Postmenopausaalinen kasvojen iho estradioli- ja genisteiinihoidon jälkeen

Postmenopausaalisia vapaaehtoisia rekrytoitiin Brasiliassa São Paulon liittovaltion yliopiston (UNIFESP) gynekologian osaston endokrinologisesta gynekologiaosastosta. Kaikki naiset osallistuivat tähän prospektiiviseen, satunnaistettuun, kaksoissokkoutettuun ja estrogeenikontrolloituun tutkimukseen, jonka paikallinen etiikka- ja tutkimuskomitea hyväksyi (raportti nro 386/2004). Kaikkien aiheiden arviointi koostui yksityiskohtaisesta historiasta, fyysisestä kokeesta ja laboratoriotutkimuksesta. UNIFESP School of Medicine Human Investigation Committeen hyväksymä tutkimusprotokolla, ja jokaisen osallistujan oli annettava kirjallinen tietoinen suostumus ennen ilmoittautumista.

Interventio Riippumattomat apteekkarit jakoivat joko isoflavoni- tai estrogeenisäiliöitä tietokoneella laaditun satunnaisluettelon mukaan. Säiliöt sekä hoitopurkki olivat ulkonäöltään ja väriltään identtisiä. Tutkijat olivat vastuussa siitä, että naiset saivat seuraavan käytettävissä olevan numeron tutkimukseen tullessa, ja jokainen nainen keräsi säiliönsä suoraan apteekista. Koodi paljastettiin tutkijoille, kun rekrytointi, tiedonkeruu ja histologiset analyysit olivat valmiit. Jos terveysongelmia ilmeni, riippumaton lääkäri, joka oli sokeutunut potilaan hoitoryhmään, tutki hänet. Tarvittaessa tämä lääkäri määräsi laboratoriotutkimuksia vakavien systeemisten sivuvaikutusten poissulkemiseksi. Numero kaksi lyöntibiopsiaa kasvojen ihosta preauricular-alueelta tehtiin ennen ja jälkeen 24 viikon geelihoidon. Naiset levittivät geeliä kasvojen iholleen päivittäin iltaisin, ja aamulla he käyttivät vain geelimäistä aurinkovoidetta. Heitä kehotettiin olemaan käyttämättä muita voiteita. Mahdollisten systeemisten hormonaalisten vaikutusten arvioimiseksi otettiin hormonaaliset emättimen sytologiset näytteet kaikilla käynneillä (perustilanteessa ja 6, 12, 18 ja 24 viikon hoidon jälkeen) ja estradioliverinäytteitä ennen ja jälkeen hoidon.

Ryhmät Osallistujat kulkivat tutkimuksen jokaisen vaiheen läpi. Tutkimuksen päätyttyä etiketti avattiin ja saman numeron omaavat hoitoryhmät luokiteltiin. Kuhunkin tutkimusryhmään vaadittiin 15 potilasta: ryhmä E, jota käsiteltiin geelillä, jossa oli 0,01 % 17-β-estradiolia (n = 15), ja ryhmä G, jota hoidettiin geelillä, jossa oli isoflavoneja (genisteiini 4 %) (n = 15).

Materiaalin käsittely Keräyksen jälkeen biopsiat kiinnitettiin välittömästi 24 tunnin ajan 10-prosenttisessa formaldehydiliuoksessa ja prosessoitiin sitten parafiiniin dehydraation avulla etanolissa kasvavissa pitoisuuksissa, diafanisoinnilla ksylolissa ja kyllästämällä nestemäisellä parafiinilla kuivausuunissa, jonka lämpötila oli asetettu 60 °C (Michalanyn suosittelema menetelmä, 1998). Parafiinilohkoille tehtiin 3 μm:n leikkaukset Minot-mikrotomilla. Immunohistokemian leikkaukset asetettiin levyille, jotka oli aiemmin käsitelty silaanilla 5 %:iin ja tuotiin uuniin 37 °C:seen 24 tunniksi kuivumaan. Lisäksi leikkeitä tehtiin 20 μm:stä ja ne asetettiin 2 ml:n putkiin biokemiallista käsittelyä varten.