Az éjszakai LH-növekedés progeszteron-szuppressziója a pubertás korú lányoknál (JCM017)

Korai pubertás, premenarchealis serdülő lányokat fogunk toborozni, mivel ezek a szakaszok kapcsolódnak az LH pulzatilitásának legszembetűnőbb napi változásaihoz (13). A testtömeg normális lesz a magassághoz képest (azaz a BMI ≤ 85. és ≥ 5. percentilis az életkor szerint a CDC szerint), a plazma tesztoszteron pedig < 40 ng/dl. Normál serdülő vagy idiopátiás alacsony termetű lányokat fogunk felvenni (> 2 SD-vel az átlagmagasság alatt, azonosítható ok nélkül) az UVa Gyermekgyógyászati ​​Klinikákról, a helyi gyermekgyógyászati ​​klinikákról, a Teen Health Centertől és az UVa Endokrin Klinikától. Az alanyok késői Tanner 1 (az ösztradiolszint > 20 pg/ml), Tanner 2 vagy Tanner 3 lesz. A beiratkozás előtt minden potenciális alany átesik a szűrés anamnézisén és a fizikai vizsgálaton. Ezek a 60-90 perces járóbeteg-látogatások a CRU-ban vagy az alternatív UVA-klinikai részlegben megalapozzák az általános egészségi és fejlődési normális állapotot. Az értékelés magában foglalja a teljes személyes és családi kórtörténetet és fizikális vizsgálatot (beleértve a magasságot, súlyt és a pubertás szakasz meghatározását a Tanner skála segítségével). A vizsgálat céljait és eljárásait elmagyarázzák a potenciális alanyoknak és szüleiknek, és kérdéseket tesznek fel. Az önkéntes és szülei aláírják a hozzájáruló és beleegyező íveket. Ezután vért (20 ml) vesznek (kb. 0800-0900 h) a következő vizsgálatokhoz: LH, FSH, P, E2, teljes tesztoszteron, SHBG, DHEA-S, 17-OHP, béta-hCG, TSH, CBC, kémia és májpanelek, prolaktin, inzulin, inzulin- mint a növekedési faktor 1 (IGF-1), valamint a citokinek és adipokinek (beleértve az adiponektint, leptint, rezisztint, PAI-1-et, IL-1b-t, IL-6-ot, IL-8-at, TNFa-t, MCP-1-et, HGF-et és NGF-et). Az alanyoknak legalább 8 órán át koplalniuk kell a vérvétel előtt. A csontkor (bal kéz és csukló sima röntgenfelvétele) szintén a biológiai életkor jelzőjeként kerül elvégzésre, mivel a pubertás állapot általában jobban korrelál a csontéletkorral, mint a kronológiai életkor.

Ha a szűrőlaboratóriumok hemoglobint < 11,0 g/dl afro-amerikai alanyoknál, vagy hemoglobint < 11,5 g/dl-t nem afroamerikai alanyoknál, akkor 1-2 mg/ttkg vasterápia javasolt 60 napig. A ≤ 36 kg testtömegű alanyok naponta 300-325 mg vas-glükonátot kapnak szájon át (36 mg elemi vasat tartalmazva); a 36 kg-nál nagyobb testtömegű alanyok naponta kétszer 300-325 mg vas-glükonátot kapnak szájon át. A hemoglobint ezután újra ellenőrzik a CRU-ban vagy a klinikai egységben; ha elfogadható (afro-amerikai alanyoknál hemoglobin ≥ 11 g/dl vagy nem afroamerikai alanyoknál hemoglobin ≥ 11,5 g/dl), a fekvőbeteg-felvételt ütemezzük.

Ha a szűrőlaboratóriumok normálisak, 30 napig 1-2 mg/ttkg vaspótlást adnak, hogy megakadályozzák a vérszegénység kialakulását a vizsgálat során. A ≤ 36 kg testtömegű alanyok naponta 300-325 mg vas-glükonátot kapnak szájon át (36 mg elemi vasat tartalmazva); a 36 kg-nál nagyobb testtömegű alanyok naponta kétszer 300-325 mg vas-glükonátot kapnak szájon át.

Ha a biztonsági laboratóriumok kórosak a szűrés során (pl. kóros májtesztek, kóros TSH), az alanyokat felkérik, hogy egyszer térjenek vissza ismételt (megerősítő) laborvizsgálatra, hogy kizárják a laborhibákat. Az ismételt vizsgálatra általában az eredeti szűrési labor sorsolástól számított egy hónapon belül kerül sor. Ha az ilyen ismételt vizsgálat során a kizáró laboratóriumi értékek megerősítést nyernek, az alanyokat kizárják a részvételből.

1-3 nappal az éjszakai felvétel előtt: 1-3 nappal az éjszakai felvétel előtt ambuláns vérmintát vesznek. A plazma P-t ellenőrizni fogják, hogy kizárják a valószínűtlen luteális fázist, és az éjszakai beadást megszakítják, ha a P meghaladja az 1,5 ng/ml-t. A hemoglobint gyűjtik, ha ezeket az éjszakai felvételt követő 30 napon belül nem szerezték be (a későbbi éjszakai felvételt törölni kell, ha a hemoglobin < 11 g/dl afroamerikai alanyoknál vagy < 11,5 g/dl a nem afroamerikai alanyoknál). A vizelet béta-HCG-jét a terhesség kizárása érdekében értékelik. Ha három hónap telt el az éjszakai felvétel és az alany legutóbbi biztonsági laborjai között, akkor további biztonsági laborokat (kémia és májpanel) szereznek be.

Fekvőbeteg-felvétel: Az alanyokat 14:00 órakor veszik fel a CRU-ba, az alternatív UVA-kórházi részlegbe vagy a külső szállodába. Általában a szülők szívesen szállhatnak meg gyermekükkel a külső szállodában, ha kívánnak. Ha a vizsgálat egy éjszakás részét egy nem helyszíni szállodában kell elvégezni, az alany szülő vagy törvényes gyám nélkül maradhat, ha a CRU két munkatársa jelen van. Azt, hogy a szülőnek maradnia kell-e az éjszakai felvétel alatt, a látogatás ütemezése során megbeszéljük. Egy i.v. vonalat helyezzük az alkar vénájába (ezt az EMLA krém segítheti elő), lehetőség szerint a domináns kéz oldalára. Az alanyok 25-50 mg orális mikronizált P-t vagy placebót kapnak 1600 órától, majd 2000 órától ismét. A P-adagolás a testtömeg alapján történik: 25 mg-ot adnak be a 42 kg-nál kisebb testtömegű lányoknak, és 50 mg-ot adnak a 42 kg-nál nagyobb testsúlyúaknak; P beadásával kb. 2-3 ng/ml átlagos P koncentrációt szeretnénk elérni. A gyakori vérvétel 19:00-kor kezdődik és 14 órán keresztül folytatódik az alábbiak szerint: LH 10 percenként (1 ml); és FSH 10 percenként (nincs szükség további vérre); P, E2, T, DHEA és kortizol 30 percenként (1 ml). 07:00-kor további 0,3 cm3-es mintát vesznek az éhgyomri glükóz meghatározásához. Az éhgyomri inzulint, az SHBG-t, az ösztront, az androszténdiont, a DHEA-S-t egyesített mintákon 05:00 és 07:00 óra között végezzük.

A lámpákat 22:00 órakor kioltják az alvás megkönnyítése érdekében, amelyet képzett megfigyelők gondosan rögzítenek. A vérvétel során az aktivitás (pl. ébren van, alszik) 10 percenként rögzíti a nővér. Ezenkívül az alvási periódusokat csukló aktigráfia segítségével becsülik meg (Motionlogger Basic-L; Ambulatory Monitoring, Inc.) A Motionlogger Basic-L egy óraszerű eszköz (amely gyorsulásmérőt is tartalmaz), amelyet a kutatásban résztvevő nem domináns csuklóján fog viselni az éjszakai felvétel során. Éjszakai böjt lesz 22:00 és 07:00 között. Az alanyokat 07:00-kor ébresztik fel. A mintavétel 09:00-kor leáll.

A felvétel során ~150 ml vért veszünk (ebből minden mintával 0,25 ml-t eldobunk). A vizsgálat során, beleértve a szűrést, a járóbeteg P-mintavételt és a fekvőbeteg-felvételt is, a teljes vérmennyiség ~170 ml. A felvétel ideje alatt az egyik szülő éjszakára az alanynál maradhat. Az utolsó minta levétele után az önkénteseket orális vaspótlásra bocsátják, és 30 napig kell bevenniük.

Nyomon követés:

Minden erőfeszítést megteszünk annak érdekében, hogy 6-12 hónapos időközönként (ambuláns CRU-n vagy klinikai látogatáson keresztül) legfeljebb 3 évig követjük az alanyokat a pubertás előrehaladásának, a menstruáció kezdetének és gyakoriságának, valamint a hiperandrogenizmus jeleinek (pl. hirsutizmus). Ezen nyomon követési vizitek során vért veszünk LH-ra, FSH-ra, E2-re, P-re és T-re. Ezeket az utólagos látogatásokat ösztönzik, de nem kötelezőek.