Peau du visage post-ménopausique après traitement topique à l'estradiol et à la génistéine

Des volontaires ménopausées ont été recrutées au Brésil dans la Division d'endocrinologie et de gynécologie du Département de gynécologie de l'Université fédérale de São Paulo (UNIFESP). Toutes les femmes ont participé à cette étude prospective, randomisée, en double aveugle et contrôlée par les œstrogènes et approuvée par le comité d'éthique et de recherche local (rapport n° 386/2004). L'évaluation de tous les sujets consistait en une anamnèse détaillée, un examen physique et un bilan de laboratoire. Le protocole de l'étude a été approuvé par le comité d'investigation humaine de l'École de médecine de l'UNIFESP, et chaque participant devait fournir un consentement éclairé écrit avant l'inscription.

Intervention Des pharmaciens indépendants ont distribué des contenants d'isoflavones ou d'œstrogènes selon une liste de randomisation générée par ordinateur. Les contenants, ainsi qu'un pot pour les traitements, avaient un aspect et une couleur identiques. Les chercheurs étaient chargés de voir les femmes attribuer le prochain numéro disponible à l'entrée dans l'essai, et chaque femme récupérait ses contenants directement auprès du service de pharmacie. Le code a été révélé aux chercheurs une fois le recrutement, la collecte de données et les analyses histologiques terminés. Si un problème de santé survenait, un médecin indépendant qui ne connaissait pas le groupe de traitement de la patiente l'examinait. Si nécessaire, ce médecin prescrivait des examens de laboratoire pour exclure tout effet secondaire systémique grave. Une biopsie à l'emporte-pièce numéro deux de la peau du visage de la zone préauriculaire a été réalisée avant et après le traitement au gel de 24 semaines. Les femmes ont appliqué le gel sur la peau de leur visage tous les jours la nuit et le matin, elles n'ont utilisé qu'un écran solaire en gel. Il leur a été conseillé de ne pas utiliser d'autre crème. Pour évaluer d'éventuels effets hormonaux systémiques, des échantillons de cytologie vaginale hormonale ont été prélevés à toutes les visites (au départ et après 6, 12, 18 et 24 semaines de traitement) et des échantillons de sang d'œstradiol avant et après le traitement.

Groupes Les participants ont traversé chaque étape de l'étude. Après la fin de l'étude, l'étiquette a été ouverte et les groupes de traitement portant le même numéro ont été classés. Quinze patientes étaient nécessaires pour chaque groupe d'étude : groupe E, traité avec un gel au 17-β estradiol 0,01 % (n = 15), et groupe G, traité avec un gel aux isoflavones (génistéine 4 %) (n = 15).

Traitement du matériel Après le prélèvement, les biopsies ont été immédiatement fixées pendant 24 heures dans une solution de formaldéhyde à 10 % puis traitées à la paraffine par déshydratation dans l'éthanol à des concentrations croissantes, diaphanisation dans le xylol et imprégnation par la paraffine liquide dans une étuve réglée à une température de 60 °C (méthodologie recommandée par Michalany, 1998). Les blocs de paraffine ont été soumis à des coupes de 3 µm au microtome Minot. Les coupes pour l'immunohistochimie ont été placées sur des lames préalablement traitées au silane à 5 % et portées à l'étuve à 37 °C pendant 24 heures pour séchage. De plus, des sections ont été faites de 20 μm et placées dans des tubes de 2 ml pour le traitement biochimique.