Veiligheids- en werkzaamheidsstudie van CENV3-vaccin ter bescherming tegen HCV-infectie (CENV3)

In het huidige werk zijn we van plan om de veiligheid en werkzaamheid te bestuderen van een peptidevaccin genaamd Cenv3 (C voor HCV, en voor envelop, v voor vaccin, 3 voor 3 epitopen). De hoofdlijnen van de huidige studie omvatten: 1) Onderzoek van de veiligheidsparameters gedurende de vaccinatieperiode, inclusief acute en chronische reacties indien aanwezig in een fase 1 klinische studie (d.w.z. bij gezonde vrijwilligers). Het vaccin wordt sc toegediend in 3 toenemende doses met en zonder adjuvans. De biologische beschikbaarheid van het vaccin gedurende de duur van het experiment zal ook worden bepaald. 2) Beoordeling van de humorale en cellulaire immuunresponsen tegen Cenv3 bij gezonde vrijwilligers (hoger risico op het oplopen van een HCV-infectie). 3) Evaluatie van het neutraliserende vermogen van de gegenereerde Abs om de intracellulaire replicatie van HCV in permissieve cellijnen te verstoren

ii) Doelstelling Het huidige voorstel beoogt:

1. Onderzoek naar de veiligheid en verdraagbaarheid van het kandidaat-HCV-peptidevaccin bij gezonde vrijwilligers.
2. Testen van celgemedieerde immuniteit via cytotoxische T-lymfocytreacties bij gevaccineerde gezonde proefpersonen (CMI).
3. Bepaling van epitoopspecifieke B-celrespons en antilichaamtiters bij gevaccineerde personen (humorale immunogeniciteit).
4. Testen van de virale neutralisatie door antilichamen tegen de epitopen van het vaccin. (Doeltreffendheid).
5. Bestudering van de biologische beschikbaarheid van de peptiden in de circulatie van proefpersonen gedurende de vaccinatietijd en 90 dagen na vaccinatie.

iii) Studiepopulatie

Proefpersonen met cardiovasculaire problemen, astma of allergieën moeten van het onderzoek worden uitgesloten. Ook wordt elke proefpersoon die in de afgelopen 3 maanden heeft deelgenomen aan een klinische proef met experimentele geneeskunde, uitgesloten. Gezonde vrijwilligers, waaronder proefpersonen van beide geslachten, van 18-55 jaar zullen worden ingeschreven. Alle proefpersonen moesten als volgt aan alle inclusiecriteria voldoen: mentaal en fysiek gezond, geen klinisch relevante pathologische bevindingen in een van de onderzoeken van het onderzoek voorafgaand aan de studie, waaronder bloedchemie (lever- en nierfunctietesten), differentiële bloedtellingen, stollingstest, ultrasensitieve C-reactieve proteïne niveaus. Proefpersonen moeten schriftelijke geïnformeerde toestemming kunnen geven. De uitsluitingscriteria omvatten zwangere vrouwen of vrouwen die borstvoeding geven, patiënten met chronische virale infecties (bijv. andere immunologisch aangestuurde ziekten, schistosomiasis, acute infectieziekte, ernstige psychiatrische stoornissen, huidige of vroegere geschiedenis van maligniteit en patiënten die behandeld werden met interferon of een onderzoekstherapie voor hepatitis gedurende de 3 maanden voorafgaand aan deelname aan het onderzoek.

iv) Toestemming De vrijwilligers krijgen een schriftelijk informatieblad over het vaccin en de vereisten van dit onderzoek. Ze zullen

, geef in ruil daarvoor schriftelijke toestemming om deel te nemen aan het onderzoek. Proefpersonen ontvangen een honorarium voor hun deelname. Ook krijgen ze vervoergeld van en naar het ziekenhuis.

v) Hoofdlijnen van de studie: In de voorgestelde studie streven we naar het evalueren van de verdraagbaarheid, veiligheid, immunogeniciteit en werkzaamheid van het Cenv3-peptidevaccin bij 112 gezonde vrijwilligers als een placebogecontroleerde open-label fase 1 klinische studie. Verdraagbaarheids- en veiligheidsparameters omvatten klinische symptomen (acuut en chronisch), biochemische tests (lever- en nierfuncties evenals andere metabolische parameters) en hematologische tests (alle bloedcelparameters). Zowel humorale als cellulaire reacties op de immunisatieprotocollen zullen worden geëvalueerd. Het neutraliserend vermogen van specifieke Abs die als reactie op het vaccin worden gegenereerd, zal ook na vaccinatie worden bepaald.

vi) Vaccinatie

De voorbereiding van het vaccin zal worden uitgevoerd volgens de principes van Good Manufacturing Practice. De gelyofiliseerde peptiden worden vervaardigd in een achtarmig meervoudig antigeen peptide (MAP) in een commerciële faciliteit die gespecialiseerd is in peptidesynthese en structuurmodificatie (bijv. AnaSpec USA). Peptiden zullen worden opgelost in PBS gemaakt voor menselijk gebruik. De hele procedure zal worden uitgevoerd in gesteriliseerde gebieden van de geneesmiddelen-/vaccinindustrie (bijv. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a straat Agouza). De gelyofiliseerde peptiden worden in de gewone koelkast bewaard, terwijl de opgeloste peptiden als aliquots bij -80 °C worden bewaard (in verzegelde ampullen die elk 1X dosis bevatten), klaar voor injectie en vlak voor gebruik in droogijs naar het ziekenhuis vervoerd. Opmerking: Deze voorzorgsmaatregelen voor opslag en transport worden gevolgd tijdens deze vroege stadia van het onderzoek. Terwijl de strategie op commerciële schaal zou worden aangepast wanneer het huidige product effectief blijkt te zijn. In dit latere geval wordt een gelyofiliseerd poeder met de aanbevolen dosering in verzegelde ampullen verpakt en vlak voor gebruik opgelost. HCV-peptidevaccin Cenv3 zal subcutaan worden geïnjecteerd in 3 verschillende doses (1x d.w.z. 324 µg, 2x d.w.z. 648 µg of 3x 1296 µg/70 kgm lichaamsgewicht volwassene). Hierbij moet worden opgemerkt dat dosis 1X gelijk is aan de berekende farmaceutische dosis van muizenexperimenten, daarom is 324 ug/70 kg lichaamsgewicht het minimaal beschikbare biologisch effectieve dosisniveau (MABEL). Gebaseerd op de ervaring van andere laboratoria met toediening van peptidevaccins aan mensen (Tanaka en Manns) die tot 5000 µg peptidevaccin gebruikten voor hun immunisatie-experimenten. De hoogste dosis die in ons protocol wordt gebruikt, is 4X (1296 ug/70 kg bw) en wordt daarom in dit protocol beschouwd als het No Observable Adverse Effect Level (NOAEL). Het vaccin zal worden toegediend als een MAP-vorm (met eigen adjuvans) of aangevuld met adjuvans (MF59) in een gemeenschappelijk protocol van maandelijkse injectie gedurende 3 opeenvolgende maanden.

vii) Monsterverzameling

Alle immunisatie- en bemonsteringsprocedures zullen worden uitgevoerd in het Ahmed Maher Educational Hospital (MOH). Inschrijving, toestemming, vaccinatie, bemonstering en klinische observatie van proefpersonen na vaccinatie zullen worden gedaan onder nauwlettend medisch toezicht door getrainde clinici in het ziekenhuis. Voorafgaand aan de eerste immunisatie en op dagen 30, 60, 90 (tijdens de vaccinatieperiode) en dagen 135, 180 en 360 daarna zullen er zeven bloedmonsters van proefpersonen worden genomen. Op dag 360 worden proefpersonen geïmmuniseerd met een boosterdosis die gelijk is aan de oorspronkelijke dosis die aan dezelfde proefpersoon werd gegeven en een 8e bloedmonster wordt 30 dagen na de boosterdosis afgenomen. Er wordt telkens 15 ml veneus bloed afgenomen. Acht ml zal worden gebruikt voor serumscheiding voor bepaling van de humorale respons, neutralisatietesten en biochemische testen. Zeven ml op EDTA voor CBC en lymfocytenscheiding voor EliSpot-assay.