Pelle del viso in postmenopausa dopo trattamento topico con estradiolo e genisteina

I volontari in postmenopausa sono stati reclutati in Brasile dalla Divisione di Ginecologia Endocrinologica del Dipartimento di Ginecologia dell'Università Federale di San Paolo (UNIFESP). Tutte le donne hanno partecipato a questo studio prospettico, randomizzato, in doppio cieco e controllato con estrogeni e approvato dal comitato etico e di ricerca locale (rapporto n. 386/2004). La valutazione di tutti i soggetti consisteva in un'anamnesi dettagliata, un esame fisico e un lavoro di laboratorio. Il protocollo dello studio è stato approvato dal Comitato di Investigazione Umana della Scuola di Medicina dell'UNIFESP e ogni partecipante ha dovuto fornire un consenso informato scritto prima dell'arruolamento.

Intervento Farmacisti indipendenti dispensavano contenitori di isoflavoni o di estrogeni secondo un elenco di randomizzazione generato dal computer. I contenitori, così come un barattolo per i trattamenti, avevano aspetto e colore identici. I ricercatori erano responsabili di vedere le donne assegnate al prossimo numero disponibile all'ingresso nella sperimentazione e ogni donna ritirava i suoi contenitori direttamente dal reparto farmacia. Il codice è stato rivelato ai ricercatori una volta completato il reclutamento, la raccolta dei dati e le analisi istologiche. Se si verificava un problema di salute, un medico indipendente che non conosceva il gruppo di trattamento della paziente la esaminava. Se necessario, questo medico ha prescritto esami di laboratorio per escludere qualsiasi grave effetto collaterale sistemico. Prima e dopo il trattamento con gel di 24 settimane è stata eseguita una biopsia numero due della pelle del viso dall'area preauricolare. Le donne applicavano il gel sulla pelle del viso ogni giorno di notte e al mattino usavano solo una crema solare in gel. È stato consigliato loro di non usare nessun'altra crema. Per valutare i possibili effetti ormonali sistemici, sono stati prelevati campioni di citologia vaginale ormonale a tutte le visite (basale e dopo 6, 12, 18 e 24 settimane di trattamento) e campioni di sangue di estradiolo prima e dopo il trattamento.

Gruppi I partecipanti sono passati attraverso ogni fase dello studio. Dopo la fine dello studio, l'etichetta è stata aperta e sono stati classificati i gruppi di trattamento con lo stesso numero. Sono stati richiesti quindici pazienti per ogni gruppo di studio: gruppo E, trattato con un gel con 17-β estradiolo 0,01% (n = 15), e gruppo G, trattato con un gel con isoflavoni (genisteina 4%) (n = 15).

Processazione del materiale Dopo il prelievo, le biopsie sono state immediatamente fissate per 24 ore in soluzione di formaldeide al 10% e quindi trattate per la paraffina mediante disidratazione in etanolo a concentrazioni crescenti, diafanizzazione in xilolo e impregnazione con paraffina liquida in forno di essiccazione posto alla temperatura di 60 °C (metodo raccomandato da Michalany, 1998). I blocchi di paraffina sono stati sottoposti a tagli di 3 μm con un microtomo Minot. I tagli per immunoistochimica sono stati posti su vetrini precedentemente trattati con silano al 5% e portati in stufa a 37°C per 24 ore per l'essiccamento. Inoltre, le sezioni sono state realizzate da 20 μm e poste in provette da 2 ml per l'elaborazione biochimica.