B12-vitamiinilisä raskauden aikana

Tutkimusalue: Mirpurissa sijaitseva äitiysklinikka, johon ilmoittautuu joka kuukausi huomattava määrä raskaana olevia naisia ​​(noin 300-400/kk), valitaan paikallisten raskaana olevien naisten rekrytointiin. Mirpurin yhteisössä on alhainen muuttoaste. Valitaan raskaana olevat naiset, jotka käyvät klinikalla 11-14 raskausviikolla ja suunnittelevat synnytystä klinikalla turvallisen synnytyksen varmistamiseksi. Jokaiselle tutkimukseen osallistuneelle tarjotaan klinikan jäsennelty palvelu ja normaali synnytyshuolto turvallista synnytystä ja synnytystä varten.

Tutkimuspopulaatio: Raskaana olevat naiset (n=120) seulotaan 11-14 raskausviikon aikana. Vauvat (n=120) 3 kuukauden iässä.

Sisällyttämiskriteerit:

• Hb-taso välillä 7,0-11 g/dl
• Ikä: 22-35 vuotta
• Äidit toisen raskauskolmanneksen alussa (eli 11-14 raskausviikolla)
• Haluas jäädä Dhakaan raskauden aikana ja halukas pääsemään klinikalle synnytystä varten
• Raskausiän määrittämiseen käytetään itse ilmoittamaa viimeistä kuukautisjaksoa (LMP) ja virtsaraskaustestiä.

Poissulkemiskriteerit:

• naiset, joilla on vaikea anemia; hemoglobiinipitoisuus <7,0 g/dl
• Systeemisen sairauden historia tai esiintyminen
• Aiempien monimutkaisten raskauksien tai ennenaikaisen synnytyksen, abortin H/O
• Influenssarokotteen vastaanotto Määritelmä: WHO:n mukaan anemia määritellään hemoglobiinipitoisuudeksi <12 g/dl aikuisilla naisilla. Anemia luokitellaan edelleen lieväksi (10-11.9 g/dl), kohtalainen (7,0-9,9 g/dl) ja vaikea (<7,0 g/dl).

Tutkimuksen suunnittelu: kaksoissokkokontrolloitu koe; Kun tietoinen suostumus on saatu, raskaana olevat naiset jaetaan satunnaisesti joko lumelääkeryhmään (N=60), joka saa 60 mg Fe:a ja 400 µg folaattia päivässä, tai lisäravinteiden ryhmään (N=60), joka saa 250 µg B12-vitamiinia lisätään 60 mg:aan Fe:a ja 400 ug:aan folaattia. Kolmas osapuoli (GlaxoSmithKline, Bangladesh) valmistaa ja toimittaa B12-vitamiinia tai lumelääkekapseleita pulloissa. Nämä kaksi kapselia ovat ulkonäöltään ja maultaan samanlaisia. He merkitsevät pulloihin A- ja B-merkinnät. Yrityksen vastuuhenkilöt pitävät sen luottamuksellisina tutkimuksen loppuun asti. Ensimmäisen osallistujan saama kapseli A tai B määritetään arvonnalla, jonka jälkeen jokainen vaihtoehtoinen osallistuja saa kyseisen kapselin. Osallistujien tunnukset annetaan peräkkäin. Päivittäinen rauta-folaatin ja B12:n lisäravinteet jatkuvat jopa 3 kuukautta synnytyksen jälkeen. 26–28 raskausviikolla kaikki äidit saavat yhden inaktivoidun, kolmiarvoisen influenssavirusrokotteen lihakseen (IM). Normaali inaktivoitu trivalenttinen influenssa, jota WHO suosittelee pohjoiselle pallonpuoliskolle, hankitaan kaupallisista lähteistä tätä hanketta varten (GlaxoSmithKline; Dresden, Saksa). Kenttätyöntekijät (FW) jakavat kahden viikon annoksen joko lumelääkettä tai lisäravinteita äideille henkilökohtaisesti ja tarkistavat vaatimustenmukaisuuden kortilla ja ylijääneillä pillereillä. Raskaana oleville naisille kerrotaan selkeästi seuraavien seurantakäyntien ajankohdat, ja kun heitä seurataan vastaavissa kodeissa, heitä muistutetaan päivämäärästä.

Rutiinipalvelu: Klinikan rutiinihoito sisältää Hb-mittauksen, fyysisen tarkastuksen (paino, verenpaine, pulssi, vatsan tarkastus, sikiön syke, ultraäänitutkimus tarpeen mukaan), ruokavalioneuvontaa, kuvaukset normaaleista toimenpiteistä raskauden aikana , niihin liittyvät mahdolliset komplikaatiot, miten ja milloin mennä klinikalle tällaisten tapahtumien aikana jne. Tämän palvelun tarjoaa klinikan lääkäri sairaanhoitajien avustuksella.

Näytteet: Äideiltä otetaan paastoveri 11–14 raskausviikolla, napanuoraveri synnytyksen yhteydessä, ternimaito 24 tunnin sisällä ja rintamaito ja perifeerinen veri äideiltä kolmen kuukauden kuluttua synnytyksen jälkeen. Vauvojen perifeerinen veri kerätään kolmen kuukauden iässä. Veri kerätään antikoagulantilla (EDTA) päällystettyihin putkiin ja kerrostetaan Ficoll-paquelle tiheysgradienttisentrifugointia varten; plasma erotetaan ylhäältä ja säilytetään -70 ºC:ssa myöhempää analyysiä varten. Perifeerisen veren mononukleaarisolut (PBMC) erotetaan solujen immuunivasteiden tutkimista varten. Virtsa kerätään äideiltä 11-14 raskausviikolla ja kolmen kuukauden iässä. Geenipohjaisissa tutkimuksissa DNA-näytteiden linkit irrotetaan ja identiteetti tehdään anonyymisti standardimenettelyjen mukaisesti.

Menetelmät: Kokoveren kokonaishemoglobiini (Hb) mitataan spektrofotometrialla käyttämällä Drabakins-reagenssia (Sigma Diagnostics). Standardoitua verinäytteen värjäystä käytetään megaloblastisen anemian (makroovalosyyttien ja hypersegmentoituneiden neutrofiilien läsnäolo) arvioimiseen. Ferritiini, seerumin transferriinireseptori (sTfR) ja α-glykoproteiini (AGP) mitataan plasmasta entsyymi-immuunimäärityksillä. Plasman B12-vitamiini ja folaatti sekä rintamaidon B12-vitamiini määritetään Roche autoanalyzer Cobas e411 -laitteella. Virtsan metyylimalonihappo (MMA) mitataan fluoresenssidetektoriavusteisella HPLC-menetelmällä (Sigma Diagnostics, St. Louis, MO. Lyhyesti MMA uutetaan virtsanäytteestä etyyliasetaatilla. Uute kuivataan ja derivatisoidaan monodansyylikadaveriinilla ja disykloheksyylikarbodi-imidillä ennen injektiota HPLC:hen. Etyylimalonihappoa käytetään sisäisenä standardina. Influenssarokotespesifiset vasta-ainevasteet (IgA, IgG) plasmasta ja ternimaitoa/rintamaidosta [erittävä IgA (s-IgA)] mitataan ELISA:lla. PBMC:tä stimuloidaan influenssarokotteella blastogeneesivasteen saamiseksi. Genominen DNA:n metylaatio mitataan metyylin hyväksymismäärityksellä, joka perustuu eristetyn DNA:n kykyyn "hyväksyä" radioleimattuja metyyliryhmiä S-[3H-metyyli]adenosyylimetioniinista käyttämällä bakteerin CpG-metyylitransferaasia SssI. Kokonaishomokysteiini (tHcy) mitataan virtsanäytteistä käyttämällä HPLC:tä fluorimetrisellä detektiolla, jossa kolonnin poistoveden tiolit havaitaan yhdellä kulta-elohopeaelektrodilla. NaBH4:ää käytetään pelkistimenä, eikä näytteen derivatisointia tarvita. ALPL-, MTHFR C677T- ja FUT2-geenien mutaatiot määritetään PCR-RFLP-määrityksellä ja DNA-sekvensoinnilla. Kaikki nämä määritykset suoritetaan Nutritional Biochemistry Lab -laboratoriossa, jossa on tilat anemian biokemiallisten markkerien, rokotespesifisten vasta-ainevasteiden, DNA-metylaatio- ja polymorfismin määrittämiseen.

Antropometrian ja sairastuvuuden arviointi: Koulutetut eläimet tekevät äidin antropometriset mittaukset täydennyshoidon alussa ja kuukausittain täydennyshoidon jälkeisenä aikana. Syntymäpaino ja makuuasennon pituus mitataan 72 tunnin sisällä syntymästä ja FW ottaa kuukausittaiset mittaukset 3 kuukauden ikään asti. Field Research Assistant (FRA) kerää jokaisella käynnillä (kahden viikon välein) tietoja äideiltä äitien ja heidän vauvojensa sairastuvuudesta (esim. ripuli, hengitystieinfektiot, ihosairaudet, sairauskohtausten vakavuuden arviointi) viimeisen 7 päivän aikana strukturoiduilla kyselylomakkeilla. FRA ilmoittaa naisille ensimmäisten ja myöhempien seurantakäyntien ajankohdat ja varmistaa, että he ovat ymmärtäneet selvästi. Lisäksi tutkimukseen osallistuneisiin otetaan yhteyttä matkapuhelimiin, kun he ovat saatavilla, jotta heitä muistutetaan vierailupäivistä. Kun heitä seurataan vastaavissa kodeissa, heitä muistutetaan seuraavan vierailun päivämäärästä.

Masennuspisteet: Osallistujia haastatellaan heidän henkisestä tilastaan ​​käyttämällä Center for Epidemiological Studies-Depression (CES-D) -kyselylomaketta. Kysely sisältää 20 kohtaa, jotka käsittävät kuusi masennuksen pääasiaa: masentunut mieliala, toivottomuus, arvottomuus, väsymys, ruokahalu ja unihäiriöt. Se käännettiin bengaliksi ja pilotoitiin aikaisemmissa tutkimuksissa, ja se sisältää naisten tunteen edellisten 7 päivän aikana. Sitä on aiemmin käytetty bangladeshilaisnaisilla maaseudulla ja kaupungeissa (Hamadani, julkaisematon data) ja sen on havaittu korreloivan järkevästi lasten kasvuun ja kehitykseen. FRA:t koulutetaan laajasti haastattelemaan naisia ​​ja tarkkailijoiden välinen luotettavuus hankitaan ennen tutkimusta ja sen aikana. Haastattelu suoritetaan kahdesti naisten kodeissa FRA:n vierailujen aikana, ensin lähtötilanteessa ja 3 kuukautta synnytyksen jälkeen. Tiedot analysoi ja tulkitsee yksi tutkijoista (JDH), jolla on tietoa ja kokemusta tämäntyyppisten tietojen käsittelystä.

Elintarviketurva ja ruokavalion monimuotoisuus: Elintarviketurvan puutteen vaikutus ruoan saantiin, terveyteen ja ravitsemustilaan on havaittu monissa kehitysmaissa, ja ruokahuollon päivittäiset kokonaiskulut henkeä kohti ovat huomattavasti pienemmät kuin elintarviketurvassa olevissa kotitalouksissa. Ruokaturvaan liittyi äidin ahdistuneisuus ja masennus, joilla voi olla vahva negatiivinen vaikutus vauvojen hoitokäytäntöihin, mukaan lukien imetyksen kestoon sekä lapsen ravitsemustilaan. Noin puolet Bangladeshin väestöstä on ruokaturvaton. Nälkä ja lapsuuden aliravitsemus ovat Bangladeshissa maailman korkeimpia. Noin 31 % Bangladeshin maaseutuväestöstä kärsii "kroonisesta köyhyydestä" ja noin 19 % maaseututalouksista ei voi syödä "täydellistä kolmea ateriaa" päivässä. Näin ollen kotitalouksien elintarviketurvan puute suhteessa sen valtavaan vaikutukseen ihmisten terveyteen ja ravitsemustilaan on kasvava huolenaihe Bangladeshissa. Kotitalouksien elintarviketurvallisuus ja tutkimukseen osallistuneiden ruokavalion monimuotoisuus (mukaan lukien äidin ruokavalion energia, proteiini, B-12-vitamiini ja folaatin saanti) arvioidaan ensin lähtötilanteessa, kun raskaana olevat naiset otetaan mukaan tutkimukseen ja sen jälkeen kahden viikon välein koko tutkimuksen ajan. opiskella. USDA:n elintarvikekoostumustietokantaa käytetään B-12-vitamiinin saannin arvioimiseen. Elintarviketurvatilanteen kausivaihtelut, joilla voi olla merkittävää vaikutusta lopputulokseen, arvioidaan. Elintarviketurvamoduulin strukturoidulla kyselylomakkeella mitataan kotitalouksien elintarviketurvan tilaa. FRA:t koulutetaan haastattelemaan naisia; he tekevät haastatteluja, kun he tekevät vierailuja synnytystä edeltävien ja synnytyksen jälkeisten jaksojen aikana kotona. Tiedot analysoi ja tulkitsee yksi tutkijoista (KKS), jolla on tietoa ja kokemusta tämäntyyppisten tietojen käsittelystä.