Sicherheits- und Wirksamkeitsstudie des CENV3-Impfstoffs zum Schutz vor einer HCV-Infektion (CENV3)

In der vorliegenden Arbeit planen wir, die Sicherheit und Wirksamkeit eines Peptidimpfstoffs mit der Bezeichnung Cenv3 (C für HCV, en für Hülle, v für Impfstoff, 3 für 3 Epitope) zu untersuchen. Die wichtigsten Umrisse der aktuellen Studie umfassen: 1) Untersuchung der Sicherheitsparameter während der gesamten Impfperiode, einschließlich akuter und chronischer Reaktionen, falls in einer klinischen Phase-1-Studie (d. h. bei gesunden Probanden) vorhanden. Der Impfstoff wird subkutan in 3 ansteigenden Dosen mit und ohne Adjuvans verabreicht. Die Bioverfügbarkeit des Impfstoffs während der gesamten Versuchsdauer wird ebenfalls bestimmt. 2) Bewertung der humoralen und zellulären Immunantworten gegenüber Cenv3 bei gesunden Freiwilligen (höheres Risiko für den Erwerb einer HCV-Infektion). 3) Bewertung der neutralisierenden Kapazität der erzeugten Abs, die intrazelluläre Replikation von HCV in permissiven Zelllinien zu stören

ii) Ziel Der vorliegende Vorschlag zielt darauf ab:-

1. Untersuchung der Sicherheit und Verträglichkeit des HCV-Peptid-Impfstoffkandidaten bei gesunden Probanden.
2. Testen der zellvermittelten Immunität über zytotoxische T-Lymphozyten-Antworten bei geimpften gesunden Probanden (CMI).
3. Bestimmung der epitopspezifischen B-Zellantwort und Antikörpertiter bei geimpften Personen (humorale Immunogenität).
4. Testen der viralen Neutralisierung durch Antikörper gegen die Impfstoffepitope. (Wirksamkeit).
5. Untersuchung der Bioverfügbarkeit der Peptide im Kreislauf der Probanden während der Impfzeit und 90 Tage nach der Impfung.

iii) Studienpopulation

Personen mit kardiovaskulären Problemen, Asthma oder Allergien sollten von der Studie ausgeschlossen werden. Außerdem werden alle Probanden, die in den letzten 3 Monaten an einer klinischen Studie mit experimenteller Medizin teilgenommen haben, ausgeschlossen. Gesunde Freiwillige, darunter Probanden beiderlei Geschlechts, im Alter von 18 bis 55 Jahren, werden eingeschrieben. Alle Probanden mussten alle folgenden Einschlusskriterien erfüllen: geistig und körperlich gesund, keine klinisch relevanten pathologischen Befunde in allen Untersuchungen der Voruntersuchung einschließlich Blutchemie (Leber- und Nierenfunktionstests), Differenzialblutbild, Gerinnungstest, ultrasensitive C-reaktive Proteinspiegel. Die Probanden sollten in der Lage sein, schriftliche Einverständniserklärungen abzugeben. Zu den Ausschlusskriterien gehörten schwangere oder stillende Frauen, Patienten mit chronischen Virusinfektionen (z. B. HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), Anzeichen einer dekompensierten Lebererkrankung, vorbestehende Hämaturie oder Proteinurie, Kryoglobulinspiegel > 1 % oder andere immunologisch bedingte Krankheiten, Schistosomiasis, akute Infektionskrankheit, schwere psychiatrische Störungen, aktuelle oder vergangene Malignität und Patienten, die in den 3 Monaten vor Studienbeginn eine Behandlung mit Interferon oder einer anderen Prüftherapie gegen Hepatitis erhalten haben.

iv) Zustimmung Die Freiwilligen erhalten ein schriftliches Informationsblatt über den Impfstoff und die Anforderungen dieser Studie. Sie werden

geben im Gegenzug eine schriftliche Zustimmung zur Teilnahme an der Studie. Die Probanden erhalten für ihre Teilnahme ein Honorar. Sie erhalten auch Geld für den Transport zum und vom Krankenhaus.

v) Umrisse der Studie: In der vorgeschlagenen Studie zielen wir darauf ab, die Verträglichkeit, Sicherheit, Immunogenität und Wirksamkeit des Cenv3-Peptid-Impfstoffs bei 112 gesunden Freiwilligen als placebokontrollierte offene klinische Phase-1-Studie zu bewerten. Zu den Verträglichkeits- und Sicherheitsparametern gehören klinische Anzeichen (akut und chronisch), biochemische Tests (Leber- und Nierenfunktion sowie andere Stoffwechselparameter) und hämatologische Tests (alle Blutzellparameter). Sowohl humorale als auch zelluläre Reaktionen auf die Immunisierungsprotokolle werden bewertet. Die neutralisierenden Kapazitäten spezifischer Abs, die als Reaktion auf den Impfstoff erzeugt werden, werden auch nach der Impfung bestimmt.

vi) Impfung

Die Herstellung des Impfstoffs erfolgt nach den Grundsätzen der Guten Herstellungspraxis. Die lyophilisierten Peptide werden in einem achtarmigen multiplen antigenen Peptid (MAP) in einer kommerziellen Anlage hergestellt, die auf Peptidsynthese und Strukturmodifikation spezialisiert ist (z. B. AnaSpec USA). Peptide werden in PBS für den menschlichen Gebrauch gelöst. Das gesamte Verfahren wird in sterilisierten Bereichen der Arzneimittel-/Impfstoffindustrie (z. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a Straße Agouza). Die lyophilisierten Peptide werden im normalen Kühlschrank gelagert, während gelöste Peptide bei –80°C als Aliquots (in versiegelten Ampullen enthalten jeweils 1X Dosis) bereit für die Injektion gelagert und unmittelbar vor der Verwendung in Trockeneis ins Krankenhaus transportiert werden. Hinweis: Diese Lagerungs- und Transportvorkehrungen werden während dieser frühen Phasen der Studie befolgt. Während die Strategie im kommerziellen Maßstab modifiziert werden würde, wenn sich das aktuelle Produkt als wirksam erweist. In diesem letzteren Fall wird ein gefriergetrocknetes Pulver mit der empfohlenen Dosis in versiegelten Ampullen verpackt und kurz vor der Verwendung aufgelöst. Der HCV-Peptid-Impfstoff Cenv3 wird subkutan in 3 verschiedenen Dosen injiziert (1x d.h. 324 ug, 2x d.h. 648 ug oder 3x 1296 ug/ Erwachsener mit 70 kg Körpergewicht). Es sollte hier beachtet werden, dass die 1X-Dosis der berechneten pharmazeutischen Dosis aus Mausversuchen entspricht, daher ist 324 ug/70 kg Körpergewicht die minimal verfügbare biologisch wirksame Dosis (MABEL). Basierend auf der Erfahrung anderer Laboratorien mit der Verabreichung von Peptid-Impfstoffen an Menschen (Tanaka und Manns), die bis zu 5000 ug Peptid-Impfstoff für ihre Immunisierungsexperimente verwendeten. Die höchste Dosis, die in unserem Protokoll verwendet wird, ist 4X (1296 ug/70 kg Körpergewicht) und wird daher in diesem Protokoll als No Observable Adverse Effect Level (NOAEL) betrachtet. Der Impfstoff wird entweder als MAP-Form (selbstadjuvantiert) oder ergänzt mit Adjuvans (MF59) in einem gemeinsamen Protokoll mit monatlicher Injektion für 3 aufeinanderfolgende Monate verabreicht.

vii) Probenentnahme

Alle Immunisierungs- und Probenahmeverfahren werden im Ahmed Maher Educational Hospital (MOH) durchgeführt. Die Patientenaufnahme, Zustimmung, Impfung, Probenahme und klinische Beobachtung nach der Impfung werden unter strenger medizinischer Überwachung durch geschulte Kliniker im Krankenhaus durchgeführt. Sieben Blutproben werden den Probanden vor der ersten Immunisierung und an den Tagen 30, 60, 90 (während der Impfperiode) und den Tagen 135, 180 und 360 danach entnommen. Am Tag 360 werden Probanden mit einer Auffrischungsdosis immunisiert, die der ursprünglichen Dosis entspricht, die demselben Probanden verabreicht wurde, und eine 8. Blutprobe wird 30 Tage nach der Auffrischungsdosis entnommen. Es werden jeweils 15 ml venöses Blut abgenommen. Acht ml werden für die Serumtrennung zur Bestimmung der humoralen Reaktion, für Neutralisationsassays und biochemische Tests verwendet. Sieben ml auf EDTA für die CBC- und Lymphozytentrennung für den EliSpot-Assay.