A CENV3 vakcina biztonságossági és hatékonysági tanulmánya a HCV fertőzés elleni védelem érdekében (CENV3)

Jelen munkában a Cenv3 elnevezésű peptid vakcina biztonságosságát és hatékonyságát kívánjuk tanulmányozni (C a HCV, en az envelop, v a vakcina, 3 a 3 epitóp). A jelenlegi vizsgálat főbb vázlatai a következők: 1) A biztonsági paraméterek vizsgálata a vakcinázási időszak során, beleértve az akut és krónikus reakciókat is, ha azok egy fázis 1 klinikai vizsgálatban jelen vannak (azaz egészséges önkénteseken). A vakcinát szubkután, 3 növekvő dózisban adjuk be adjuváns jelenlétében és hiányában. Meg kell határozni a vakcina biológiai hozzáférhetőségét is a kísérlet időtartama alatt. 2) A Cenv3 elleni humorális és celluláris immunválasz felmérése egészséges önkéntesekben (magasabb a HCV fertőzés kockázata). 3) A generált Abs semlegesítő képességének értékelése a HCV intracelluláris replikációjának megzavarására permisszív sejtvonalakban

ii) Célkitűzés A jelen javaslat célja:

1. A HCV peptid vakcinajelölt biztonságosságának és tolerálhatóságának vizsgálata egészséges önkéntesekben.
2. A sejt által közvetített immunitás tesztelése citotoxikus T-limfocita válaszokon keresztül beoltott egészséges alanyokban (CMI).
3. Az epitóp-specifikus B-sejt-válasz és az antitest-titerek meghatározása oltott egyénekben (humorális immunogenitás).
4. A vírussemlegesítés tesztelése a vakcina epitópjai elleni antitestekkel. (Hatékonyság).
5. A peptidek biohasznosulásának tanulmányozása az alanyok keringésében a vakcinázási idő alatt és az oltás után 90 nappal.

iii) Vizsgálati populáció

A szív- és érrendszeri problémákkal, asztmával vagy allergiával küzdő alanyokat ki kell zárni a vizsgálatból. Kizárásra kerül továbbá minden olyan alany, aki az elmúlt 3 hónapban részt vett bármilyen kísérleti gyógyszerészeti klinikai vizsgálatban. Egészséges önkéntesek, köztük mindkét nemhez tartozó, 18-55 év közötti önkéntesek kerülnek felvételre. Valamennyi alanynak meg kellett felelnie az összes besorolási kritériumnak a következők szerint: mentálisan és fizikailag egészséges, a vizsgálat előtti vizsgálat egyik vizsgálatában sem volt klinikailag releváns kóros lelet, beleértve a vérkémiai vizsgálatokat (máj- és vesefunkciós vizsgálatok), a differenciál vérképet, a véralvadási tesztet, ultraérzékeny C-reaktív fehérje szint. Az alanyoknak képesnek kell lenniük írásos, tájékozott beleegyezést adni. A kizárási kritériumok közé tartoztak a terhes vagy szoptató nők, a krónikus vírusfertőzésben (pl. HBV, HCV, HIV, CMV, HSV) szenvedő betegek, dekompenzált májbetegség, már meglévő hematuria vagy proteinuria, 1% feletti krioglobulinszint vagy egyéb immunológiailag kiváltott betegségek, schistosomiasis, akut fertőző betegség, súlyos pszichiátriai rendellenességek, jelenlegi vagy múltbeli rosszindulatú daganatok, valamint olyan betegek, akik a vizsgálatba való belépés előtti 3 hónapban interferon-kezelésben vagy bármilyen hepatitisz-kezelésben részesültek.

iv) Hozzájárulás Az önkéntesek írásos tájékoztatót kapnak a vakcináról és a vizsgálat követelményeiről. Fognak

, cserébe írásbeli hozzájárulását adja a vizsgálatban való részvételhez. A tantárgyak részvételéért tiszteletdíjat kapnak. Szállítási pénzt is biztosítanak számukra a kórházba és onnan vissza.

v) A vizsgálat körvonalai: A javasolt vizsgálatban a Cenv3 peptid vakcina tolerálhatóságának, biztonságosságának, immunogenitásának és hatékonyságának értékelésére törekszünk 112 egészséges önkéntesen, placebo-kontrollos, nyílt jelű 1. fázisú klinikai vizsgálatban. A tolerálhatósági és biztonsági paraméterek közé tartoznak a klinikai tünetek (akut és krónikus), biokémiai vizsgálatok (máj- és vesefunkciók, valamint egyéb metabolikus paraméterek) és hematológiai tesztek (minden vérsejt-paraméter). Az immunizálási protokollokra adott humorális és celluláris válaszokat egyaránt értékeljük. A vakcina hatására létrejövő specifikus Abs semlegesítő kapacitását szintén a vakcinázás után határozzák meg.

vi) Védőoltás

A vakcina elkészítése a helyes gyártási gyakorlat elvei szerint történik. A liofilizált peptideket nyolc karú, több antigén peptidben (MAP) állítják elő egy peptidszintézisre és szerkezetmódosításra szakosodott kereskedelmi létesítményben (például AnaSpec USA). A peptideket emberi felhasználásra készült PBS-ben oldják fel. Az egész eljárást a gyógyszer-/vakcinaipar sterilizált területein (pl. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a utca Agouza). A liofilizált peptideket normál hűtőszekrényben tároljuk, míg az oldott peptideket -80 0 C-on alikvot részekként (lezárt ampullákban, amelyek mindegyike 1X adagot tartalmaz) injekcióra készen, és közvetlenül felhasználás előtt szárazjégben szállítják a kórházba. Megjegyzés: Ezeket a tárolási és szállítási óvintézkedéseket a vizsgálat korai szakaszában betartják. Míg a stratégiát kereskedelmi méretekben módosítanák, amikor a jelenlegi termék hatékonynak bizonyul. Ebben a későbbi esetben az ajánlott adagolású liofilizált port lezárt ampullákba csomagolják, és közvetlenül felhasználás előtt feloldják. A Cenv3 HCV peptid vakcinát 3 különböző dózisban szubkután injekciózzák (1x azaz 324 ug, 2x azaz 648 ug vagy 3x 1296 ug/70 kg testtömegű felnőtt). Itt kell megjegyezni, hogy a dózis 1X egyenlő az egeres kísérletekből számított gyógyszerdózissal, ezért 324 ug/70 kg testtömeg a Minimális Elérhető Biológiailag Hatékony dózis Szint (MABEL). Más laboratóriumok tapasztalatai alapján a peptid vakcina beadásával kapcsolatos embereknek (Tanaka és Manns), akik legfeljebb 5000 ug peptid vakcinát használtak immunizálási kísérleteikhez. A protokollunkban használt legmagasabb dózis 4X (1296 ug/70 testtömegkg), ezért ebben a protokollban a No Observable Adverse Effect Level (NOAEL) szintnek tekintik. A vakcinát vagy MAP formában (önadjuváns) vagy adjuvánssal kiegészítve (MF59) adják be, havi injekciós protokoll szerint, 3 egymást követő hónapon keresztül.

vii) Mintagyűjtés

Minden immunizálási és mintavételi eljárást az Ahmed Maher Oktatási Kórházban (MOH) végeznek. Az alany felvételét, beleegyezését, oltást, mintavételt és az oltást követő klinikai megfigyelést a kórházban képzett klinikusok szoros orvosi felügyelete mellett végzik. Hét vérmintát vesznek az alanyoktól az első immunizálás előtt, valamint a 30., 60., 90. napon (a vakcinázási időszak alatt), valamint az azt követő 135., 180. és 360. napon. A 360. napon az alanyokat az azonos alanynak adott eredeti dózissal megegyező emlékeztető dózissal immunizálják, és 30 nappal az emlékeztető oltás után 8. vérmintát vesznek. Minden alkalommal 15 ml vénás vért vesznek le. Nyolc ml-t használnak fel a szérum elválasztására a humorális válasz meghatározásához, a neutralizációs vizsgálatokhoz és a biokémiai vizsgálatokhoz. Hét ml EDTA-n a CBC-hez és limfocita elválasztáshoz az EliSpot vizsgálathoz.