Badanie bezpieczeństwa i skuteczności szczepionki CENV3 chroniącej przed zakażeniem HCV (CENV3)

W niniejszej pracy planujemy zbadać bezpieczeństwo i skuteczność szczepionki peptydowej o nazwie Cenv3 (C dla HCV, en dla otoczki, v dla szczepionki, 3 dla 3 epitopów). Główne zarysy obecnego badania obejmują: 1) Badanie parametrów bezpieczeństwa przez cały okres szczepienia, w tym ostrych i przewlekłych reakcji, jeśli występują w badaniu klinicznym fazy 1 (tj. u zdrowych ochotników). Szczepionka będzie podawana podskórnie w 3 rosnących dawkach w obecności i nieobecności adiuwanta. Określona zostanie również biodostępność szczepionki w czasie trwania eksperymentu. 2) Ocena humoralnej i komórkowej odpowiedzi immunologicznej na Cenv3 u zdrowych ochotników (większe ryzyko zakażenia HCV). 3) Ocena zdolności neutralizującej wytworzonych Abs do zakłócania wewnątrzkomórkowej replikacji HCV w permisywnych liniach komórkowych

ii) Cel Celem niniejszego wniosku jest:

1. Badanie bezpieczeństwa i tolerancji kandydującej szczepionki peptydowej HCV u zdrowych ochotników.
2. Testowanie odporności komórkowej poprzez odpowiedzi cytotoksycznych limfocytów T u zaszczepionych zdrowych osób (CMI).
3. Określenie odpowiedzi limfocytów B specyficznej dla epitopu i miana przeciwciał u szczepionych osób (immunogenność humoralna).
4. Badanie neutralizacji wirusa przez przeciwciała przeciwko epitopom szczepionki. (Skuteczność).
5. Badanie biodostępności peptydów w krążeniu badanych osób w czasie szczepienia i 90 dni po szczepieniu.

iii) Badana populacja

Pacjenci z jakimikolwiek problemami sercowo-naczyniowymi, astmą lub alergiami powinni zostać wykluczeni z badania. Ponadto każdy uczestnik, który brał udział w jakimkolwiek badaniu klinicznym medycyny eksperymentalnej w ciągu ostatnich 3 miesięcy, zostanie wykluczony. Zostaną zapisani zdrowi ochotnicy, w tym osoby obojga płci, w wieku 18-55 lat. Wszyscy uczestnicy musieli spełniać następujące kryteria włączenia: zdrowi psychicznie i fizycznie, bez istotnych klinicznie zmian patologicznych w żadnym z badań badania wstępnego, w tym biochemii krwi (testy czynności wątroby i nerek), morfologii krwi z rozmazu, testu krzepnięcia, ultraczułe poziomy białka C-reaktywnego. Osoby badane powinny być w stanie wyrazić pisemną świadomą zgodę. Kryteria wykluczenia obejmowały kobiety w ciąży lub karmiące piersią, pacjentów z przewlekłymi infekcjami wirusowymi (np. inne choroby o podłożu immunologicznym, schistosomatozę, ostrą chorobę zakaźną, ciężkie zaburzenia psychiczne, obecne lub przebyte nowotwory złośliwe oraz pacjentów, którzy otrzymywali leczenie interferonem lub jakąkolwiek eksperymentalną terapię zapalenia wątroby w ciągu 3 miesięcy przed włączeniem do badania.

iv) Zgoda Ochotnicy otrzymają pisemną ulotkę informacyjną na temat szczepionki i wymagań tego badania. Oni będą

, w zamian za pisemną zgodę na udział w badaniu. Uczestnicy otrzymają honorarium za udział. Otrzymają również pieniądze na transport do i ze szpitala.

v) Zarys badania: W proponowanym badaniu naszym celem jest ocena tolerancji, bezpieczeństwa, immunogenności i skuteczności szczepionki peptydowej Cenv3 u 112 zdrowych ochotników w ramach otwartego badania klinicznego fazy 1 z kontrolą placebo. Parametry tolerancji i bezpieczeństwa obejmują objawy kliniczne (ostre i przewlekłe), badania biochemiczne (czynności wątroby i nerek oraz inne parametry metaboliczne) oraz badania hematologiczne (wszystkie parametry krwinek). Oceniona zostanie zarówno odpowiedź humoralna, jak i komórkowa na protokoły immunizacji. Zdolności neutralizujące określonych Ab wytworzonych w odpowiedzi na szczepionkę zostaną również określone po szczepieniu.

vi) Szczepienia

Przygotowanie szczepionki zostanie przeprowadzone zgodnie z zasadami Dobrej Praktyki Wytwarzania. Liofilizowane peptydy są wytwarzane w ośmioramiennym wieloantygenowym peptydzie (MAP) w komercyjnym zakładzie specjalizującym się w syntezie peptydów i modyfikacji struktury (np. AnaSpec USA). Peptydy zostaną rozpuszczone w PBS przeznaczonym do użytku przez ludzi. Cała procedura zostanie przeprowadzona w wysterylizowanych obszarach przemysłu farmaceutycznego/szczepionkowego (np. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a ulica Agouza). Liofilizowane peptydy będą przechowywane w zwykłej lodówce, podczas gdy rozpuszczone peptydy będą przechowywane w temperaturze -80°C jako porcje (w zamkniętych ampułkach, z których każda zawiera 1X dawkę) gotowe do wstrzyknięcia i przetransportowane do szpitala w suchym lodzie tuż przed użyciem. Uwaga: Te środki ostrożności dotyczące przechowywania i transportu są przestrzegane podczas tych wczesnych etapów badania. Natomiast strategia byłaby modyfikowana na skalę komercyjną, gdy obecny produkt okaże się skuteczny. W tym późniejszym przypadku liofilizowany proszek z zalecaną dawką zostanie zapakowany w zapieczętowane ampułki i rozpuszczony tuż przed użyciem. Szczepionka peptydowa HCV Cenv3 zostanie wstrzyknięta podskórnie w 3 różnych dawkach (1x tj. 324 ug, 2x tj. 648 ug lub 3x 1296 ug/ 70 kgm masy ciała osoby dorosłej). Należy tutaj zauważyć, że dawka 1X jest równa obliczonej dawce farmaceutycznej z eksperymentów na myszach, dlatego 324 μg/70 kg masy ciała jest minimalnym dostępnym biologicznie skutecznym poziomem dawki (MABEL). W oparciu o doświadczenia innych laboratoriów z podawaniem szczepionki peptydowej człowiekowi (Tanaka i Manns), którzy użyli do 5000 ug szczepionki peptydowej do swoich eksperymentów immunizacyjnych. Najwyższa dawka zastosowana w naszym protokole to 4X (1296 μg/ 70 kg mc.) i dlatego jest uznawana za poziom, przy którym nie obserwuje się szkodliwych skutków (NOAEL) w tym protokole. Szczepionka będzie podawana w formie MAP (samoadiuwantowa) lub uzupełniona adiuwantem (MF59) we wspólnym protokole comiesięcznych wstrzyknięć przez 3 kolejne miesiące.

vii) Pobieranie próbek

Wszystkie szczepienia i procedury pobierania próbek zostaną przeprowadzone w Ahmed Maher Educational Hospital (MOH). Rejestracja pacjentów, wyrażanie zgody, szczepienie, pobieranie próbek i obserwacja kliniczna po szczepieniu będą wykonywane pod ścisłym nadzorem medycznym przez przeszkolonych klinicystów w szpitalu. Od pacjentów zostanie pobranych siedem próbek krwi przed pierwszą immunizacją oraz w dniach 30, 60, 90 (podczas okresu szczepienia) oraz w dniach 135, 180 i 360 później. W 360 dniu pacjenci zostaną immunizowani dawką przypominającą równą oryginalnej dawce podanej temu samemu pacjentowi, a ósma próbka krwi zostanie pobrana 30 dni po dawce przypominającej. Każdorazowo pobierane będzie 15 ml krwi żylnej. Osiem ml zostanie użyte do oddzielenia surowicy w celu określenia odpowiedzi humoralnej, testów neutralizacji i testów biochemicznych. Siedem ml na EDTA do CBC i separacji limfocytów do testu EliSpot.