l'hôpital:

Tout d'abord, un sujet d'étude identifié doit signer un formulaire de consentement éclairé et son formulaire d'éligibilité doit être rempli, les deux doivent porter un code à barres.

Les informations cliniques des sujets acquises à partir du dossier médical de la patiente, y compris l'âge, les antécédents médicaux et les résultats des tests effectués menant à l'évaluation diagnostique du cancer du sein, seront enregistrées sur les formulaires de rapport de cas pré-étude appropriés, à code-barres. Les rapports seront dématérialisés via un site internet dédié et sécurisé, toute modification de la base de données sera enregistrée et traçable. Une copie papier des dossiers sera conservée au département. L'étude est anonyme et le Département conservera le nom du patient sans le révéler aux investigateurs et au promoteur de l'étude.

Le médecin/l'infirmier/le phlébotomiste prélèvera un tube à vide d'héparine (environ 8 ml) et l'étiquetera (code-barres). Le tube avec le sang sera emballé dans un récipient à double étanchéité.

Le sang sera transporté à température ambiante (18-25°C), conformément à la réglementation en vigueur, jusqu'au laboratoire. Le temps de transport ne dépassera pas 6 heures.

Le laboratoire de manipulation du sang prélèvera le sérum conformément au protocole, et le sérum sera conservé congelé à -80, dans des aliquotes correctement étiquetées. Les échantillons congelés seront envoyés au laboratoire de diagnostic pour des tests d'anticorps.

Dans le laboratoire de diagnostic, des tests basés sur ELISA pour la détection des taux d'expression relatifs des auto-anticorps seront effectués sur chaque échantillon conformément au protocole de laboratoire. Les échantillons seront testés pour les niveaux d'anticorps pour les antigènes qui ont été identifiés lors d'un ensemble de formation précédent. Toutes les données seront enregistrées en permanence directement dans un ordinateur dédié. Pour chaque échantillon, tous les résultats d'anticorps seront mis dans le dossier patient codé. Un algorithme mathématique déterminera si l'échantillon est positif ou négatif.

À l'hôpital, post biopsie :

2 à 3 semaines après la biopsie, le CRO recueillera dans le dossier du patient les résultats du laboratoire de pathologie et toute autre information pertinente quant à la nature de la masse suspectée. Ces résultats seront enregistrés sur le site internet dédié et sécurisé et un CRF imprimé à code-barres sera conservé au Service.

L'hôpital conservera des tranches des masses suspectes (provenant soit d'une biopsie, soit d'une intervention chirurgicale) pour de futures études immuno-histochimiques ou autres à mener par le promoteur.

La pathologie finale sera comparée aux résultats du test CAAA. Les résultats seront analysés par un statisticien spécialisé dans les études de population sur le cancer.

Les patients inclus dans cette étude subissent des tests sanguins, et seuls les risques sont ceux liés à la collecte de sang. Comme le traitement n'est pas affecté par les résultats, aucun risque n'est soumis aux patients participant à l'étude.

Comme l'étude est menée sans lien avec le patient individuel, il n'y a aucun avantage immédiat tiré des tests supplémentaires effectués sur l'échantillon de sang. Des avantages futurs peuvent découler du développement de l'essai.

L'étude actuelle est une étude de validation prospective en aveugle, impliquant tous les sujets consécutifs suspects de pathologie mammaire devant subir une biopsie pendant la durée de l'étude. Le but de l'étude est d'évaluer la sensibilité et la spécificité du test CAAA pour la détection du cancer du sein chez les femmes devant subir une biopsie.

Les sujets seront sélectionnés pour une participation potentielle à l'étude, selon les critères d'inclusion et d'exclusion.

Les données comprendront les paramètres de l'état clinique et pathologique des sujets et les résultats de CAAA ELISA.

Il y a deux objectifs à l'étude.

1. Pour tester que la sensibilité de CAAA n'est pas inférieure au niveau prédéfini.
2. Évaluer la spécificité du test CAAA. Hypothèse statistique La condition principale déterminant la taille de l'échantillon est de valider que la sensibilité du test n'est pas inférieure au niveau prédéfini. La règle de classification a été établie de manière à ce que la sensibilité dans l'ensemble d'apprentissage soit de 100 %. Nous supposons que la sensibilité réelle n'est pas inférieure à 99 %.

Hypothèse nulle : La sensibilité du test n'est pas supérieure à 95 %. Hypothèse alternative : La sensibilité du test n'est pas inférieure à 99 %. Gestion des données Un système de gestion de base de données doit être conçu et maintenu, y compris la préparation de l'écran et la programmation de la vérification des modifications. Le contrôle de la qualité des données cliniques avant et après l'entrée doit être effectué dans chaque centre de saisie des données. Tous les résultats des tests ELISA seront téléchargés dans la base de données via une interface basée sur Internet et seront verrouillés contre d'autres modifications. Afin de modifier les résultats des tests ELISA, le déverrouillage de la base de données nécessite le consentement du CRO local, du sponsor et du médecin du site. Le déverrouillage sera effectué uniquement par le webmaster, et sera enregistré dans le composant du système de traçage, et dans une copie papier détenue à la fois par le parrain et le CRO dans le site.