Исследование безопасности и эффективности вакцины CENV3 для защиты от инфекции ВГС (CENV3)

В настоящей работе мы планируем изучить безопасность и эффективность пептидной вакцины Cenv3 (C для HCV, en для оболочки, v для вакцины, 3 для 3 эпитопов). Основные направления текущего исследования включают: 1) Изучение параметров безопасности на протяжении всего периода вакцинации, включая острые и хронические реакции, если они присутствуют в клиническом исследовании фазы 1 (т. е. у здоровых добровольцев). Вакцину вводят подкожно в 3 возрастающих дозах в присутствии и в отсутствие адъюванта. Также будет определяться биодоступность вакцины на протяжении всего эксперимента. 2) Оценка гуморального и клеточного иммунного ответа на Cenv3 у здоровых добровольцев (более высокий риск заражения ВГС). 3) Оценка нейтрализующей способности генерируемых антител препятствовать внутриклеточной репликации ВГС в пермиссивных клеточных линиях.

ii) Цель Настоящее предложение направлено на:

1. Изучение безопасности и переносимости пептидной вакцины-кандидата против ВГС у здоровых добровольцев.
2. Тестирование клеточно-опосредованного иммунитета через ответы цитотоксических Т-лимфоцитов у вакцинированных здоровых субъектов (CMI).
3. Определение эпитоп-специфического ответа В-клеток и титров антител у вакцинированных лиц (гуморальная иммуногенность).
4. Проверка нейтрализации вируса антителами против эпитопов вакцины. (Эффективность).
5. Изучение биодоступности пептидов в кровотоке субъектов на протяжении всего времени вакцинации и через 90 дней после вакцинации.

iii) Исследуемая популяция

Субъекты с любыми сердечно-сосудистыми заболеваниями, астмой или аллергией должны быть исключены из исследования. Кроме того, будут исключены все субъекты, участвовавшие в клинических испытаниях экспериментальных лекарственных средств за последние 3 месяца. В исследование будут включены здоровые добровольцы, в том числе представители обоих полов, в возрасте от 18 до 55 лет. Все испытуемые должны были соответствовать всем критериям включения, а именно: психически и физически здоровы, отсутствие клинически значимых патологических изменений ни в одном из исследований предварительного обследования, включая биохимический анализ крови (функциональные пробы печени и почек), дифференциальный анализ крови, тест на коагуляцию, сверхчувствительный уровень С-реактивного белка. Субъекты должны быть в состоянии предоставить письменное информированное согласие. Критериями исключения были беременные или кормящие грудью женщины, пациенты с хроническими вирусными инфекциями (например, HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), признаки декомпенсированного заболевания печени, ранее существовавшая гематурия или протеинурия, уровни криоглобулина >1% или другие иммунологически обусловленные заболевания, шистосомоз, острые инфекционные заболевания, тяжелые психические расстройства, злокачественные новообразования в настоящее время или в анамнезе, а также пациенты, получавшие лечение интерфероном или любую экспериментальную терапию гепатита в течение 3 месяцев до включения в исследование.

iv) Согласие Добровольцам будет предоставлен письменный информационный лист о вакцине и требованиях этого испытания. Они будут

, в свою очередь, дать письменное согласие на участие в исследовании. Субъектам будет выплачен гонорар за их участие. Им также будут предоставлены деньги на транспорт до больницы и обратно.

v) Планы исследования: В предлагаемом исследовании мы стремимся оценить переносимость, безопасность, иммуногенность и эффективность пептидной вакцины Cenv3 у 112 здоровых добровольцев в рамках плацебо-контролируемого открытого клинического исследования фазы 1. Параметры переносимости и безопасности включают клинические признаки (острые и хронические), биохимические анализы (функция печени и почек, а также другие метаболические параметры) и гематологические тесты (все параметры клеток крови). Будут оцениваться как гуморальные, так и клеточные ответы на протоколы иммунизации. Нейтрализующие способности специфических антител, образующихся в ответ на вакцину, также будут определяться после вакцинации.

в) вакцинация

Приготовление вакцины будет осуществляться в соответствии с принципами надлежащей производственной практики. Лиофилизированные пептиды производятся в виде восьмицепочечного множественного антигенного пептида (MAP) на коммерческом предприятии, специализирующемся на синтезе пептидов и модификации структуры (например, AnaSpec USA). Пептиды растворяют в PBS, предназначенном для человека. Вся процедура будет проводиться в стерилизованных помещениях фармацевтической/вакционной промышленности (например, VACSERA, Минздрав Везарет Аль-Зера, улица Агуза). Лиофилизированные пептиды будут храниться в обычном холодильнике, а растворенные пептиды будут храниться при -80°С в виде аликвот (в запечатанных ампулах, каждая содержит 1X дозу), готовых к инъекции, и доставлены в больницу в сухом льду непосредственно перед использованием. Примечание. Эти меры предосторожности при хранении и транспортировке соблюдаются на этих ранних этапах исследования. В то время как стратегия будет изменена в коммерческом масштабе, когда текущий продукт окажется эффективным. В последнем случае лиофилизированный порошок с рекомендуемой дозой будет упакован в запаянные ампулы и растворен непосредственно перед употреблением. Пептидная вакцина против ВГС Cenv3 будет вводиться подкожно в 3 различных дозах (1x, т.е. 324 мкг, 2x, т.е. 648 мкг или 3x 1296 мкг/масса тела 70 кг взрослому). Здесь следует отметить, что доза 1X равна рассчитанной фармацевтической дозе из экспериментов на мышах, поэтому 324 мкг/70 кг массы тела является минимально доступным биологически эффективным уровнем дозы (MABEL). Основано на опыте других лабораторий по введению пептидной вакцины человеку (Танака и Маннс), которые использовали до 5000 мкг пептидной вакцины для своих экспериментов по иммунизации. Самая высокая доза, используемая в нашем протоколе, составляет 4X (1296 мкг/70 кг массы тела), и поэтому в этом протоколе считается уровнем отсутствия наблюдаемых побочных эффектов (NOAEL). Вакцина будет вводиться либо в виде MAP-формы (самоадъювантная), либо с добавлением адъюванта (MF59) по общему протоколу ежемесячных инъекций в течение 3 месяцев подряд.

vii) Сбор проб

Все процедуры иммунизации и взятия проб будут проводиться в Образовательной больнице Ахмеда Махера (МЗ). Регистрация субъектов, их согласие, вакцинация, отбор образцов и клиническое наблюдение после вакцинации будут проводиться под пристальным медицинским наблюдением обученных клиницистов в больнице. Семь образцов крови будут взяты у субъектов до первой иммунизации, а также на 30, 60, 90 дни (во время периода вакцинации) и на 135, 180 и 360 дни после этого. На 360-й день субъекты будут иммунизированы бустерной дозой, равной исходной дозе, введенной тому же субъекту, и 8-й образец крови будет взят через 30 дней после бустерной дозы. Каждый раз будет забираться 15 мл венозной крови. Восемь мл будут использованы для отделения сыворотки для определения гуморального ответа, анализа нейтрализации и биохимического тестирования. Семь мл на ЭДТА для общего анализа крови и разделения лимфоцитов для анализа EliSpot.