Estudio de seguridad y eficacia de la vacuna CENV3 para proteger contra la infección por VHC (CENV3)

En el presente trabajo, planeamos estudiar la seguridad y eficacia de una vacuna peptídica denominada Cenv3 (C para HCV, en para envolver, v para vacuna, 3 para 3 epítopos). Los principales lineamientos del estudio actual incluyen: 1) Examinar los parámetros de seguridad a lo largo del período de vacunación, incluidas las reacciones agudas y crónicas si están presentes en un estudio clínico de fase 1 (es decir, en voluntarios sanos). La vacuna se administrará sc en 3 dosis crecientes en presencia y ausencia de adyuvante. También se determinará la biodisponibilidad de la vacuna a lo largo de la duración del experimento. 2) Evaluación de las respuestas inmunes humoral y celular frente a Cenv3 en voluntarios sanos (mayor riesgo de contraer la infección por VHC). 3) Evaluación de la capacidad neutralizante de los Abs generados para interferir en la replicación intracelular del VHC en líneas celulares permisivas

ii) Objetivo La presente propuesta tiene como objetivo:-

1. Examen de la seguridad y la tolerabilidad de la vacuna peptídica contra el VHC candidata en voluntarios sanos.
2. Prueba de inmunidad mediada por células a través de respuestas de linfocitos T citotóxicos en sujetos sanos vacunados (CMI).
3. Determinación de la respuesta de células B específicas del epítopo y títulos de anticuerpos en individuos vacunados (inmunogenicidad humoral).
4. Prueba de neutralización viral por anticuerpos contra los epítopos vacunales. (Eficacia).
5. Estudiar la biodisponibilidad de los péptidos en la circulación de los sujetos durante todo el tiempo de vacunación y 90 días post vacunación.

iii) Población de estudio

Los sujetos con problemas cardiovasculares, asma o alergias deben ser excluidos del estudio. Asimismo, se excluirá a cualquier sujeto que haya participado en algún ensayo clínico de medicina experimental en los últimos 3 meses. Se inscribirán voluntarios sanos, incluidos sujetos de ambos sexos, de 18 a 55 años de edad. Todos los sujetos debían cumplir con todos los criterios de inclusión de la siguiente manera: mental y físicamente sanos, sin hallazgos patológicos clínicamente relevantes en ninguna de las investigaciones del examen previo al estudio, incluida la química sanguínea (pruebas de función hepática y renal), recuentos sanguíneos diferenciales, prueba de coagulación, niveles ultrasensibles de proteína C reactiva. Los sujetos deben poder proporcionar consentimientos informados por escrito. Los criterios de exclusión incluyeron mujeres embarazadas o lactantes, pacientes con infecciones virales crónicas (p. ej., HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), evidencia de enfermedad hepática descompensada, hematuria o proteinuria preexistentes, niveles de crioglobulina >1% o otras enfermedades impulsadas inmunológicamente, esquistosomiasis, enfermedades infecciosas agudas, trastornos psiquiátricos graves, antecedentes actuales o pasados ​​de malignidad y pacientes que recibieron tratamiento con interferón o cualquier terapia en investigación para la hepatitis durante los 3 meses anteriores al ingreso al estudio.

iv) Consentimiento A los voluntarios se les proporcionará una hoja de información escrita sobre la vacuna y los requisitos de este ensayo. Ellos van a

, a cambio, dar su consentimiento por escrito para participar en el estudio. A los sujetos se les pagará un honorario por su participación. También se les proporcionará dinero para el transporte hacia y desde el hospital.

v) Resumen del estudio: en el estudio propuesto, nuestro objetivo es evaluar la tolerabilidad, la seguridad, la inmunogenicidad y la eficacia de la vacuna de péptido Cenv3 en 112 voluntarios sanos como un ensayo clínico de fase 1 abierto controlado con placebo. Los parámetros de tolerabilidad y seguridad incluyen signos clínicos (agudos y crónicos), ensayos bioquímicos (funciones hepática y renal, así como otros parámetros metabólicos) y pruebas hematológicas (todos los parámetros de células sanguíneas). Se evaluarán las respuestas tanto humorales como celulares a los protocolos de inmunización. Las capacidades neutralizantes de Abs específicos generados en respuesta a la vacuna también se determinarán después de la vacunación.

vi) Vacunación

La preparación de la vacuna se realizará bajo los principios de las Buenas Prácticas de Manufactura. Los péptidos liofilizados se fabrican en un péptido antigénico múltiple (MAP) de ocho brazos en una instalación comercial especializada en síntesis de péptidos y modificación de estructuras (por ejemplo, AnaSpec USA). Los péptidos se disolverán en PBS fabricado para uso humano. Todo el procedimiento se realizará en áreas esterilizadas de la industria de medicamentos/vacunas (p. VACSERA, Ministerio de Salud Wezaret Al Zera'a calle Agouza). Los péptidos liofilizados se almacenarán en un frigorífico normal, mientras que los péptidos disueltos se almacenarán a -80 0 C como alícuotas (en ampollas selladas, cada una contiene una dosis 1X) listas para inyección y transportadas al hospital en hielo seco justo antes de su uso. Nota: Estas precauciones de almacenamiento y transporte se siguen durante estas primeras etapas del estudio. Mientras que la estrategia se modificaría a escala comercial cuando el producto actual resulte efectivo. En este último caso se envasará un polvo liofilizado con la dosis recomendada en ampollas selladas y se disolverá justo antes de su uso. La vacuna de péptido VHC Cenv3 se inyectará por vía subcutánea en 3 dosis diferentes (1x, es decir, 324 ug, 2x, es decir, 648 ug o 3x 1296 ug/70 kg de peso corporal en adultos). Cabe señalar aquí que la dosis 1X es igual a la dosis farmacéutica calculada a partir de experimentos con ratones, por lo tanto, 324 ug/70 kg de peso corporal es el nivel de dosis mínima biológicamente eficaz disponible (MABEL). Basado en la experiencia de otros laboratorios con la administración de vacunas peptídicas al hombre (Tanaka y Manns) que usaron hasta 5000 ug de vacuna peptídica para sus experimentos de inmunización. La dosis más alta utilizada en nuestro protocolo es 4X (1296 ug/ 70 kg de peso corporal) y, por lo tanto, se considera el nivel de efecto adverso no observable (NOAEL) en este protocolo. La vacuna se administrará en forma de MAP (autoadyuvante) o suplementada con adyuvante (MF59) en un protocolo común de inyección mensual durante 3 meses consecutivos.

vii) Recogida de muestras

Todos los procedimientos de inmunización y toma de muestras se realizarán en el Hospital Educativo Ahmed Maher (MOH). El registro de sujetos, el consentimiento, la vacunación, el muestreo y la observación clínica posterior a la vacunación se realizarán bajo estrecha supervisión médica por parte de médicos capacitados en el hospital. Se tomarán siete muestras de sangre de sujetos antes de la primera inmunización y en los días 30, 60, 90 (durante el período de vacunación) y los días 135, 180 y 360 después. En el día 360, los sujetos serán inmunizados con una dosis de refuerzo igual a la dosis original administrada al mismo sujeto y se recolectará una octava muestra de sangre 30 días después de la dosis de refuerzo. Cada vez se extraerán 15 ml de sangre venosa. Se utilizarán ocho ml para la separación del suero para la determinación de la respuesta humoral, ensayos de neutralización y pruebas bioquímicas. Siete ml en EDTA para CBC y separación de linfocitos para el ensayo EliSpot.