B12-vitamin pótlás terhesség alatt

Vizsgálati terület: Egy mirpuri szülészeti klinikát választanak ki, ahol jelentős számú terhes nő jelentkezik be minden hónapban (kb. 300-400/hónap) a helyi terhes nők toborzására. A mirpuri közösségben alacsony a kivándorlási arány. Kiválasztják azokat a terhes nőket, akik a terhesség 11-14. hetében járnak a klinikára, és a klinikán szülést terveznek a biztonságos szülés biztosítása érdekében. A klinika strukturált szolgáltatását és szabványos terhesgondozását a biztonságos szülés és a terhesgondozás érdekében minden vizsgálati résztvevő megkapja.

Vizsgálati populáció: A terhes nőket (n=120) a terhesség 11-14. hetében szűrik. Csecsemők (n=120) 3 hónapos korban.

Bevételi kritériumok:

• Hb-szint 7,0-11 g/dl tartományban
• Kor: 22-35 év
• Anyák a második trimeszter elején (azaz a terhesség 11-14. hetében)
• Terhesség alatt hajlandó Dakában maradni, és hajlandó felvenni a klinikára a szülést
• A terhességi kor meghatározásához saját bevallású utolsó menstruációs periódus (LMP) és vizelet terhességi teszt kerül felhasználásra.

Kizárási kritériumok:

• Súlyos vérszegénységben szenvedő nők; hemoglobin koncentráció <7,0 g/dl
• Szisztémás betegség története vagy jelenléte
• Korábbi szövődményes terhességek vagy koraszülés, abortusz H/O
• Az influenza elleni védőoltás átvétele Definíció: A WHO szerint vérszegénységnek minősül, ha a hemoglobin koncentrációja <12 g/dl felnőtt nőkben. A vérszegénységet az enyhe kategóriába sorolják (10-11,9 g/dl), közepes (7,0-9,9 g/dl) és súlyos (<7,0 g/dl).

Vizsgálat tervezése: kettős vak, kontrollált vizsgálat; A tájékozott beleegyezés megszerzése után a várandós nőket véletlenszerűen besorolják a placebo csoportba (N=60), amely napi 60 mg Fe-t és 400 µg folátot kap, vagy a Kiegészítő csoportba (N=60), amelyik 250 µg B12-vitamint kap. 60 mg Fe és 400 µg folát hozzáadása. Egy harmadik fél (GlaxoSmithKline, Banglades) B12-vitamint vagy placebo kapszulát készít és szállít palackokban. A két kapszula megjelenésében és ízében hasonló lesz. A palackokat A és B címkével látják el. A vállalat felelős munkatársai a vizsgálat végéig bizalmasan kezelik. Az A vagy B kapszulát, amelyet az 1. résztvevő kap, sorsolással határozzák meg, majd ezt követően minden helyettes résztvevő megkapja azt a kapszulát. A résztvevők azonosítóit sorban adjuk meg. A vas-folát, valamint a B12 napi pótlása a szülés után 3 hónapig folytatódik. A terhesség 26-28. hetében minden anya egyetlen inaktivált, háromértékű influenzavírus elleni vakcinát kap intramuszkulárisan (IM). A WHO által az északi féltekére javasolt standard inaktivált trivalens influenza kereskedelmi forrásokból lesz beszerezve ehhez a projekthez (GlaxoSmithKline; Drezda, Németország). A terepmunkások (FW) kéthetes adag placebót vagy táplálékkiegészítőket személyesen juttatnak el az anyákhoz, és kártyával és a maradék tablettákkal ellenőrzik a megfelelőséget. A várandós nőket világosan tájékoztatják a későbbi utóellenőrzési látogatásuk időpontjáról, és amikor az adott otthonban követik őket, emlékeztetik őket az időpontokra.

Rutinszerviz: A klinika által nyújtott rutin ellátás magában foglalja a Hb mérést, fizikális vizsgálatot (súly, vérnyomás, pulzusszám, hasi vizsgálat, magzati pulzusszám, szükség szerint ultrahangos vizsgálat), étrendi tanácsadást, normál terhességi eljárások leírását. , a kapcsolódó lehetséges szövődmények, hogyan és mikor kell ilyen események során a klinikára menni stb. Ezt a szolgáltatást a klinika orvosa nyújtja a nővérek segítségével.

Minták: Az éhgyomri perifériás vért az anyáktól a terhesség 11-14. hetében, a köldökzsinórvért a szüléskor, a kolosztrumot 24 órán belül, az anyatejet és a perifériás vért pedig három hónappal a szülés után veszik. A csecsemőktől három hónapos korban perifériás vért gyűjtenek. A vért antikoaguláns (EDTA) bevonatú csövekbe gyűjtik, és Ficoll-paque-ra rétegezik a sűrűséggradiens centrifugáláshoz; A plazmát leválasztják a tetejéről, és -70 °C-on tárolják későbbi elemzés céljából. A perifériás vér mononukleáris sejtjeit (PBMC) elkülönítik a celluláris immunválaszok tanulmányozása céljából. Az anyáktól a vizeletet a terhesség 11-14. hetében és három hónapos korában gyűjtik. A génalapú vizsgálatokhoz a DNS-mintákat szétválasztják, és az azonosságot anonimmá teszik a szokásos eljárások szerint.

Módszerek: A teljes vérben a teljes hemoglobint (Hb) spektrofotometriával mérjük, Drabakins Reagent (Sigma Diagnostics) segítségével. A megaloblasztos vérszegénység (macroovalocyták és hiperszegmentált neutrofilek jelenléte) értékelésére standardizált vérkenetet használnak. A ferritint, a szérum transzferrin receptort (sTfR) és az α-glikoproteint (AGP) enzimes immunvizsgálatokkal mérik a plazmában. A B12-vitamint és a folátot a plazmában, valamint a B12-vitamint az anyatejben a Roche Cobas e411 autoanalyzerrel vizsgálják. A vizelet metil-malonsavat (MMA) fluoreszcens detektorral segített HPLC-módszerrel mérjük (Sigma Diagnostics, St. Louis, MO. Röviden, az MMA-t a vizeletmintából etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot szárítjuk, és monodanzil-kadaverinnel és diciklohexil-karbodiimiddel derivatizáljuk, mielőtt a HPLC-n injektálnánk. Belső standardként etil-malonsavat használnak. Az influenzavakcina-specifikus antitestválaszokat (IgA, IgG) a plazmában és a kolosztrumban/anyatejben [szekréciós IgA (s-IgA)] ELISA-val mérik. A PBMC-t influenza vakcinával stimulálják a blasztogenzisre adott válasz érdekében. A genomi DNS-metilációt a metil-elfogadási vizsgálattal mérjük, amely az izolált DNS azon képessége alapján történik, hogy "elfogadja" az S-[3H-metil]adenozil-metioninból radioaktívan jelölt metilcsoportokat, a bakteriális CpG metiltranszferáz SssI segítségével. A vizeletmintákban a teljes homociszteint (tHcy) HPLC-vel, fluorimetriás detektálással mérjük, amelyben az oszlop kifolyó folyadékában lévő tiolokat egyetlen arany-higany elektróddal detektáljuk. NaBH4-et redukálószerként használnak, és nincs szükség a minta származékképzésére. Az ALPL, MTHFR C677T és FUT2 gének mutációit PCR-RFLP vizsgálattal és DNS szekvenálással határozzuk meg. Mindezeket a vizsgálatokat a Nutritional Biochemistry Lab-ban végzik el, amely rendelkezik a vérszegénység biokémiai markereinek, a vakcina-specifikus antitestválaszok, a DNS-metiláció és a polimorfizmus vizsgálatának meghatározására szolgáló eszközökkel.

Az antropometria és a morbiditás értékelése: Az anyai antropometriai méréseket a kiegészítés kezdetén és a kiegészítés utáni időszakban havonta végeznek képzett FW-k. A születési súlyt és a fekvő hosszt a születést követő 72 órán belül megméri, és havi méréseket végez az FW 3 hónapos korig. A Field Research Assistant (FRA) minden egyes látogatás alkalmával (kéthetente) adatokat gyűjt az anyáktól az anyák és csecsemőik morbiditásával kapcsolatban (pl. hasmenés, légúti fertőzések, bőrbetegségek, betegségepizódok súlyosságának felmérése) az elmúlt 7 napban strukturált kérdőívek segítségével. Az FRA tájékoztatja a nőket az első és az azt követő nyomon követési látogatások időpontjáról, és megbizonyosodik arról, hogy egyértelműen megértették-e. Ezenkívül a vizsgálat résztvevőivel mobiltelefonon is felveszik a kapcsolatot, ha rendelkezésre állnak, hogy emlékeztessenek őket a látogatás időpontjaira. Amikor a megfelelő otthonokban nyomon követik őket, emlékeztetik őket a következő látogatási dátumokra.

Depressziós pontszám: A résztvevőket az Epidemiological Studies-Depression Központ (CES-D) kérdőív segítségével kérdezik meg mentális állapotukról. A kérdőív 20 elemet tartalmaz, amelyek a depresszió hat fő aspektusát tartalmazzák: depressziós hangulat, kilátástalanság, értéktelenség, fáradtság, étvágy és alvászavarok. Lefordították bengálira, és korábbi tanulmányokban kísérleteztek, és bemutatja, hogyan érezték magukat a nők az előző 7 napban. Korábban vidéki és városi bangladesi nőknél használták (Hamadani, nem publikált adatok), és azt találták, hogy ésszerűen korrelál a gyermekek növekedésével és fejlődésével. Az FRA-kat alaposan kiképzik a nők interjúztatására, és a megfigyelők közötti megbízhatóságot a vizsgálat előtt és alatt is meg fogják szerezni. Az interjút kétszer készítik el a nők otthonában az FRA látogatásai során, először a kiinduláskor és a szülés után 3 hónappal. Az adatokat az egyik nyomozótárs (JDH) elemzi és értelmezi, aki rendelkezik ismeretekkel és tapasztalatokkal az ilyen típusú információk kezelésében.

Élelmiszerbiztonság és táplálkozási sokféleség: Az élelmezés-bizonytalanság hatását az élelmiszer-bevitelre, az egészségi állapotra és a táplálkozási állapotra számos fejlődő országban megfigyelték, ahol az élelmezésbiztos háztartásokban az egy főre jutó napi teljes élelmiszer-kiadás jelentősen alacsonyabb, mint az élelmezésbiztos háztartásokban. Az élelmiszer-ellátás bizonytalansága az anyai szorongással és depresszióval volt összefüggésben, ami erős negatív hatással lehet a csecsemőgondozási gyakorlatra, beleértve a szoptatás időtartamát, valamint a gyermek tápláltsági állapotát. A bangladesi lakosság körülbelül fele élelmezéshiányban szenved. Az éhezés és a gyermekkori alultápláltság Bangladesben az egyik legmagasabb a világon. Banglades vidéki lakosságának körülbelül 31%-a "krónikus szegénységben" szenved, és a vidéki háztartások körülbelül 19%-a nem tud napi háromszor teljes étkezést. Így a háztartások élelmiszer-ellátásának bizonytalansága az emberi egészségre és táplálkozási állapotra gyakorolt ​​óriási hatásával összefüggésben egyre nagyobb aggodalomra ad okot Bangladesben. A vizsgálatban részt vevők háztartási élelmezésbiztonsági állapotát és étrendi változatosságát (beleértve az anyai étrendi energiát, a fehérjét, a B-12-vitamint és a folátbevitelt) először az alapvonalon, amikor a terhes nőket bevonják a vizsgálatba, majd kéthetente a vizsgálat során. tanulmány. Az USDA élelmiszer-összetételi adatbázisát fogják használni a B-12-vitamin bevitel értékelésére. Az élelmezésbiztonsági státusz minden olyan szezonális változását értékeljük, amely jelentős hatással lehet az eredménymutatókra. Az élelmezésbiztonsági modulra vonatkozó strukturált kérdőívet a háztartások élelmezésbiztonsági állapotának mérésére használjuk. Az FRA-kat kiképezik a nők interjúira; interjúkat készítenek, amikor a szülés előtti és a szülés utáni időszakban otthoni látogatást tesznek. Az adatokat a társnyomozók (KKS) egyike elemzi és értelmezi, aki rendelkezik ismeretekkel és tapasztalatokkal az ilyen típusú információk kezelésében.