Blodprøve for brystkreftassosierte autoantistoffer

Generell informasjon:

Siden mutasjonene i en normal celle som fører til en malignitet involverer endringer i strukturen og funksjonen til cellene, kan det antas at immunsystemet har gjenkjent noen av disse endringene som antigene determinanter som bør reageres mot. I mange år prøvde etterforskere å skille mellom kreftpasienter og friske populasjoner ved forskjellen i spesifikke autoantistoffnivåer. I den friske populasjonen ble en baseline av mengden autoantistoffer bestemt, og pasientpopulasjonen måtte ha et statistisk signifikant høyere nivå av autoantistoffer. Mange eksempler på denne metoden finnes i den vitenskapelige litteraturen [eksempelreferanser - Naora et.al. (2001); mintz et. Al. (2003); Korneeva et. Al (2000)]. Tilstedeværelsen av autoantistoffer i alle populasjoner i forskjellige nivåer gjorde det svært vanskelig å finne disse spesifikt diskriminerende antistoffene. Til dags dato skiller ingen spesifikke autoantistoffer kun mellom friske og kreftpasienter (i motsetning til autoimmune sykdommer, hvor spesifikke autoantistoffer kan finnes i svært høye nivåer kun hos pasienter).

Vårt arbeid antar at spesifikke autoantistoffer-ekspresjonsnivåer bør endres i kreft, og derfor kan disse forskjellene indikere tilstedeværelse/fravær av kreft.

I denne eksperimentprotokollen sjekker vi for forskjeller i ekspresjonsnivåer av spesifikke autoantistoffer av mistenkt brystpatologi.

Fremtidig CAAA-test Brukshensikt - Identifisering av spesifikke CAAA-er for bryst, kan gi klinikeren ytterligere immunologisk og antigeninformasjon om pasientens tilstand eller medisinske status.

Test hovedtrinn og komponenter - CAAA-testen består av et blodinnsamlings- og behandlingstrinn etterfulgt av påvisning av spesifikke autoantistoffer med en ELISA-basert analyse og en matematisk prosessering, med en påfølgende klassifisering av resultatene som "positive" eller "negative" for brystkreft.

Studiepopulasjon:

Studiepopulasjonen inkluderer alle kvinner som er planlagt for en patologisk eller cytologisk bekreftelse enten ved en hvilken som helst form for biopsi eller cytologi, før eventuell anti-kreftbehandling. Den kliniske mistanken inkluderer en av følgende: positiv mammografi/US/MR, og mistenkt fysisk sjekk. Endelig verifisering ("sann positiv" eller "sann negativ") vil kun gjøres i forhold til patologi/cytologi.

Emnevalg:

Den "sanne positive" gruppen består av alle sekvensielle pasienter som tilfredsstiller inklusjonskriterier og har positive biopsiresultater. Den "sann negative" gruppen består av sekvensielle pasienter som tilfredsstiller inklusjonskriterier og har negative biopsiresultater.

Skriftlig informert samtykke må innhentes før det tas blodprøve fra pasienten.

Denne studien vil være basert på deltakelse fra flere sentre. Minste antall nettsteder for studien er 2.

Alle lokalitetene vil være innenfor sykehus enten i kirurgisk avdeling eller den relevante spesifikke enheten som er ansvarlig for å gi omsorg til BC-pasientene.

Den samme protokollen og de samme overvåkingsrutinene vil bli brukt på alle lokalitetene. Alle CRF-data vil bli sendt elektronisk gjennom en dedikert og sikret internettside, alle endringer vil bli sporet. Når CAAA-testene utføres, vil laboratorie-/sponsorteamet ikke ha informasjon om prøvens art. Denne patologiske informasjonen vil bli gitt for statistisk evaluering parallelt med CAAA-testen.

STUDERE DESIGN:

Overordnet beskrivelse – Den nåværende studien er en enkelt blind case-control valideringsstudie, som involverer alle påfølgende brystkreftpersoner som har positive biopsiresultater (sann positive) og like mange pasienter med negative biopsiresultater (sant negative). Formålet med studien er å evaluere effektiviteten av CAAA-testen.

Effektiviteten til studien er definert som spesifisiteten til CAAA-testen for en forhåndsdefinert sensitivitet på 95 %.

Studien vil evaluere sensitiviteten til CAAA-testen for å vise at den ikke er under det deklarerte nivået på 95 %.

Studien vil evaluere spesifisiteten til CAAA-testen i den nye studiepopulasjonen.

I henhold til kjente resultater av PPV av mammografi i ulike populasjoner antar vi at studiepopulasjonen vil inkludere omtrent 30 % av sanne positive krefttilfeller.

Per i dag ble en stor del av de mistenkte forsøkspersonene kun diagnostisert ved endelig patologi av biopsien. I denne studien vil de sanne positive og sanne negative tilfellene (som bekreftet ved biopsi) bli sammenlignet med CAAA-testresultatene.

Studieprosedyrer

På sykehuset:

Først må et identifisert studieobjekt signere et informert samtykkeskjema, og kvalifikasjonsskjemaet fylt ut, begge skal være strekkodet.

Forsøkspersonens kliniske informasjon innhentet fra pasientens medisinske journal, inkludert alder, sykehistorie og resultater av tester utført som fører til diagnostisk evaluering av brystkreft, vil bli registrert på passende strekkodede skjemaer for kasusrapporter før studien. Rapportene vil være elektroniske via en dedikert og sikret internettside, eventuelle endringer i databasen vil bli registrert og sporbare. En papirkopi av journalene vil bli oppbevart i avdelingen. Studien er anonym, og avdelingen vil beholde navnet til pasienten uten å avsløre det for etterforskerne og studiesponsoren.

Legen/sykepleieren/flebotomisten vil samle et heparinvakuumrør (ca. 8 ml), merke dem (strekkode). Røret med blodet vil bli pakket i en dobbel forseglet beholder.

Blodet vil bli transportert ved romtemperatur (18-25°C), i henhold til gjeldende forskrifter, til laboratoriet. Transporttiden vil ikke være mer enn 6 timer.

Blodhåndteringslaboratoriet vil samle serum i henhold til protokollen, og serumet vil bli oppbevart frosset ved -80, i riktig merkede alikvoter. De frosne prøvene vil bli sendt til diagnoselaboratoriet for antistofftester.

I det diagnostiske laboratoriet vil ELISA-baserte tester for påvisning av autoantistoffers relative ekspresjonsforhold bli utført på hver prøve i henhold til laboratorieprotokollen. Prøvene vil bli testet for antistoffnivåer for antigenene som er identifisert på et tidligere treningssett. Alle data vil bli permanent registrert direkte på en dedikert datamaskin. For hver prøve vil alle antistoffresultater bli lagt inn i den kodede pasientfilen. En matematisk algoritme vil avgjøre om prøven er positiv eller negativ.

På sykehuset, post biopsi:

2-3 uker etter biopsien vil CRO samle resultatene fra patologilaboratoriet og all annen relevant informasjon om arten av den mistenkte massen fra pasientens fil. Disse resultatene vil bli registrert på den dedikerte og sikrede internettsiden, og en trykt strekkodet CRF vil bli oppbevart i avdelingen.

Sykehuset vil bevare skiver fra de mistenkte massene (enten fra biopsi eller kirurgi) for fremtidige immunhistokjemiske eller andre studier som skal utføres av sponsoren.

Den endelige patologien vil bli sammenlignet med CAAA-testresultatene. Resultatene vil bli analysert av en statistiker med ekspertise på kreftpopulasjonsstudier.

Pasientene som er inkludert i denne studien gjennomgår blodprøver, og eneste risiko er de som involverer blodinnsamling. Siden behandlingen ikke påvirkes av resultatene, er ingen risiko utsatt for pasientene som deltar i studien.

Ettersom studien utføres uten kobling til den enkelte pasient, er det ingen umiddelbar fordel av de ekstra testene som kjøres på blodprøven. Fremtidig fordel kan hentes fra utviklingen av analysen.

Den nåværende studien er en blind prospektiv valideringsstudie, som involverer alle påfølgende mistenkte brystpatologi-personer som planlegges for biopsi i løpet av studiens varighet. Formålet med studien er å vurdere sensitiviteten og spesifisiteten til CAAA-testen for påvisning av brystkreft hos kvinner som er planlagt for biopsi.

Forsøkspersoner vil bli screenet for potensiell deltakelse i studien, i henhold til inklusjons- og eksklusjonskriteriene.

Dataene vil inkludere parametere for den kliniske og patologiske tilstanden til forsøkspersonene og resultater av CAAA ELISA.

Det er to mål med studien.

1. For å teste at sensitiviteten til CAAA ikke er under det forhåndsdefinerte nivået.
2. For å evaluere spesifisiteten til CAAA-testen. Statistisk hypotese Hovedbetingelsen for å bestemme prøvestørrelsen er å validere at sensitiviteten til testen ikke er lavere enn det forhåndsdefinerte nivået. Klassifiseringsregelen ble etablert på en slik måte at sensitiviteten i treningssettet var 100 %. Vi antar at den reelle sensitiviteten ikke er lavere enn 99 %.

Nullhypotese: Testens følsomhet er ikke høyere enn 95 %. Alternativ hypotese: Testens sensitivitet er ikke mindre enn 99 %. Databehandling Et databasestyringssystem skal utformes og vedlikeholdes, inkludert skjermforberedelse og programmering av redigeringssjekker. Kvalitetskontroll før og etter oppføring av de kliniske dataene skal utføres ved hvert datasenter. Alle ELISA-testresultater vil bli lastet opp til databasen via et internettbasert grensesnitt, og vil være låst mot ytterligere endringer. For å endre ELISA-testresultater krever opplåsing av databasen samtykke fra den lokale CRO, sponsoren og stedets lege. Opplåsing vil kun gjøres av nettredaktøren, og vil registreres i sporingssystemkomponenten, og i en papirkopi som holdes både av sponsoren og CRO på siden.