Sikkerhets- og effektstudie av CENV3-vaksine for å beskytte mot HCV-infeksjon (CENV3)

I dette arbeidet planlegger vi å studere sikkerheten og effekten av en peptidvaksine kalt Cenv3 (C for HCV, en for envelop, v for vaksine, 3 for 3 epitoper). Hovedkonturene av den nåværende studien inkluderer: 1) Undersøkelse av sikkerhetsparametrene gjennom vaksinasjonsperioden, inkludert akutte og kroniske reaksjoner hvis de er tilstede i en fase 1 klinisk studie (dvs. hos friske frivillige). Vaksinen vil bli administrert sc ved 3 økende doser i nærvær og fravær av adjuvans. Biotilgjengeligheten av vaksinen gjennom hele eksperimentets varighet vil også bli bestemt. 2) Vurdering av de humorale og cellulære immunresponsene mot Cenv3 hos friske frivillige (høyere risiko for å få HCV-infeksjon). 3) Evaluering av den nøytraliserende kapasiteten til de genererte abs til å forstyrre intracellulær replikasjon av HCV i permissive cellelinjer

ii) Mål Forslaget tar sikte på:-

1. Undersøker sikkerhet og tolerabilitet overfor kandidaten HCV-peptidvaksine hos friske frivillige.
2. Testing av cellemediert immunitet via cytotoksiske T-lymfocyttresponser hos vaksinerte friske personer (CMI).
3. Bestemmelse av epitopspesifikk B-cellerespons og antistofftitere hos vaksinerte individer (humoral immunogenisitet).
4. Testing av viral nøytralisering av antistoffer mot vaksineepitopene. (Effektivitet).
5. Studier av biotilgjengeligheten til peptidene i forsøkspersonens sirkulasjon gjennom vaksinasjonstiden og 90 dager etter vaksinasjon.

iii) Studiepopulasjon

Personer med kardiovaskulære problemer, astma eller allergier bør ekskluderes fra studien. Alle forsøkspersoner som har deltatt i en klinisk utprøving av eksperimentell medisin i løpet av de siste 3 månedene vil bli ekskludert. Friske frivillige inkludert forsøkspersoner fra begge kjønn, 18-55 år vil bli påmeldt. Alle forsøkspersonene måtte oppfylle alle inklusjonskriteriene som følger: mentalt og fysisk friske, ingen klinisk relevante patologiske funn i noen av undersøkelsene av forstudien inkludert blodkjemi (lever- og nyrefunksjonsprøver), differensiell blodtelling, koagulasjonstest, ultrasensitive C-reaktive proteinnivåer. Forsøkspersoner bør kunne gi skriftlige informerte samtykker. Eksklusjonskriteriene inkluderte gravide eller ammende kvinner, pasienter med kroniske virusinfeksjoner (f.eks. HBV, HCV, HIV, CMV, HSV), tegn på dekompensert leversykdom, allerede eksisterende hematuri eller proteinuri, kryoglobulinnivåer >1 % eller andre immunologisk drevne sykdommer, schistosomiasis, akutt infeksjonssykdom, alvorlige psykiatriske lidelser, nåværende eller tidligere historie med malignitet og pasienter som har mottatt behandling med interferon eller annen undersøkelsesbehandling for hepatitt i løpet av de 3 månedene før studiestart.

iv) Samtykke De frivillige vil få et skriftlig informasjonsark om vaksinen og kravene til denne utprøvingen. De vil

, til gjengjeld gi skriftlig samtykke til å delta i studien. Fagene vil få honorar for sin deltakelse. De vil også få transportpenger til og fra sykehuset.

v) Oversikt over studien: I den foreslåtte studien tar vi sikte på å evaluere tolerabilitet, sikkerhet, immunogenisitet og effekt av Cenv3 peptidvaksine hos 112 friske frivillige som en placebokontrollert åpen merket fase 1 klinisk studie. Tolerabilitets- og sikkerhetsparametere inkluderer kliniske tegn (akutt og kronisk), biokjemiske analyser (lever- og nyrefunksjoner samt andre metabolske parametere) og hematologiske tester (alle blodcelleparametre). Både humorale og cellulære responser på immuniseringsprotokollene vil bli evaluert. Nøytraliseringskapasiteten til spesifikke Abs generert som respons på vaksinen vil også bli bestemt etter vaksinasjon.

vi) Vaksinasjon

Forberedelse av vaksine vil bli utført under prinsippene for god produksjonspraksis. De lyofiliserte peptidene produseres i et åttearms multippelt antigent peptid (MAP) i et kommersielt anlegg spesialisert på peptidsyntese og strukturmodifisering (f.eks. AnaSpec USA). Peptider vil bli oppløst i PBS laget for menneskelig bruk. Hele prosedyren vil bli utført i steriliserte områder av legemiddel-/vaksineindustrien (f.eks. VACSERA, MOH Wezaret Al Zera'a gaten Agouza). De lyofiliserte peptidene vil bli lagret i vanlig kjøleskap, mens oppløste peptider vil bli lagret ved -80 0 C som alikvoter (i forseglede ampuller hver inneholder 1X dose) klare for injeksjon og transportert til sykehus i tørris rett før bruk. Merk: Disse forholdsreglene for lagring og transport følges i disse tidlige stadiene av studien. Mens strategien vil bli endret i kommersiell skala når det nåværende produktet viser seg effektivt. I dette senere tilfellet vil et lyofilisert pulver med anbefalt dose pakkes i forseglede ampuller og løses opp rett før bruk. HCV-peptidvaksine Cenv3 vil bli injisert subkutant i 3 forskjellige doser (1x dvs. 324 ug, 2x dvs. 648 ug eller 3x 1296 ug/70 kgm kroppsvekt voksen). Det skal bemerkes her at dose 1X tilsvarer den beregnede farmasøytiske dosen fra museksperimenter, derfor er 324 ug/70 kg kroppsvekt minimum tilgjengelig biologisk effektiv dosenivå (MABEL). Basert på erfaring fra andre laboratorier med peptidvaksineadministrasjon til mennesker (Tanaka og Manns) som brukte opptil 5000 ug peptidvaksine for sine immuniseringsforsøk. Den høyeste dosen som brukes i vår protokoll er 4X (1296 ug/70 kg kroppsvekt) og anses derfor som NOAEL (No Observable Adverse Effect Level) i denne protokollen. Vaksinen vil bli administrert enten som en MAP-form (selvadjuvant) eller supplert med adjuvans (MF59) i en felles protokoll med månedlig injeksjon i 3 måneder på rad.

vii) Prøveinnsamling

Alle immuniserings- og prøvetakingsprosedyrer vil bli utført på Ahmed Maher Educational Hospital (MOH). Registrering, samtykke, vaksinasjon, prøvetaking og klinisk observasjon etter vaksinasjon vil bli gjort under tett medisinsk tilsyn av utdannede klinikere på sykehuset. Syv blodprøver vil bli tatt fra forsøkspersoner før første vaksinasjon og på dag 30, 60, 90 (i vaksinasjonsperioden) og på dagene 135, 180 og 360 deretter. På dag 360 vil forsøkspersonene immuniseres med en boosterdose lik den opprinnelige dosen gitt til samme forsøksperson, og en åttende blodprøve vil bli tatt 30 dager etter boosterdosen. Hver gang tas 15 ml veneblod ut. Åtte ml vil bli brukt til serumseparasjon for humoral responsbestemmelse, nøytraliseringsanalyser og biokjemisk testing. Syv ml på EDTA for CBC og lymfocyttseparasjon for EliSpot-analyse.