Yöllisen LH:n nousun progesteronin estäminen murrosikäisillä tytöillä (JCM017)

Rekrytoimme varhaisen murrosiän, premenarkeaalisia nuoria tyttöjä, koska nämä vaiheet liittyvät LH-sykettävyyden merkittävimpiin vuorokausivaihteluihin (13). Paino on normaali pituuden suhteen (eli BMI ≤ 85. ja ≥ 5. prosenttipiste iän mukaan CDC:n mukaan) ja plasman testosteroni on < 40 ng/dl. Rekrytoimme normaaleja teini-ikäisiä tyttöjä tai tyttöjä, joilla on idiopaattinen lyhytkasvuisuus (> 2 SD alle iän keskipituuden ilman tunnistettavaa syytä) UVa Pediatric Clinics -klinikoista, paikallisista lastenklinikoista, Teen Health Centeristä ja UVa Endokriiniset Clinicsistä. Koehenkilöt ovat myöhässä Tanner 1 (määritelty estradiolitaso > 20 pg/ml), Tanner 2 tai Tanner 3. Kaikille mahdollisille koehenkilöille tehdään seulontahistoria ja fyysinen seulonta ennen ilmoittautumista. Nämä 60–90 minuutin avohoitokäynnit CRU:ssa tai vaihtoehtoisessa UVA-kliinisessä yksikössä varmistavat yleisen terveyden ja kehityksen normaalin. Arviointi sisältää täydellisen henkilökohtaisen ja perheen sairaushistorian ja fyysisen tutkimuksen (mukaan lukien pituuden, painon ja murrosiän määritys Tanner-asteikolla). Tutkimuksen tavoitteet ja menettelytavat selitetään mahdollisille koehenkilöille ja heidän vanhemmilleen sekä kysymyksiä herätetään. Vapaaehtoinen ja hänen vanhempansa allekirjoittavat suostumuslomakkeen. Sitten otetaan verta (20 ml) (noin. 0800-0900 h) seuraaviin kokeisiin: LH, FSH, P, E2, kokonaistestosteroni, SHBG, DHEA-S, 17-OHP, beeta-hCG, TSH, CBC, kemia ja maksapaneelit, prolaktiini, insuliini, Insuliini- kuten kasvutekijä 1 (IGF-1) ja sytokiinit ja adipokiinit (mukaan lukien adiponektiini, leptiini, resistiini, PAI-1, IL-1b, IL-6, IL-8, TNFa, MCP-1, HGF ja NGF). Koehenkilöiden tulee paastota vähintään 8 tuntia ennen seulontaverenottoa. Luuston ikä (vasemman käden ja ranteen pelkkä röntgenkuvaus) tehdään myös biologisen iän merkkinä, koska murrosikä korreloi yleensä paremmin luuiän kuin kronologisen iän kanssa.

Jos seulontalaboratorioissa hemoglobiini on < 11,0 g/dl afrikkalaisamerikkalaisilla koehenkilöillä tai hemoglobiini < 11,5 g/dl ei-afrikkalaisilla koehenkilöillä, rautahoitoa annoksella 1–2 mg/kg suositellaan 60 päivän ajan. Koehenkilöille, jotka painavat ≤ 36 kg, annetaan suun kautta 300-325 mg rautaglukonaattia päivittäin (sisältää 36 mg alkuainerautaa); > 36 kg painaville koehenkilöille annetaan suun kautta 300-325 mg rautaglukonaattia kahdesti päivässä. Hemoglobiini tarkistetaan sitten uudelleen CRU:ssa tai kliinisessä yksikössä; Jos se on hyväksyttävää (hemoglobiini ≥ 11 g/dl afrikkalaisilla koehenkilöillä tai hemoglobiini ≥ 11,5 g/dl ei-afrikkalaisilla koehenkilöillä), sovitaan sairaalahoito.

Jos seulontalaboratoriot ovat normaaleja, annetaan rautalisää annoksella 1-2 mg/kg 30 päivän ajan estämään anemian kehittyminen tutkimuksen aikana. Koehenkilöille, jotka painavat ≤ 36 kg, annetaan suun kautta 300-325 mg rautaglukonaattia päivittäin (sisältää 36 mg alkuainerautaa); > 36 kg painaville koehenkilöille annetaan suun kautta 300-325 mg rautaglukonaattia kahdesti päivässä.

Jos turvallisuuslaboratoriot ovat poikkeavia seulonnan aikana (esim. epänormaalit maksakokeet, epänormaali TSH), koehenkilöitä pyydetään palaamaan kerran toistuvaan (vahvistavaan) laboratorioon laboratoriovirheiden poissulkemiseksi. Uusintatestaus suoritetaan yleensä kuukauden sisällä alkuperäisestä seulontalaboratorion arvonnasta. Jos poissulkevat laboratorioarvot vahvistetaan tällaisessa toistuvassa testauksessa, koehenkilöt suljetaan pois osallistumisesta.

1-3 päivää ennen yöpymistä: Verinäyte otetaan avohoidosta 1-3 vrk ennen yön yli vastaanottoa. Plasma P tarkistetaan epätodennäköisen luteaalivaiheen poissulkemiseksi, ja yön yli anto perutaan, jos P ylittää 1,5 ng/ml. Hemoglobiini otetaan, jos niitä ei ole saatu 30 päivän kuluessa yön yli ottamisesta (myöhempi yön yli pääsy perutaan, jos hemoglobiini < 11 g/dl afroamerikkalaisilla koehenkilöillä tai < 11,5 g/dl ei-afrikkalaisilla koehenkilöillä). Virtsan beeta-HCG arvioidaan raskauden poissulkemiseksi. Jos kolme kuukautta on kulunut yön yli käynnin ja tutkittavan viimeisimmän turvallisuuslaboratorion välillä, hankitaan lisää turvallisuuslaboratorioita (kemian ja maksan paneeli) tällä hetkellä.

Sairaalahoito: Koehenkilöt otetaan CRU:hun, vaihtoehtoiseen UVA-sairaalan yksikköön tai hotellin ulkopuolelle klo 14.00. Yleensä vanhemmat voivat halutessaan majoittua lapsensa kanssa hotellin ulkopuolella. Jos tutkimuksen yöpyminen on tarkoitus tehdä hotellin ulkopuolella, tutkittava voi jäädä ilman vanhempaa tai laillista huoltajaa, kunhan paikalla on kaksi CRU:n työntekijää. Siitä, tarvitseeko vanhemman jäädä yöpymisen ajaksi, keskustellaan vierailun aikana. i.v. viiva sijoitetaan kyynärvarren laskimoon (tätä voi helpottaa EMLA-voide), mikäli mahdollista, samalle puolelle kuin hallitseva käsi. Koehenkilöt ottavat 25-50 mg suun kautta mikronisoitua P:tä tai lumelääkettä klo 1600 ja uudelleen klo 2000. P-annostus perustuu painoon: 25 mg tytöille, joiden paino on < 42 kg, ja 50 mg tytöille, jotka painavat ≥ 42 kg; P-annoksella pyrimme tuottamaan noin 2-3 ng/ml:n keskimääräiset P-pitoisuudet. Säännöllinen verinäytteenotto alkaa klo 19.00 ja jatkuu 14 tuntia seuraavasti: LH 10 minuutin välein (1 ml); ja FSH 10 minuutin välein (ei vaadi ylimääräistä verta); P, E2, T, DHEA ja kortisoli 30 minuutin välein (1 ml). Ylimääräinen 0,3 cc:n näyte otetaan klo 7.00 paastoglukoosin testaamiseksi. Paastoinsuliini, SHBG, estroni, androsteenidioni, DHEA-S suoritetaan yhdistetyille näytteille klo 05.00-07.00.

Valot sammutetaan klo 2200 helpottamaan nukkumista, minkä koulutetut tarkkailijat tallentavat huolellisesti. Verinäytteenoton aikana aktiivisuus (esim. hereillä, nukkumassa) tallentaa hoitaja 10 minuutin välein. Lisäksi unijaksot arvioidaan käyttämällä ranteen aktivointia (Motionlogger Basic-L; Ambulatory Monitoring, Inc.) Motionlogger Basic-L on kellomainen laite (jossa on kiihtyvyysanturi), jota tutkimukseen osallistuja pitää ei-dominoivassa ranteessa yön yli pääsyn aikana. Yön paasto pidetään klo 22.00-07.00. Koehenkilöt herätetään klo 07.00. Näytteenotto päättyy klo 09.00.

Vastaanoton aikana otetaan ~150 ml verta (sisältäen 0,25 ml hävitettävän näytteen kanssa). Veren kokonaismäärä, joka otetaan tutkimuksen aikana, mukaan lukien seulonta, avohoito P-näytteenotto ja sairaalahoito, on ~170 ml. Toinen vanhemmista saa yöpyä tutkittavan luona sisäänpääsyn aikana. Kun viimeinen näyte on otettu, vapaaehtoiset kotiutetaan suun kautta otettavaan rautalisähoitoon 30 päivän ajan.

Seuranta:

Pyrimme seuraamaan koehenkilöitä (avohoidon CRU- tai klinikkakäyntien kautta) 6–12 kuukauden välein enintään 3 vuoden ajan arvioidaksemme murrosiän etenemistä, kuukautisten alkamista ja tiheyttä sekä hyperandrogenismin merkkien kehittymistä (esim. hirsutismi). Otamme verta LH:lle, FSH:lle, E2:lle, P:lle ja T:lle näiden seurantakäyntien aikana. Näitä seurantakäyntejä kannustetaan, mutta ne eivät ole pakollisia.