Кожа лица в постменопаузе после местного лечения эстрадиолом и генистеином

Добровольцы в постменопаузе были набраны в Бразилии из отдела эндокринологической гинекологии отделения гинекологии Федерального университета Сан-Паулу (UNIFESP). Все женщины участвовали в этом проспективном рандомизированном двойном слепом эстроген-контролируемом исследовании, одобренном местным комитетом по этике и исследованиям (отчет № 386/2004). Оценка всех субъектов состояла из подробного анамнеза, физического осмотра и лабораторного исследования. Протокол исследования был одобрен Исследовательским комитетом Медицинской школы UNIFESP, и каждый участник должен был дать письменное информированное согласие перед включением в исследование.

Вмешательство Независимые фармацевты выдавали контейнеры с изофлавонами или эстрогенами в соответствии с составленным компьютером списком рандомизации. Контейнеры, как и баночка для обработок, имели идентичный вид и цвет. Исследователи отвечали за то, чтобы женщины получали следующий доступный номер при входе в испытание, и каждая женщина забирала свои контейнеры непосредственно из аптечного отдела. Код был раскрыт исследователям после завершения рекрутинга, сбора данных и гистологического анализа. Если возникала проблема со здоровьем, ее осматривал независимый врач, который не знал о группе лечения пациентки. При необходимости этот врач назначал лабораторные исследования для исключения каких-либо серьезных системных побочных эффектов. До и после 24-недельного лечения гелем была проведена биопсия кожи лица из преаурикулярной области номер два. Женщины ежедневно наносили гель на кожу лица на ночь, а утром использовали только гель-солнцезащитный крем. Им посоветовали не использовать какой-либо другой крем. Для оценки возможных системных гормональных эффектов во время всех посещений (исходно и через 6, 12, 18 и 24 недели лечения) брали образцы гормональной вагинальной цитологии и образцы крови на эстрадиол до и после лечения.

Группы Участники прошли каждый этап исследования. После окончания исследования этикетку открывали и классифицировали группы лечения с одинаковыми номерами. Для каждой группы исследования требовалось по 15 пациентов: группа Е, получавшая гель с 17-β-эстрадиолом 0,01% (n = 15), и группа G, получавшая гель с изофлавонами (генистеин 4%) (n = 15).

Обработка материала После забора биоптаты немедленно фиксировали в течение 24 часов в 10% растворе формальдегида, а затем перерабатывали в парафин путем обезвоживания в этаноле возрастающей концентрации, диафанизации в ксилоле и пропитки жидким парафином в сушильном шкафу при температуре 60 °C (методология, рекомендованная Michalany, 1998). Парафиновые блоки подвергали разрезам размером 3 мкм с помощью микротома Майнота. Срезы для иммуногистохимии помещали на предметные стекла, предварительно обработанные силаном до 5 %, и помещали в печь при 37 °С на 24 часа для сушки. Дополнительно изготавливали срезы по 20 мкм и помещали в пробирки по 2 мл для биохимической обработки.