Piel facial posmenopáusica después del tratamiento tópico con estradiol y genisteína

Voluntarias posmenopáusicas fueron reclutadas en Brasil de la División de Ginecología Endocrinológica del Departamento de Ginecología de la Universidad Federal de São Paulo (UNIFESP). Todas las mujeres participaron en este estudio prospectivo, aleatorizado, doble ciego y controlado con estrógenos y aprobado por el Comité de Ética e Investigación local (Informe No 386/2004). La evaluación de todos los sujetos consistió en una historia detallada, un examen físico y un estudio de laboratorio. El protocolo del estudio fue aprobado por el Comité de Investigación Humana de la Facultad de Medicina de la UNIFESP y todos los participantes debían dar su consentimiento informado por escrito antes de la inscripción.

Intervención Farmacéuticos independientes dispensaron envases de isoflavonas o estrógenos de acuerdo con una lista aleatoria generada por computadora. Los envases, así como un tarro para tratamientos, tenían idéntico aspecto y color. Los investigadores fueron responsables de ver que a las mujeres se les asignara el siguiente número disponible al ingresar al ensayo, y cada mujer recogió sus envases directamente del departamento de farmacia. El código se reveló a los investigadores una vez que se completaron el reclutamiento, la recopilación de datos y los análisis histológicos. Si ocurría un problema de salud, un médico independiente que desconocía el grupo de tratamiento de la paciente la examinaba. Si es necesario, este médico prescribió exámenes de laboratorio para descartar cualquier efecto secundario sistémico grave. Se realizó una biopsia con sacabocados número dos de la piel facial del área preauricular antes y después del tratamiento con gel de 24 semanas. Las mujeres se aplicaron el gel en la piel de la cara todos los días por la noche y por la mañana usaron solo un protector solar en gel. Se les aconsejó que no usaran ninguna otra crema. Para evaluar los posibles efectos hormonales sistémicos, se tomaron muestras de citología vaginal hormonal en todas las visitas (al inicio y después de 6, 12, 18 y 24 semanas de tratamiento) y muestras de sangre con estradiol antes y después del tratamiento.

Grupos Los participantes fluyeron a través de cada etapa del estudio. Después del final del estudio, se abrió la etiqueta y se clasificaron los grupos de tratamiento con el mismo número. Se requirieron quince pacientes para cada grupo de estudio: grupo E, tratado con gel con 17-β estradiol 0,01% (n = 15), y grupo G, tratado con gel con isoflavonas (genisteína 4%) (n = 15).

Procesamiento del material Luego de la recolección, las biopsias fueron inmediatamente fijadas por 24 horas en solución de formaldehído al 10% y luego procesadas para parafina vía deshidratación en etanol en concentraciones crecientes, diafanización en xilol e impregnación por parafina líquida en estufa de secado a temperatura de 60 °C (metodología recomendada por Michalany, 1998). Los bloques de parafina se sometieron a cortes de 3 μm con un micrótomo Minot. Los cortes para inmunohistoquímica se colocaron en portaobjetos previamente tratados con silano al 5 % y se llevaron a estufa a 37 °C durante 24 horas para su secado. Adicionalmente, se realizaron cortes de 20 μm y se colocaron en tubos de 2ml para el procesamiento bioquímico.