Studio sulla sicurezza e l'efficacia del vaccino CENV3 per proteggere dall'infezione da HCV (CENV3)

Nel presente lavoro, intendiamo studiare la sicurezza e l'efficacia di un vaccino peptidico denominato Cenv3 (C per HCV, en per busta, v per vaccino, 3 per 3 epitopi). Le linee principali dell'attuale studio includono: 1) Esaminare i parametri di sicurezza durante il periodo di vaccinazione, comprese le reazioni acute e croniche se presenti in uno studio clinico di fase 1 (ovvero in volontari sani). Il vaccino verrà somministrato sc a 3 dosi crescenti in presenza e in assenza di adiuvante. Sarà inoltre determinata la biodisponibilità del vaccino per tutta la durata dell'esperimento. 2) Valutazione delle risposte immunitarie umorali e cellulari verso Cenv3 in volontari sani (maggiore rischio di contrarre l'infezione da HCV). 3) Valutazione della capacità neutralizzante degli Abs generati di interferire con la replicazione intracellulare di HCV in linee cellulari permissive

ii) Obiettivo La presente proposta mira a:-

1. Esaminare la sicurezza e la tollerabilità verso il candidato vaccino peptidico HCV in volontari sani.
2. Testare l'immunità cellulo-mediata tramite risposte citotossiche dei linfociti T in soggetti sani vaccinati (CMI).
3. Determinazione della risposta epitopica specifica delle cellule B e dei titoli anticorpali in individui vaccinati (immunogenicità umorale).
4. Testare la neutralizzazione virale mediante anticorpi contro gli epitopi del vaccino. (Efficacia).
5. Studio della biodisponibilità dei peptidi nella circolazione dei soggetti durante il periodo di vaccinazione e 90 giorni dopo la vaccinazione.

iii) Popolazione in studio

I soggetti con problemi cardiovascolari, asma o allergie dovrebbero essere esclusi dallo studio. Inoltre, sarà escluso qualsiasi soggetto che abbia partecipato a qualsiasi sperimentazione clinica di medicina sperimentale negli ultimi 3 mesi. Verranno arruolati volontari sani compresi soggetti di entrambi i sessi, di età compresa tra 18 e 55 anni. Tutti i soggetti dovevano soddisfare tutti i criteri di inclusione come segue: mentalmente e fisicamente sani, nessun risultato patologico clinicamente rilevante in nessuna delle indagini dell'esame pre-studio, inclusi esami chimici del sangue (test di funzionalità epatica e renale), emocromo differenziale, test di coagulazione, livelli di proteina C-reattiva ultrasensibili. I soggetti dovrebbero essere in grado di fornire consensi informati scritti. I criteri di esclusione includevano donne in gravidanza o in allattamento, pazienti con infezioni virali croniche (ad es. HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), evidenza di malattia epatica scompensata, ematuria preesistente o proteinuria, livelli di crioglobulina >1% o altre malattie immunologiche, schistosomiasi, malattia infettiva acuta, gravi disturbi psichiatrici, storia attuale o passata di malignità e pazienti che hanno ricevuto un trattamento con interferone o qualsiasi terapia sperimentale per l'epatite durante i 3 mesi prima dell'ingresso nello studio.

iv) Consenso Ai volontari verrà fornito un foglio informativo scritto sul vaccino e sui requisiti di questa sperimentazione. Lo faranno

, in cambio, dare il consenso scritto a partecipare allo studio. I soggetti riceveranno un onorario per la loro partecipazione. Verranno inoltre forniti i soldi per il trasporto da e per l'ospedale.

v) Schemi dello studio: nello studio proposto, miriamo a valutare la tollerabilità, la sicurezza, l'immunogenicità e l'efficacia del vaccino peptidico Cenv3 in 112 volontari sani come studio clinico di fase 1 in aperto controllato con placebo. I parametri di tollerabilità e sicurezza includono i segni clinici (acuti e cronici), i test biochimici (funzione epatica e renale e altri parametri metabolici) e i test ematologici (tutti i parametri delle cellule del sangue). Verranno valutate sia le risposte umorali che cellulari ai protocolli di immunizzazione. Le capacità neutralizzanti di anticorpi specifici generati in risposta al vaccino saranno determinate anche dopo la vaccinazione.

vi) Vaccinazione

La preparazione del vaccino sarà eseguita secondo i principi delle buone pratiche di fabbricazione. I peptidi liofilizzati sono prodotti in un peptide antigenico multiplo a otto bracci (MAP) in una struttura commerciale specializzata nella sintesi di peptidi e nella modifica della struttura (ad es. AnaSpec USA). I peptidi saranno sciolti in PBS per uso umano. L'intera procedura sarà eseguita in aree sterilizzate dell'industria farmaceutica/vaccino (ad es. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a street Agouza). I peptidi liofilizzati saranno conservati in frigorifero normale, mentre i peptidi disciolti saranno conservati a -80 0 C come aliquote (in fiale sigillate ciascuna contenente 1 dose) pronte per l'iniezione e trasportate in ospedale in ghiaccio secco appena prima dell'uso. Nota: queste precauzioni per lo stoccaggio e il trasporto sono seguite durante queste prime fasi dello studio. Mentre la strategia verrebbe modificata su scala commerciale quando il prodotto attuale si dimostrerebbe efficace. In quest'ultimo caso una polvere liofilizzata con la dose consigliata sarà confezionata in ampolle sigillate e sciolta appena prima dell'uso. Il vaccino peptidico HCV Cenv3 verrà iniettato per via sottocutanea in 3 diverse dosi (1x cioè 324 ug, 2x cioè 648 ug o 3x 1296 ug/70 kgm di peso corporeo adulto). Va notato qui che la dose 1X equivale alla dose farmaceutica calcolata dagli esperimenti sui topi, quindi 324 ug/70 kg di peso corporeo è il livello di dose biologicamente efficace minimo disponibile (MABEL). Sulla base dell'esperienza di altri laboratori con la somministrazione di vaccini peptidici all'uomo (Tanaka e Manns) che hanno usato fino a 5000 ug di vaccino peptidico per i loro esperimenti di immunizzazione. La dose più alta utilizzata nel nostro protocollo è 4X (1296 ug/70 kg di peso corporeo) e quindi considerata il livello senza effetti avversi osservabili (NOAEL) in questo protocollo. Il vaccino verrà somministrato come forma MAP (autoadiuvante) o integrato con adiuvante (MF59) in un protocollo comune di iniezione mensile per 3 mesi consecutivi.

vii) Raccolta dei campioni

Tutte le procedure di immunizzazione e campionamento saranno eseguite presso l'Ahmed Maher Educational Hospital (MOH). L'arruolamento dei soggetti, il consenso, la vaccinazione, il campionamento e l'osservazione clinica dopo la vaccinazione saranno effettuati sotto stretta supervisione medica da parte di medici qualificati in ospedale. Verranno prelevati sette campioni di sangue dai soggetti prima della prima immunizzazione e nei giorni 30, 60, 90 (durante il periodo di vaccinazione) e nei giorni 135, 180 e 360 ​​successivi. Al giorno 360 soggetti saranno immunizzati con una dose di richiamo pari alla dose originaria somministrata allo stesso soggetto e verrà prelevato un 8° campione di sangue 30 giorni dopo la dose di richiamo. Ogni volta verranno prelevati 15 ml di sangue venoso. Otto ml verranno utilizzati per la separazione del siero per la determinazione della risposta umorale, i test di neutralizzazione e i test biochimici. Sette ml su EDTA per l'emocromo e la separazione dei linfociti per il test EliSpot.