Pele facial pós-menopausa após tratamento tópico com estradiol e genisteína

Voluntárias na pós-menopausa foram recrutadas no Brasil na Divisão de Ginecologia Endocrinológica do Departamento de Ginecologia da Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Todas as mulheres participaram deste estudo prospectivo, randomizado, duplo-cego e controlado por estrogênio e aprovado pelo Comitê de Ética e Pesquisa local (Parecer nº 386/2004). A avaliação de todos os indivíduos consistiu em uma história detalhada, um exame físico e um trabalho laboratorial. O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Investigação Humana da Faculdade de Medicina da UNIFESP, e todos os participantes tiveram que fornecer consentimento informado por escrito antes da inscrição.

Farmacêuticos independentes de intervenção dispensaram recipientes de isoflavona ou estrogênio de acordo com uma lista de randomização gerada por computador. Os recipientes, assim como um frasco para tratamentos, tinham aparência e cor idênticas. Os pesquisadores eram responsáveis ​​por ver as mulheres alocadas no próximo número disponível na entrada no estudo, e cada mulher recolhia seus recipientes diretamente do departamento de farmácia. O código foi revelado aos pesquisadores assim que o recrutamento, a coleta de dados e as análises histológicas foram concluídos. Se ocorresse um problema de saúde, um médico independente que desconhecia o grupo de tratamento do paciente a examinava. Se necessário, este médico prescrevia exames laboratoriais para exclusão de efeitos colaterais sistêmicos graves. Uma segunda biópsia por punção da pele facial da área pré-auricular foi realizada antes e após o tratamento com gel de 24 semanas. As mulheres aplicaram o gel na pele do rosto diariamente à noite e, pela manhã, usaram apenas protetor solar em gel. Eles foram aconselhados a não usar qualquer outro creme. Para avaliar possíveis efeitos hormonais sistêmicos, amostras de citologia vaginal hormonal foram coletadas em todas as visitas (basal e após 6, 12, 18 e 24 semanas de tratamento) e amostras de sangue com estradiol antes e depois do tratamento.

Grupos Os participantes passaram por cada etapa do estudo. Após o término do estudo, o rótulo foi aberto e os grupos de tratamento com o mesmo número foram classificados. Quinze pacientes foram necessárias para cada grupo de estudo: grupo E, tratado com gel de 17-β estradiol 0,01% (n = 15) e grupo G, tratado com gel de isoflavonas (genisteína 4%) (n = 15).

Processamento do material Após a coleta, as biópsias foram imediatamente fixadas por 24 horas em solução de formol a 10% e posteriormente processadas para parafina via desidratação em etanol em concentrações crescentes, diafanização em xilol e impregnação em parafina líquida em estufa de secagem regulada para temperatura de 60 °C (metodologia recomendada por Michalany, 1998). Os blocos de parafina foram submetidos a cortes de 3 μm com micrótomo Minot. Os cortes para imunohistoquímica foram colocados em lâminas previamente tratadas com silano a 5% e levados à estufa a 37°C por 24 horas para secagem. Adicionalmente, foram feitos cortes de 20 μm e colocados em tubos de 2ml para o processamento bioquímico.