Postmenopausal ansiktshud etter lokalbehandling med østradiol og genistein

Frivillige etter overgangsalderen ble rekruttert i Brasil fra endokrinologisk gynekologiavdeling ved gynekologiavdelingen ved Federal University of São Paulo (UNIFESP). Alle kvinner deltok i denne prospektive, randomiserte, dobbeltblinde og østrogenkontrollerte studien og godkjent av den lokale etikk- og forskningskomiteen (Rapport nr. 386/2004). Evalueringen av alle fagene besto av en detaljert historie, en fysisk undersøkelse og en laboratoriearbeid. Studieprotokollen ble godkjent av UNIFESP School of Medicine Human Investigation Committee, og hver deltaker måtte gi skriftlig informert samtykke før påmelding.

Intervensjon Uavhengige farmasøyter dispenserte enten isoflavon- eller østrogenbeholdere i henhold til en datamaskingenerert randomiseringsliste. Beholderne, samt en krukke for behandlinger, hadde identisk utseende og farge. Forskerne var ansvarlige for å se at kvinnene ble tildelt neste ledige nummer ved inntreden i forsøket, og hver kvinne hentet beholderne sine direkte fra apotekavdelingen. Koden ble avslørt for forskerne når rekruttering, datainnsamling og histologiske analyser var fullført. Hvis det oppsto et helseproblem, undersøkte en uavhengig lege som var blindet for pasientens behandlingsgruppe henne. Om nødvendig foreskrev denne legen laboratorieundersøkelser for utelukkelse av alvorlige systemiske bivirkninger. En nummer to punch-biopsi av ansiktshud fra det preaurikulære området ble utført før og etter den 24 uker lange gelbehandlingen. Kvinnene brukte gelen på ansiktshuden daglig om natten, og om morgenen brukte de kun en gelsolkrem. De ble anbefalt å ikke bruke annen krem. For å vurdere mulige systemiske hormonelle effekter ble det tatt hormonelle vaginale cytologiprøver ved alle besøk (baseline og etter 6, 12, 18 og 24 ukers behandling) og østradiol blodprøver før og etter behandlingen.

Grupper Deltakerne strømmet gjennom hvert trinn av studien. Etter endt studie ble etiketten åpnet, og behandlingsgruppene med samme nummer ble klassifisert. Femten pasienter var nødvendig for hver studiegruppe: gruppe E, behandlet med en gel med 17-β østradiol 0,01 % (n = 15), og gruppe G, behandlet med en gel med isoflavoner (genistein 4%) (n = 15).

Bearbeiding av materialet Etter innsamlingen ble biopsiene umiddelbart fiksert i 24 timer i 10 % formaldehydløsning og deretter bearbeidet for parafin via dehydrering i etanol i økende konsentrasjoner, diafanisering i xylol og impregnering med flytende parafin i tørkeovn satt til en temperatur på ca. 60 °C (metodikk anbefalt av Michalany, 1998). Parafinblokkene ble underkastet kutt på 3 μm med en Minot-mikrotom. Kuttene for immunhistokjemi ble plassert på objektglass som tidligere var behandlet med silan til 5 % og brakt til ovn ved 37 °C i 24 timer for tørking. I tillegg ble seksjoner laget av 20 μm og plassert i rør på 2 ml for biokjemisk prosessering.