Postmenopauzale gezichtshuid na lokale behandeling met oestradiol en genisteïne

Postmenopauzale vrijwilligers werden in Brazilië geworven bij de afdeling Endocrinologische Gynaecologie van de afdeling Gynaecologie van de Federale Universiteit van São Paulo (UNIFESP). Alle vrouwen namen deel aan deze prospectieve, gerandomiseerde, dubbelblinde en oestrogeen-gecontroleerde studie en goedgekeurd door de lokale ethische en onderzoekscommissie (rapport nr. 386/2004). De evaluatie van alle proefpersonen bestond uit een gedetailleerde geschiedenis, een lichamelijk onderzoek en een laboratoriumonderzoek. Het studieprotocol werd goedgekeurd door de UNIFESP School of Medicine Human Investigation Committee en elke deelnemer moest vóór inschrijving schriftelijke geïnformeerde toestemming geven.

Interventie Onafhankelijke apothekers verstrekten isoflavonen of oestrogeencontainers volgens een door de computer gegenereerde randomisatielijst. De containers, evenals een pot voor behandelingen, hadden een identiek uiterlijk en dezelfde kleur. De onderzoekers waren verantwoordelijk voor het zien van de vrouwen die het volgende beschikbare nummer toegewezen kregen bij binnenkomst in de proef, en elke vrouw haalde haar containers rechtstreeks op bij de apotheekafdeling. De code werd aan de onderzoekers onthuld zodra de werving, gegevensverzameling en histologische analyses voltooid waren. Als zich een gezondheidsprobleem voordeed, onderzocht een onafhankelijke arts die blind was voor de behandelgroep van de patiënte haar. Indien nodig schreef deze arts laboratoriumonderzoeken voor om ernstige systemische bijwerkingen uit te sluiten. Voor en na de gelbehandeling van 24 weken werd een nummer twee biopsie van de gezichtshuid uit het preauriculaire gebied uitgevoerd. De vrouwen brachten de gel 's nachts dagelijks op hun gezichtshuid aan en' s ochtends gebruikten ze alleen een gel-zonnebrandcrème. Ze kregen het advies om geen andere crème te gebruiken. Om mogelijke systemische hormonale effecten te beoordelen, werden bij alle bezoeken hormonale vaginale cytologiemonsters genomen (basislijn en na 6, 12, 18 en 24 weken behandeling) en oestradiolbloedmonsters voor en na de behandeling.

Groepen De deelnemers stroomden door elke fase van het onderzoek. Na het einde van de studie werd het etiket geopend en werden de behandelingsgroepen met hetzelfde nummer geclassificeerd. Voor elke onderzoeksgroep waren vijftien patiënten nodig: groep E, behandeld met een gel met 17-β-oestradiol 0,01% (n = 15), en groep G, behandeld met een gel met isoflavonen (genisteïne 4%) (n = 15).

Verwerking van het materiaal Na afname werden de biopten direct 24 uur gefixeerd in 10% formaldehyde-oplossing en vervolgens verwerkt tot paraffine via dehydratatie in ethanol in toenemende concentraties, diafanisatie in xylol en impregnatie met vloeibare paraffine in een droogoven ingesteld op een temperatuur van 60 °C (methodologie aanbevolen door Michalany, 1998). De paraffineblokken werden onderworpen aan sneden van 3 μm met een Minot-microtoom. De sneden voor immunohistochemie werden op objectglaasjes geplaatst die eerder waren behandeld met silaan tot 5% en gedurende 24 uur in een oven bij 37 °C gebracht om te drogen. Daarnaast werden secties gemaakt van 20 μm en in buisjes van 2 ml geplaatst voor de biochemische verwerking.