Étude d'innocuité et d'efficacité du vaccin CENV3 pour protéger contre l'infection par le VHC (CENV3)

Dans le présent travail, nous prévoyons d'étudier l'innocuité et l'efficacité d'un vaccin peptidique appelé Cenv3 (C pour VHC, en pour enveloppe, v pour vaccin, 3 pour 3 épitopes). Les grandes lignes de l'étude actuelle comprennent : 1) L'examen des paramètres d'innocuité tout au long de la période de vaccination, y compris les réactions aiguës et chroniques si elles sont présentes dans une étude clinique de phase 1 (c'est-à-dire chez des volontaires sains). Le vaccin sera administré sous-cutané à 3 doses croissantes en présence et en l'absence d'adjuvant. La biodisponibilité du vaccin pendant toute la durée de l'expérience sera également déterminée. 2) Évaluation des réponses immunitaires humorales et cellulaires envers Cenv3 chez des volontaires sains (risque plus élevé de contracter une infection par le VHC). 3) Évaluation de la capacité neutralisante des Abs générés à interférer avec la réplication intracellulaire du VHC dans les lignées cellulaires permissives

ii) Objectif La présente proposition vise à :-

1. Examen de l'innocuité et de la tolérabilité du vaccin peptidique candidat contre le VHC chez des volontaires sains.
2. Tester l'immunité à médiation cellulaire via les réponses des lymphocytes T cytotoxiques chez des sujets sains vaccinés (CMI).
3. Détermination de la réponse cellulaire B spécifique à l'épitope et des titres d'anticorps chez les individus vaccinés (immunogénicité humorale).
4. Tester la neutralisation virale par des anticorps dirigés contre les épitopes vaccinaux. (Efficacité).
5. Étudier la biodisponibilité des peptides dans la circulation des sujets pendant toute la durée de la vaccination et 90 jours après la vaccination.

iii) Population étudiée

Les sujets souffrant de problèmes cardiovasculaires, d'asthme ou d'allergies doivent être exclus de l'étude. De plus, tout sujet ayant participé à un essai clinique de médecine expérimentale au cours des 3 derniers mois sera exclu. Des volontaires sains comprenant des sujets des deux sexes, âgés de 18 à 55 ans, seront inscrits. Tous les sujets devaient remplir tous les critères d'inclusion comme suit : en bonne santé mentale et physique, aucun résultat pathologique cliniquement pertinent dans l'une des enquêtes de l'examen préalable à l'étude, y compris la chimie du sang (tests de la fonction hépatique et rénale), numération globulaire différentielle, test de coagulation, niveaux de protéine C-réactive ultrasensibles. Les sujets doivent être en mesure de fournir des consentements éclairés écrits. Les critères d'exclusion comprenaient les femmes enceintes ou allaitantes, les patients atteints d'infections virales chroniques (par exemple, VHB, VHC, VIH, CMV, HSV), des signes de maladie hépatique décompensée, une hématurie préexistante ou une protéinurie, des taux de cryoglobuline > 1 % ou autres maladies d'origine immunologique, schistosomiase, maladie infectieuse aiguë, troubles psychiatriques graves, antécédents actuels ou passés de malignité et patients ayant reçu un traitement par interféron ou tout traitement expérimental contre l'hépatite au cours des 3 mois précédant l'entrée à l'étude.

iv) Consentement Les volontaires recevront une fiche d'information écrite sur le vaccin et les exigences de cet essai. Elles vont

, en retour, donner son consentement écrit pour participer à l'étude. Les sujets recevront des honoraires pour leur participation. Ils recevront également de l'argent pour le transport vers et depuis l'hôpital.

v) Aperçu de l'étude : Dans l'étude proposée, nous visons à évaluer la tolérabilité, l'innocuité, l'immunogénicité et l'efficacité du vaccin peptidique Cenv3 chez 112 volontaires sains dans le cadre d'un essai clinique de phase 1 ouvert contrôlé par placebo. Les paramètres de tolérance et de sécurité comprennent les signes cliniques (aigus et chroniques), les tests biochimiques (fonctions hépatique et rénale ainsi que d'autres paramètres métaboliques) et les tests hématologiques (tous les paramètres des cellules sanguines). Les réponses humorales et cellulaires aux protocoles d'immunisation seront évaluées. Les capacités de neutralisation des Ac spécifiques générés en réponse au vaccin seront également déterminées après la vaccination.

vi) Vaccination

La préparation du vaccin sera effectuée selon les principes des bonnes pratiques de fabrication. Les peptides lyophilisés sont fabriqués dans un peptide antigénique multiple (MAP) à huit bras dans une installation commerciale spécialisée dans la synthèse de peptides et la modification de structure (par exemple AnaSpec USA). Les peptides seront dissous dans du PBS à usage humain. Toute la procédure sera effectuée dans des zones stérilisées de l'industrie des médicaments/vaccins ( p. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a rue Agouza). Les peptides lyophilisés seront stockés dans un réfrigérateur ordinaire, tandis que les peptides dissous seront stockés à -80 0 C sous forme d'aliquotes (dans des ampoules scellées contenant chacune une dose 1X) prêtes à être injectées et transportées à l'hôpital dans de la neige carbonique juste avant utilisation. Remarque : Ces précautions de stockage et de transport sont suivies au cours de ces premières étapes de l'étude. Alors que la stratégie serait modifiée à l'échelle commerciale lorsque le produit actuel s'avérerait efficace. Dans ce dernier cas, une poudre lyophilisée à la dose recommandée sera conditionnée dans des ampoules scellées et dissoute juste avant utilisation. Le vaccin peptidique contre le VHC Cenv3 sera injecté par voie sous-cutanée en 3 doses différentes (1x soit 324 ug, 2x soit 648 ug ou 3x 1296 ug/ 70 kgm de poids corporel adulte). Il convient de noter ici que la dose 1X est égale à la dose pharmaceutique calculée à partir d'expériences sur des souris, donc 324 ug/ 70 kg de poids corporel est la dose minimale disponible biologiquement efficace (MABEL). Basé sur l'expérience d'autres laboratoires avec l'administration de vaccin peptidique à l'homme (Tanaka et Manns) qui ont utilisé jusqu'à 5000 ug de vaccin peptidique pour leurs expériences d'immunisation. La dose la plus élevée utilisée dans notre protocole est 4X (1296 ug/ 70 kg pc) et est donc considérée comme la dose sans effet nocif observable (NOAEL) dans ce protocole. Le vaccin sera administré soit sous forme de MAP (auto-adjuvanté) soit supplémenté en adjuvant (MF59) selon un protocole commun d'injection mensuelle pendant 3 mois consécutifs.

vii) Prélèvement d'échantillons

Toutes les procédures de vaccination et d'échantillonnage seront effectuées à l'hôpital éducatif Ahmed Maher (MOH). L'inscription des sujets, le consentement, la vaccination, l'échantillonnage et l'observation clinique après la vaccination seront effectués sous étroite surveillance médicale par des cliniciens formés à l'hôpital. Sept échantillons de sang seront prélevés sur les sujets avant la première immunisation et aux jours 30, 60, 90 (pendant la période de vaccination) et aux jours 135, 180 et 360 par la suite. Au jour 360, les sujets seront immunisés avec une dose de rappel égale à la dose initiale administrée au même sujet et un huitième échantillon de sang sera prélevé 30 jours après la dose de rappel. A chaque fois 15 ml de sang veineux seront prélevés. Huit ml seront utilisés pour la séparation du sérum pour la détermination de la réponse humorale, les tests de neutralisation et les tests biochimiques. Sept ml sur EDTA pour le CBC et la séparation des lymphocytes pour le test EliSpot.