Estudo de segurança e eficácia da vacina CENV3 para proteger contra a infecção pelo HCV (CENV3)

No presente trabalho, planejamos estudar a segurança e eficácia de uma vacina peptídica denominada Cenv3 ( C para HCV, en para envelope, v para vacina, 3 para 3 epítopos). As principais linhas gerais do estudo atual incluem: 1) Examinar os parâmetros de segurança durante todo o período de vacinação, incluindo reações agudas e crônicas, se presentes em um estudo clínico de fase 1 (ou seja, em voluntários saudáveis). A vacina será administrada sc em 3 doses crescentes na presença e ausência de adjuvante. A biodisponibilidade da vacina ao longo da duração do experimento também será determinada. 2) Avaliação das respostas imunitárias humoral e celular ao Cenv3 em voluntários saudáveis ​​(maior risco de aquisição da infecção pelo VHC). 3) Avaliação da capacidade neutralizante dos Abs gerados para interferir na replicação intracelular do HCV em linhagens celulares permissivas

ii) Objetivo A presente proposta visa:-

1. Examinando a segurança e a tolerabilidade da vacina candidata de peptídeo do HCV em voluntários saudáveis.
2. Teste de imunidade mediada por células via respostas de linfócitos T citotóxicos em indivíduos saudáveis ​​vacinados (CMI).
3. Determinar a resposta de células B específicas do epítopo e os títulos de anticorpos em indivíduos vacinados (imunogenicidade humoral).
4. Testar a neutralização viral por anticorpos contra os epítopos vacinais. (Eficácia).
5. Estudar a biodisponibilidade dos peptídeos na circulação dos indivíduos ao longo do tempo de vacinação e 90 dias após a vacinação.

iii) População do estudo

Indivíduos com quaisquer problemas cardiovasculares, asma ou alergias devem ser excluídos do estudo. Além disso, qualquer sujeito que tenha participado de qualquer ensaio clínico de medicina experimental nos últimos 3 meses será excluído. Serão incluídos voluntários saudáveis, incluindo indivíduos de ambos os sexos, de 18 a 55 anos de idade. Todos os indivíduos tiveram que preencher todos os critérios de inclusão da seguinte forma: mentalmente e fisicamente saudáveis, sem achados patológicos clinicamente relevantes em qualquer uma das investigações do exame pré-estudo, incluindo química do sangue (testes de função hepática e renal), contagens sanguíneas diferenciais, teste de coagulação, níveis ultrassensíveis de proteína C-reativa. Os sujeitos devem ser capazes de fornecer consentimentos informados por escrito. Os critérios de exclusão incluíram mulheres grávidas ou amamentando, pacientes com infecções virais crônicas (por exemplo, HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), evidência de doença hepática descompensada, hematúria pré-existente ou proteinúria, níveis de crioglobulina > 1% ou outras doenças de origem imunológica, esquistossomose, doença infecciosa aguda, distúrbios psiquiátricos graves, história atual ou passada de malignidade e pacientes que receberam tratamento com interferon ou qualquer terapia experimental para hepatite durante os 3 meses anteriores à entrada no estudo.

iv) Consentimento Os voluntários receberão uma folha de informações por escrito sobre a vacina e os requisitos deste estudo. Elas vão

, em troca, dê consentimento por escrito para participar do estudo. Os indivíduos receberão um honorário por sua participação. Eles também receberão dinheiro para transporte de e para o hospital.

v) Contornos do estudo: No estudo proposto, pretendemos avaliar a tolerabilidade, segurança, imunogenicidade e eficácia da vacina peptídica Cenv3 em 112 voluntários saudáveis ​​como um ensaio clínico de fase 1 controlado por placebo e aberto. Os parâmetros de tolerabilidade e segurança incluem sinais clínicos (agudos e crônicos), ensaios bioquímicos (funções hepática e renal, bem como outros parâmetros metabólicos) e testes hematológicos (todos os parâmetros das células sanguíneas). Serão avaliadas as respostas humoral e celular aos protocolos de imunização. As capacidades de neutralização de Abs específicos gerados em resposta à vacina também serão determinadas após a vacinação.

vi) Vacinação

A preparação da vacina será realizada de acordo com os princípios das Boas Práticas de Fabricação. Os peptídeos liofilizados são fabricados em um peptídeo antigênico múltiplo (MAP) de oito braços em uma instalação comercial especializada em síntese de peptídeos e modificação de estrutura (por exemplo, AnaSpec USA). Os peptídeos serão dissolvidos em PBS feito para uso humano. Todo o procedimento será feito em áreas esterilizadas da indústria de medicamentos/vacinas (por exemplo, VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a rua Agouza). Os peptídeos liofilizados serão armazenados em geladeira comum, enquanto os peptídeos dissolvidos serão armazenados a -80 0 C como alíquotas (em ampolas seladas cada uma contém 1X dose) prontas para injeção e transportadas para o hospital em gelo seco imediatamente antes do uso. Observação: essas precauções de armazenamento e transporte são seguidas durante esses estágios iniciais do estudo. Embora a estratégia seja modificada em escala comercial quando o produto atual se mostrar eficaz. Neste último caso, um pó liofilizado com a dose recomendada será embalado em ampolas seladas e dissolvido imediatamente antes do uso. A vacina peptídica do HCV Cenv3 será injetada por via subcutânea em 3 doses diferentes (1x ou seja, 324 ug, 2x ou seja, 648 ug ou 3x 1296 ug/ 70 kgm de peso corporal adulto). Deve-se notar aqui que a dose 1X é igual à dose farmacêutica calculada a partir de experimentos com camundongos, portanto, 324 ug/70 kg de peso corporal é o nível mínimo de dose disponível biologicamente eficaz (MABEL). Com base na experiência de outros laboratórios com a administração de vacina peptídica ao homem ( Tanaka e Manns) que usaram até 5000 ug de vacina peptídica para seus experimentos de imunização. A dose mais alta usada em nosso protocolo é 4X (1296 ug/70 kg de peso corporal) e, portanto, considerada o nível sem efeito adverso observável (NOAEL) neste protocolo. A vacina será administrada na forma de MAP (auto-adjuvante) ou suplementada com adjuvante (MF59) em um protocolo comum de injeção mensal por 3 meses consecutivos.

vii) Coleta de amostras

Todos os procedimentos de imunização e amostragem serão realizados no Ahmed Maher Educational Hospital (MOH). A inscrição do sujeito, consentimento, vacinação, amostragem e observação clínica pós-vacinação serão feitas sob supervisão médica por médicos treinados no hospital. Sete amostras de sangue serão coletadas de indivíduos antes da primeira imunização e nos dias 30, 60, 90 (durante o período de vacinação) e dias 135, 180 e 360 ​​a partir de então. No dia 360, os indivíduos serão imunizados com uma dose de reforço igual à dose original dada ao mesmo indivíduo e uma 8ª amostra de sangue será coletada 30 dias após a dose de reforço. A cada vez serão retirados 15 ml de sangue venoso. Oito ml serão utilizados para separação do soro para determinação da resposta humoral, ensaios de neutralização e testes bioquímicos. Sete ml em EDTA para hemograma completo e separação de linfócitos para ensaio EliSpot.