Soppressione del progesterone degli aumenti notturni di LH nelle ragazze puberali (JCM017)

Recluteremo ragazze adolescenti pre-puberali, premenarcali, poiché questi stadi sono associati alle più importanti variazioni diurne nella pulsatilità dell'LH (13). Il peso sarà normale per l'altezza (cioè, BMI ≤ 85° e ≥ 5° percentile per l'età secondo il CDC) e il testosterone plasmatico sarà < 40 ng/dl. Recluteremo ragazze adolescenti normali o ragazze con bassa statura idiopatica (> 2 DS sotto l'altezza media per età senza causa identificabile), dalle cliniche pediatriche UVa, dalle cliniche pediatriche locali, dal Teen Health Center e dalle cliniche endocrine UVa. I soggetti saranno in ritardo Tanner 1 (definito come avente un livello di estradiolo > 20 pg/mL), Tanner 2 o Tanner 3. Tutti i potenziali soggetti saranno sottoposti a screening anamnestico e fisico prima dell'arruolamento. Queste visite ambulatoriali di 60-90 minuti alla CRU o all'unità clinica UVA alternativa stabiliranno la salute generale e la normalità dello sviluppo. La valutazione includerà una storia medica personale e familiare completa e un esame fisico (compresa la determinazione dell'altezza, del peso e dello stadio puberale utilizzando la scala di Tanner). Gli obiettivi e le procedure dello studio saranno spiegati ai potenziali soggetti e ai loro genitori, e saranno prese in considerazione le domande. La volontaria ei suoi genitori firmeranno rispettivamente i moduli di assenso e consenso. Il sangue (20 ml) verrà quindi prelevato (a ca. 0800-0900 h) per i seguenti test: LH, FSH, P, E2, testosterone totale, SHBG, DHEA-S, 17-OHP, beta-hCG, TSH, CBC, chimica e pannelli epatici, prolattina, insulina, insulina- come il fattore di crescita 1 (IGF-1) e le citochine e le adipochine (tra cui adiponectina, leptina, resistina, PAI-1, IL-1b, IL-6, IL-8, TNFa, MCP-1, HGF e NGF). I soggetti dovranno digiunare per un minimo di 8 ore prima dello screening del prelievo di sangue. Anche l'età ossea (radiografia semplice della mano sinistra e del polso) verrà eseguita come indicatore dell'età biologica, poiché lo stadio puberale generalmente si correla meglio con l'età ossea rispetto all'età cronologica.

Se i laboratori di screening mostrano un'emoglobina < 11,0 g/dL per i soggetti afroamericani o un'emoglobina < 11,5 g/dL per i soggetti non afroamericani, sarà incoraggiata la terapia con ferro alla dose di 1-2 mg/kg per 60 giorni. Ai soggetti di peso ≤ 36 kg verranno somministrati giornalmente 300-325 mg di gluconato ferroso orale (contenente 36 mg di ferro elementare); ai soggetti di peso > 36 kg verranno somministrati 300-325 mg di gluconato ferroso per via orale due volte al giorno. L'emoglobina verrà quindi ricontrollata nella CRU o nell'unità clinica; se accettabile (emoglobina ≥ 11 g/dL per i soggetti afroamericani o emoglobina ≥ 11,5 g/dL per i soggetti non afroamericani), verrà programmato il ricovero ospedaliero.

Se i laboratori di screening sono normali, verrà somministrata un'integrazione di ferro alla dose di 1-2 mg/kg per 30 giorni per aiutare a prevenire lo sviluppo di anemia durante lo studio. Ai soggetti di peso ≤ 36 kg verranno somministrati giornalmente 300-325 mg di gluconato ferroso orale (contenente 36 mg di ferro elementare); ai soggetti di peso > 36 kg verranno somministrati 300-325 mg di gluconato ferroso per via orale due volte al giorno.

Se i laboratori di sicurezza sono anormali durante lo screening (ad esempio, test epatici anormali, TSH anormale), ai soggetti verrà chiesto di tornare una volta per i laboratori ripetuti (conferma) per escludere l'errore di laboratorio. La ripetizione del test avverrà generalmente entro un mese dall'estrazione originale del laboratorio di screening. Se i valori di laboratorio di esclusione sono confermati su tali test ripetuti, i soggetti saranno esclusi dalla partecipazione.

1-3 giorni prima del ricovero notturno: verrà prelevato un campione di sangue ambulatoriale 1-3 giorni prima del ricovero notturno. La P plasmatica verrà controllata per escludere un'improbabile fase luteinica, con ricovero notturno annullato se P supera 1,5 ng/ml. L'emoglobina sarà ottenuta se questi non sono stati ottenuti entro 30 giorni dal ricovero notturno (successivo ricovero notturno annullato se emoglobina < 11 g/dl per soggetti afroamericani o < 11,5 g/dL per soggetti non afroamericani). La beta-HCG delle urine sarà valutata per escludere la gravidanza. Se sono trascorsi tre mesi tra un ricovero notturno e gli ultimi laboratori di sicurezza del soggetto, in questo momento verranno ottenuti ulteriori laboratori di sicurezza (chimica e pannello epatico).

Ammissione ospedaliera: i soggetti saranno ammessi alla CRU, all'unità ospedaliera UVA alternativa o all'hotel fuori sede alle 14:00. In generale, i genitori sono invitati a soggiornare con i propri figli presso l'hotel esterno, se lo desiderano. Se la parte notturna dello studio deve essere svolta in un hotel fuori sede, il soggetto può rimanere senza un genitore o tutore legale, purché siano presenti due membri del personale CRU. La necessità o meno di un genitore di rimanere durante il ricovero notturno verrà discussa al momento della programmazione della visita. Un'i.v. linea da posizionare nella vena dell'avambraccio (questo può essere facilitato dalla crema EMLA), sullo stesso lato della mano dominante, se possibile. I soggetti assumeranno 25-50 mg di P micronizzato per via orale o placebo a 1600 h e di nuovo a 2000 h. Il dosaggio P sarà basato sul peso, con 25 mg somministrati a ragazze < 42 kg e 50 mg somministrati a quelle ≥ 42 kg; con la somministrazione di P, miriamo a produrre concentrazioni medie di P di circa 2-3 ng/ml. Prelievi di sangue frequenti inizieranno alle 1900 h e continueranno per 14 h come segue: LH ogni 10 min (1 ml); e FSH ogni 10 min (non è richiesto sangue aggiuntivo); P, E2, T, DHEA e cortisolo ogni 30 min (1 ml). Un ulteriore campione di 0,3 cc verrà prelevato alle 07:00 per testare la glicemia a digiuno. Insulina a digiuno, SHBG, estrone, androstenedione, DHEA-S saranno eseguiti su campioni raggruppati dalle 05:00 alle 07:00.

Le luci si spegneranno alle 22:00 per facilitare il sonno, che sarà accuratamente registrato da osservatori addestrati. Durante il prelievo di sangue, l'attività (ad es. sveglio, addormentato) sarà registrato dall'infermiere ogni 10 minuti. Inoltre, i periodi di sonno saranno stimati utilizzando l'attigrafia del polso (Motionlogger Basic-L; Ambulator Monitoring, Inc.) Il Motionlogger Basic-L è un dispositivo simile a un orologio (che include un accelerometro) che verrà indossato sul polso non dominante dal partecipante alla ricerca durante il ricovero notturno. Ci sarà un digiuno notturno dalle 22:00 alle 07:00. I soggetti saranno svegliati alle 07:00. Il campionamento cesserà alle 09:00.

Durante il ricovero, verranno prelevati ~ 150 ml di sangue (inclusi 0,25 ml scartati con ciascun campione). La quantità totale di sangue che verrà prelevata durante lo studio, inclusi lo screening, il campionamento P ambulatoriale e il ricovero ospedaliero è di ~ 170 ml. Uno dei genitori potrà pernottare con il soggetto durante il ricovero. Dopo il prelievo dell'ultimo campione, i volontari verranno dimessi con integrazione orale di ferro da assumere per 30 giorni.

Seguito:

Faremo ogni sforzo per seguire i soggetti (tramite CRU ambulatoriale o visite cliniche) a intervalli da 6 a 12 mesi per un massimo di 3 anni per valutare la progressione della pubertà, l'insorgenza e la frequenza delle mestruazioni e lo sviluppo di segni di iperandrogenismo (ad es. irsutismo). Otterremo sangue per LH, FSH, E2, P e T durante queste visite di follow-up. Queste visite di follow-up saranno incoraggiate, ma non obbligatorie.