Säkerhets- och effektstudie av CENV3-vaccin för att skydda mot HCV-infektion (CENV3)

I detta arbete planerar vi att studera säkerheten och effekten av ett peptidvaccin som kallas Cenv3 (C för HCV, en för envelop, v för vaccin, 3 för 3 epitoper). Huvuddragen i den aktuella studien inkluderar: 1) Undersökning av säkerhetsparametrarna under hela vaccinationsperioden inklusive akuta och kroniska reaktioner om de förekommer i en klinisk fas 1-studie (dvs. hos friska frivilliga). Vaccinet kommer att administreras sc vid 3 eskalerande doser i närvaro och frånvaro av adjuvans. Biotillgängligheten för vaccinet under experimentets varaktighet kommer också att bestämmas. 2) Bedömning av de humorala och cellulära immunsvaren mot Cenv3 hos friska frivilliga (högre risk för att få HCV-infektion). 3) Utvärdering av den neutraliserande förmågan hos de genererade abs att interferera med intracellulär replikering av HCV i tillåtande cellinjer

ii) Mål Föreliggande förslag syftar till:-

1. Undersöker säkerhet och tolerabilitet mot kandidatvaccinet HCV-peptid hos friska frivilliga.
2. Testa cellmedierad immunitet via cytotoxiska T-lymfocytsvar hos vaccinerade friska försökspersoner (CMI).
3. Bestämning av epitopspecifikt B-cellssvar och antikroppstitrar hos vaccinerade individer (humoral immunogenicitet).
4. Testa den virala neutraliseringen av antikroppar mot vaccinepitoperna. (Effektivitet).
5. Studera biotillgängligheten av peptiderna i försökspersoners cirkulation under hela vaccinationstiden och 90 dagar efter vaccination.

iii) Studiepopulation

Försökspersoner med kardiovaskulära problem, astma eller allergier bör uteslutas från studien. Alla försökspersoner som har deltagit i någon klinisk prövning av experimentell medicin under de senaste 3 månaderna kommer att exkluderas. Friska frivilliga inklusive försökspersoner från båda könen, 18-55 år kommer att registreras. Alla försökspersoner var tvungna att uppfylla alla inklusionskriterier enligt följande: mentalt och fysiskt friska, inga kliniskt relevanta patologiska fynd i någon av undersökningarna av förstudien inklusive blodkemi (lever- och njurfunktionstester), differentiella blodvärden, koagulationstest, ultrakänsliga C-reaktiva proteinnivåer. Försökspersoner bör kunna ge skriftligt informerat samtycke. Uteslutningskriterierna inkluderade gravida eller ammande kvinnor, patienter med kroniska virusinfektioner (t.ex. HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), tecken på dekompenserad leversjukdom, redan existerande hematuri eller proteinuri, kryoglobulinnivåer >1 % eller andra immunologiskt drivna sjukdomar, schistosomiasis, akut infektionssjukdom, allvarliga psykiatriska störningar, nuvarande eller tidigare malignitetshistoria och patienter som fått behandling med interferon eller någon undersökningsterapi för hepatit under de tre månaderna före studiestart.

iv) Samtycke Volontärerna kommer att förses med ett skriftligt informationsblad om vaccinet och kraven för denna prövning. De kommer

, i gengäld ge skriftligt samtycke till att delta i studien. Ämnen kommer att få ett hedersbelopp för sitt deltagande. De ska också förses med transportpengar till och från sjukhuset.

v) Studiens konturer: I den föreslagna studien syftar vi till att utvärdera tolerabilitet, säkerhet, immunogenicitet och effektivitet av Cenv3 peptidvaccin hos 112 friska frivilliga som en placebokontrollerad öppen fas 1 klinisk prövning. Tolerabilitets- och säkerhetsparametrar inkluderar kliniska tecken (akuta och kroniska), biokemiska analyser (lever- och njurfunktioner samt andra metabola parametrar) och hematologiska tester (alla blodcellsparametrar). Både humorala och cellulära svar på immuniseringsprotokollen kommer att utvärderas. Neutraliserande kapacitet hos specifika abs som genereras som svar på vaccinet kommer också att bestämmas efter vaccination.

vi) Vaccination

Beredning av vaccin kommer att utföras enligt principerna för god tillverkningssed. De lyofiliserade peptiderna tillverkas i en åttaarms multipel antigen peptid (MAP) i en kommersiell anläggning specialiserad på peptidsyntes och strukturmodifiering (t.ex. AnaSpec USA). Peptider kommer att lösas i PBS gjord för mänsklig användning. Hela proceduren kommer att göras i steriliserade områden inom läkemedels-/vaccinindustrin (t.ex. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a gatan Agouza). De frystorkade peptiderna kommer att förvaras i vanlig kyl, medan upplösta peptider kommer att förvaras vid -80 0 C som alikvoter (i förseglade ampuller innehåller vardera 1X dos) redo för injektion och transporteras till sjukhuset i torris strax före användning. Obs: Dessa försiktighetsåtgärder för lagring och transport följs under dessa tidiga stadier av studien. Medan strategin skulle ändras i kommersiell skala när den nuvarande produkten visar sig effektiv. I detta senare fall kommer ett frystorkat pulver med den rekommenderade dosen att förpackas i förseglade ampuller och lösas upp strax före användning. HCV-peptidvaccin Cenv3 kommer att injiceras subkutant i 3 olika doser (1x dvs. 324 ug, 2x dvs. 648 ug eller 3x 1296 ug/70 kg kroppsvikt vuxen). Det bör noteras här att dos 1X är lika med den beräknade farmaceutiska dosen från mössexperiment, därför är 324 ug/70 kg kroppsvikt den minsta tillgängliga biologiskt effektiva dosnivån (MABEL). Baserat på erfarenheter från andra laboratorier med administrering av peptidvaccin till människor (Tanaka och Manns) som använde upp till 5000 ug peptidvaccin för sina immuniseringsexperiment. Den högsta dosen som används i vårt protokoll är 4X (1296 ug/70 kg kroppsvikt) och anses därför vara NOAEL (No Observable Adverse Effect Level) i detta protokoll. Vaccinet kommer att administreras antingen som en MAP-form (självadjuvanserad) eller kompletterad med adjuvans (MF59) i ett gemensamt protokoll med månatlig injektion under 3 månader i följd.

vii) Provtagning

Alla immuniserings- och provtagningsprocedurer kommer att utföras på Ahmed Maher Educational Hospital (MOH). Registrering av försökspersoner, samtycke, vaccination, provtagning och klinisk observation efter vaccination kommer att göras under noggrann medicinsk övervakning av utbildade läkare på sjukhuset. Sju blodprover kommer att tas från försökspersoner före den första immuniseringen och dagarna 30, 60, 90 (under vaccinationsperioden) och dagarna 135, 180 och 360 därefter. På dag 360 kommer försökspersonerna att immuniseras med en boosterdos lika med den ursprungliga dosen som ges till samma patient och ett åttonde blodprov kommer att tas 30 dagar efter boosterdosen. Varje gång tas 15 ml venöst blod ut. Åtta ml kommer att användas för serumseparation för bestämning av humoral respons, neutralisationsanalyser och biokemiska tester. Sju ml på EDTA för CBC och lymfocytseparation för EliSpot-analys.