CENV3-rokotteen turvallisuus- ja tehokkuustutkimus HCV-infektiota vastaan (CENV3)

Tässä työssä aiomme tutkia Cenv3-nimisen peptidirokotteen turvallisuutta ja tehokkuutta (C HCV:lle, en envelopille, v rokotteelle, 3 3 epitoopille). Tämän tutkimuksen pääpiirteitä ovat: 1) Turvallisuusparametrien tutkiminen koko rokotusjakson ajan, mukaan lukien akuutit ja krooniset reaktiot, jos niitä esiintyy vaiheen 1 kliinisessä tutkimuksessa (eli terveillä vapaaehtoisilla). Rokote annetaan ihonalaisesti 3 nousevana annoksena adjuvantin läsnä ollessa tai ilman. Myös rokotteen hyötyosuus koko kokeen keston ajan määritetään. 2) Terveiden vapaaehtoisten humoraalisten ja solujen immuunivasteiden arviointi Cenv3:a vastaan ​​(suurempi riski saada HCV-infektio). 3) Arvio syntyneiden Abs:n neutraloivasta kapasiteetista häiritä HCV:n solunsisäistä replikaatiota sallivissa solulinjoissa

ii) Tavoite Tämän ehdotuksen tavoitteena on:

1. HCV-peptidiehdokasrokotteen turvallisuuden ja siedettävyyden tutkiminen terveillä vapaaehtoisilla.
2. Soluvälitteisen immuniteetin testaus sytotoksisten T-lymfosyyttivasteiden kautta rokotetuilla terveillä henkilöillä (CMI).
3. Epitooppispesifisen B-soluvasteen ja vasta-ainetiitterien määrittäminen rokotetuilla yksilöillä (humoraalinen immunogeenisyys).
4. Testataan viruksen neutralisaatiota vasta-aineilla rokoteepitooppeja vastaan. (Tehokkuus).
5. Peptidien biologisen hyötyosuuden tutkiminen koehenkilöiden verenkierrossa koko rokotusajan ja 90 päivää rokotuksen jälkeen.

iii) Tutkimuspopulaatio

Koehenkilöt, joilla on sydän- ja verisuoniongelmia, astma tai allergioita, tulee sulkea pois tutkimuksesta. Myös kaikki tutkittavat, jotka ovat osallistuneet mihin tahansa kokeelliseen lääketieteelliseen kliiniseen tutkimukseen viimeisen kolmen kuukauden aikana, suljetaan pois. Mukaan otetaan terveitä vapaaehtoisia, mukaan lukien 18-55-vuotiaat henkilöt molemmista sukupuolista. Kaikkien koehenkilöiden oli täytettävä kaikki osallistumiskriteerit seuraavasti: henkisesti ja fyysisesti terve, ei kliinisesti merkittäviä patologisia löydöksiä missään tutkimusta edeltävässä tutkimuksessa, mukaan lukien veren kemia (maksa- ja munuaisten toimintakokeet), erotusverenkuvat, hyytymistesti, ultraherkät C-reaktiivisen proteiinin tasot. Tutkittavien olisi voitava antaa kirjallinen tietoinen suostumus. Poissulkemiskriteerit sisälsivät raskaana olevat tai imettävät naiset, potilaat, joilla oli krooninen virusinfektio (esim. HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), näyttöä dekompensoituneesta maksasairaudesta, olemassa olevasta hematuriasta tai proteinuriasta, kryoglobuliinitasot >1 % tai muut immunologisesti aiheuttamat sairaudet, skitosomiaasi, akuutti infektiosairaus, vakavat psyykkiset häiriöt, nykyinen tai aiempi pahanlaatuinen kasvain ja potilaat, jotka ovat saaneet interferonihoitoa tai mitä tahansa hepatiitin tutkittavaa hoitoa 3 kuukauden aikana ennen tutkimukseen tuloa.

iv) Suostumus Vapaaehtoisille toimitetaan kirjallinen tietolomake rokotteesta ja tämän kokeen vaatimuksista. He aikovat

vastineeksi antaa kirjallinen suostumus osallistua tutkimukseen. Aineistoon osallistumisesta maksetaan palkkio. Heille tarjotaan myös kuljetusrahoja sairaalaan ja takaisin.

v) Tutkimuksen pääpiirteet: Ehdotetussa tutkimuksessa pyrimme arvioimaan Cenv3-peptidirokotteen siedettävyyttä, turvallisuutta, immunogeenisyyttä ja tehokkuutta 112 terveellä vapaaehtoisella lumekontrolloidussa avoimessa vaiheen 1 kliinisessä tutkimuksessa. Sietoisuus- ja turvallisuusparametreihin kuuluvat kliiniset oireet (akuutit ja krooniset), biokemialliset määritykset (maksan ja munuaisten toiminta sekä muut metaboliset parametrit) ja hematologiset testit (kaikki verisoluparametrit). Sekä humoraaliset että soluvasteet immunisaatioprotokollia kohtaan arvioidaan. Rokotteen tuloksena syntyneiden spesifisten Ab:iden neutralointikapasiteetit määritetään myös rokotuksen jälkeen.

vi) Rokotus

Rokotteen valmistus tapahtuu hyvän valmistustavan periaatteiden mukaisesti. Lyofilisoidut peptidit valmistetaan kahdeksanhaaraisessa moninkertaisessa antigeenisessä peptidissä (MAP) kaupallisessa laitoksessa, joka on erikoistunut peptidisynteesiin ja rakenteen modifiointiin (esim. AnaSpec USA). Peptidit liuotetaan ihmiskäyttöön valmistettuun PBS:ään. Koko toimenpide suoritetaan steriloiduilla lääke-/rokoteteollisuuden alueilla (esim. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a katu Agouza). Lyofilisoidut peptidit säilytetään tavallisessa jääkaapissa, kun taas liuenneet peptidit varastoidaan -80 0 C:ssa alikvootteina (suljetuissa ampulleissa, joista jokainen sisältää 1X annoksen) valmiina injektiota varten ja kuljetetaan sairaalaan kuivajäässä juuri ennen käyttöä. Huomautus: Näitä varastointia ja kuljetusta koskevia varotoimia noudatetaan tutkimuksen näissä alkuvaiheissa. Strategiaa muutetaan kaupallisessa mittakaavassa, kun nykyinen tuote osoittautuu tehokkaaksi. Tässä myöhemmässä tapauksessa kylmäkuivattu jauhe, jossa on suositeltu annos, pakataan suljettuihin ampulleihin ja liuotetaan juuri ennen käyttöä. HCV-peptidirokote Cenv3 ruiskutetaan ihonalaisesti 3 eri annoksena (1x eli 324 ug, 2x eli 648 ug tai 3x 1296 ug / 70 kg ruumiinpaino aikuinen). Tässä on huomioitava, että annos 1X vastaa hiirikokeista laskettua farmaseuttista annosta, joten 324 ug/70 kg ruumiinpainoa on Minimum Available Biologically Effective Annostelu (MABEL). Perustuu muiden laboratorioiden kokemuksiin peptidirokotteen antamisesta ihmisille (Tanaka ja Manns), jotka käyttivät jopa 5000 ug peptidirokotetta immunisaatiokokeissaan. Protokollassamme käytetty suurin annos on 4X (1296 ug/70 painokilo), ja siksi sitä pidetään tässä protokollassa NOAEL-tasona (No Observable Adverse Effect Level). Rokote annetaan joko MAP-muodossa (itseadjuvantti) tai täydennettynä adjuvantilla (MF59) yhteisen kuukausittaisen injektion protokollan mukaisesti 3 peräkkäisen kuukauden ajan.

vii) Näytteenotto

Kaikki immunisaatio- ja näytteenottotoimenpiteet suoritetaan Ahmed Maher Educational Hospitalissa (MOH). Tutkittavien ilmoittautuminen, suostumus, rokotukset, näytteenotto ja rokotuksen jälkeinen kliininen tarkkailu suoritetaan sairaalan koulutettujen kliinikon tiiviissä lääkärin valvonnassa. Koehenkilöistä otetaan seitsemän verinäytettä ennen ensimmäistä immunisaatiota ja päivinä 30, 60, 90 (rokotusjakson aikana) ja päivinä 135, 180 ja 360 sen jälkeen. Päivänä 360 kohteet immunisoidaan tehosteannoksella, joka on sama kuin samalle kohteelle annettu alkuperäinen annos, ja 8. verinäyte kerätään 30 päivää tehosteannoksen jälkeen. Joka kerta 15 ml laskimoverta otetaan. Kahdeksan ml:aa käytetään seerumin erottamiseen humoraalisen vasteen määrittämiseen, neutralointimäärityksiin ja biokemialliseen testaukseen. Seitsemän ml EDTA:ta CBC:tä varten ja lymfosyyttien erotusta EliSpot-määritykseen.